摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-15页 |
英文缩略词表 | 第15-16页 |
第一章 绪论 | 第16-30页 |
·血吸虫与疾病 | 第17-22页 |
·血吸虫 | 第17页 |
·血吸虫的致病性 | 第17-18页 |
·血吸虫肝纤维化的形成机制 | 第18-20页 |
·血吸虫性肝纤维化的治疗措施 | 第20-22页 |
·间质干细胞的特性及应用 | 第22-29页 |
·间质干细胞来源 | 第22页 |
·间质干细胞的表面标志和基因表达 | 第22-23页 |
·间质干细胞的生物学功能 | 第23-24页 |
·间质干细胞在疾病治疗中的应用 | 第24-29页 |
·间质干细胞与血吸虫病 | 第29-30页 |
第二章 研究目的、方法、实验设计及意义 | 第30-33页 |
·研究目的 | 第30页 |
·研究方法 | 第30-31页 |
·体内实验 | 第30页 |
·体外实验 | 第30-31页 |
·实验设计 | 第31-32页 |
·体内实验设计 | 第31-32页 |
·体外实验设计 | 第32页 |
·研究意义 | 第32-33页 |
第三章 日本血吸虫感染小鼠肝纤维化模型的建立 | 第33-42页 |
·实验材料与仪器 | 第33-34页 |
·方法 | 第34-36页 |
·小鼠血吸虫性肝纤维化模型的建立 | 第34页 |
·血清标本处理 | 第34页 |
·小鼠肝脏组织标本的处理 | 第34-35页 |
·病理切片的制作和染色 | 第35-36页 |
·结果 | 第36-40页 |
·日本血吸虫感染小鼠状态、肝脏及脾脏形态 | 第36-37页 |
·不同剂量日本血吸虫感染小鼠生存时期观察 | 第37-38页 |
·日本血吸虫感染小鼠肝脏病理改变 | 第38-39页 |
·日本血吸虫感染小鼠肝脏组织切片Masson's三色染色结果 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
·小结 | 第41-42页 |
第四章 大鼠骨髓间质干细胞的分离培养 | 第42-47页 |
·实验材料与仪器 | 第42-43页 |
·实验材料 | 第42页 |
·主要仪器 | 第42-43页 |
·主要试剂 | 第43页 |
·方法 | 第43-44页 |
·大鼠骨髓间质干细胞分离 | 第43页 |
·大鼠骨髓间质干细胞培养 | 第43页 |
·大鼠骨髓间质干细胞的成脂诱导 | 第43-44页 |
·结果 | 第44-45页 |
·大鼠骨髓间质干细胞形态观察 | 第44页 |
·大鼠骨髓间质干细胞成脂肪诱导 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-46页 |
·小结 | 第46-47页 |
第五章 骨髓间质干细胞改善血吸虫诱导的小鼠肝纤维化 | 第47-71页 |
·实验材料与仪器 | 第47-48页 |
·实验材料 | 第47-48页 |
·主要仪器 | 第48页 |
·主要试剂 | 第48页 |
·方法 | 第48-55页 |
·小鼠血吸虫性肝纤维化模型的建立(用于生存分析) | 第48-49页 |
·小鼠血吸虫性肝纤维化模型的建立(用于MSCs疗效观察) | 第49页 |
·大鼠骨髓间质干细胞的准备 | 第49页 |
·大鼠骨髓间质干细胞的移植及吡喹酮的应用 | 第49页 |
·标本的收集和处理 | 第49-50页 |
·引物设计 | 第50页 |
·小鼠一般状态及肝脏、脾脏体重指数 | 第50页 |
·双抗体夹心ABC-ELISA检测血清TGF-β1 | 第50-51页 |
·化学发光法测血清透明质酸(HA) | 第51页 |
·肝组织中总RNA提取 | 第51-52页 |
·逆转录 | 第52页 |
·荧光定量PCR | 第52-53页 |
·病理及免疫组织化学 | 第53-54页 |
·平均虫卵肉芽肿直径的测量 | 第54页 |
·蛋白印迹技术(Western blotting) | 第54-55页 |
·统计学分析 | 第55页 |
·结果 | 第55-67页 |
·骨髓间质干细胞移植可以延长小鼠生存期 | 第55-56页 |
·骨髓间质干细胞改善小鼠一般状况、降低肝脏、脾脏指数 | 第56-58页 |
·骨髓间质干细胞移植能降低血清HA和TGF-β1水平 | 第58-59页 |
·骨髓间质干细胞促进肝脏组织学结构的修复 | 第59-61页 |
·骨髓间质干细胞能降低肝脏虫卵结节平均直径 | 第61-62页 |
·骨髓间质干细胞能抑制肝组织型Ⅲ型胶原mRNA的表达 | 第62页 |
·骨髓间质干细胞能抑制肝脏组织中胶原沉积 | 第62-65页 |
·骨髓间质干细胞诱导肝细胞MET发生 | 第65-67页 |
·讨论 | 第67-70页 |
·小结 | 第70-71页 |
第六章 骨髓间质干细胞培养上清抑制SEA诱导的巨噬细胞活化 | 第71-86页 |
·实验材料与仪器 | 第71-72页 |
·实验材料 | 第71-72页 |
·主要仪器 | 第72页 |
·主要试剂 | 第72页 |
·方法 | 第72-76页 |
·日本血吸虫感染家兔动物模型的建立 | 第72页 |
·血吸虫卵的分离、纯化和SEA的提取 | 第72-73页 |
·细胞培养 | 第73页 |
·细胞总RNA的提取和逆转录 | 第73页 |
·引物设计 | 第73-74页 |
·SEA对巨噬细胞最佳作用浓度的选择 | 第74页 |
·SEA对巨噬细胞最佳作用时间的选择 | 第74-75页 |
·骨髓间质干细胞和大鼠肾小管上皮细胞的培养和上清收集 | 第75页 |
·实验分组 | 第75页 |
·实时荧光定量PCR检测TNF-αmRNA转录水平 | 第75页 |
·Western blotting分析TGF-β1蛋白表达水平 | 第75-76页 |
·MTT比色法测定巨噬细胞增殖情况 | 第76页 |
·统计学分析 | 第76页 |
·结果 | 第76-83页 |
·SEA对巨噬细胞株RAW264.7形态的影响 | 第76-77页 |
·SEA活化巨噬细胞株RAW264.7的最佳浓度和时间 | 第77-78页 |
·MSCs培养上清作用12小时后巨噬细胞株RAW264.7形态 | 第78-79页 |
·MSCs培养上清对巨噬细胞株RAW264.7 TNF-α mRNA的影响 | 第79-80页 |
·MSCs培养上清对巨噬细胞株RAW264.7 TGF-β1蛋白表达的影响 | 第80-81页 |
·MSCs培养上清对巨噬细胞株RAW264.7增殖的影响 | 第81-83页 |
·讨论 | 第83-85页 |
·小结 | 第85-86页 |
结论与展望 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-103页 |
致谢 | 第103-104页 |
攻读博士期间发表的学术论文 | 第104页 |