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骨髓间质干细胞对血吸虫性肝纤维化修复作用的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-15页
英文缩略词表第15-16页
第一章 绪论第16-30页
   ·血吸虫与疾病第17-22页
     ·血吸虫第17页
     ·血吸虫的致病性第17-18页
     ·血吸虫肝纤维化的形成机制第18-20页
     ·血吸虫性肝纤维化的治疗措施第20-22页
   ·间质干细胞的特性及应用第22-29页
     ·间质干细胞来源第22页
     ·间质干细胞的表面标志和基因表达第22-23页
     ·间质干细胞的生物学功能第23-24页
     ·间质干细胞在疾病治疗中的应用第24-29页
   ·间质干细胞与血吸虫病第29-30页
第二章 研究目的、方法、实验设计及意义第30-33页
   ·研究目的第30页
   ·研究方法第30-31页
     ·体内实验第30页
     ·体外实验第30-31页
   ·实验设计第31-32页
     ·体内实验设计第31-32页
     ·体外实验设计第32页
   ·研究意义第32-33页
第三章 日本血吸虫感染小鼠肝纤维化模型的建立第33-42页
   ·实验材料与仪器第33-34页
   ·方法第34-36页
     ·小鼠血吸虫性肝纤维化模型的建立第34页
     ·血清标本处理第34页
     ·小鼠肝脏组织标本的处理第34-35页
     ·病理切片的制作和染色第35-36页
   ·结果第36-40页
     ·日本血吸虫感染小鼠状态、肝脏及脾脏形态第36-37页
     ·不同剂量日本血吸虫感染小鼠生存时期观察第37-38页
     ·日本血吸虫感染小鼠肝脏病理改变第38-39页
     ·日本血吸虫感染小鼠肝脏组织切片Masson's三色染色结果第39-40页
   ·讨论第40-41页
   ·小结第41-42页
第四章 大鼠骨髓间质干细胞的分离培养第42-47页
   ·实验材料与仪器第42-43页
     ·实验材料第42页
     ·主要仪器第42-43页
     ·主要试剂第43页
   ·方法第43-44页
     ·大鼠骨髓间质干细胞分离第43页
     ·大鼠骨髓间质干细胞培养第43页
     ·大鼠骨髓间质干细胞的成脂诱导第43-44页
   ·结果第44-45页
     ·大鼠骨髓间质干细胞形态观察第44页
     ·大鼠骨髓间质干细胞成脂肪诱导第44-45页
   ·讨论第45-46页
   ·小结第46-47页
第五章 骨髓间质干细胞改善血吸虫诱导的小鼠肝纤维化第47-71页
   ·实验材料与仪器第47-48页
     ·实验材料第47-48页
     ·主要仪器第48页
     ·主要试剂第48页
   ·方法第48-55页
     ·小鼠血吸虫性肝纤维化模型的建立(用于生存分析)第48-49页
     ·小鼠血吸虫性肝纤维化模型的建立(用于MSCs疗效观察)第49页
     ·大鼠骨髓间质干细胞的准备第49页
     ·大鼠骨髓间质干细胞的移植及吡喹酮的应用第49页
     ·标本的收集和处理第49-50页
     ·引物设计第50页
     ·小鼠一般状态及肝脏、脾脏体重指数第50页
     ·双抗体夹心ABC-ELISA检测血清TGF-β1第50-51页
     ·化学发光法测血清透明质酸(HA)第51页
     ·肝组织中总RNA提取第51-52页
     ·逆转录第52页
     ·荧光定量PCR第52-53页
     ·病理及免疫组织化学第53-54页
     ·平均虫卵肉芽肿直径的测量第54页
     ·蛋白印迹技术(Western blotting)第54-55页
     ·统计学分析第55页
   ·结果第55-67页
     ·骨髓间质干细胞移植可以延长小鼠生存期第55-56页
     ·骨髓间质干细胞改善小鼠一般状况、降低肝脏、脾脏指数第56-58页
     ·骨髓间质干细胞移植能降低血清HA和TGF-β1水平第58-59页
     ·骨髓间质干细胞促进肝脏组织学结构的修复第59-61页
     ·骨髓间质干细胞能降低肝脏虫卵结节平均直径第61-62页
     ·骨髓间质干细胞能抑制肝组织型Ⅲ型胶原mRNA的表达第62页
     ·骨髓间质干细胞能抑制肝脏组织中胶原沉积第62-65页
     ·骨髓间质干细胞诱导肝细胞MET发生第65-67页
   ·讨论第67-70页
   ·小结第70-71页
第六章 骨髓间质干细胞培养上清抑制SEA诱导的巨噬细胞活化第71-86页
   ·实验材料与仪器第71-72页
     ·实验材料第71-72页
     ·主要仪器第72页
     ·主要试剂第72页
   ·方法第72-76页
     ·日本血吸虫感染家兔动物模型的建立第72页
     ·血吸虫卵的分离、纯化和SEA的提取第72-73页
     ·细胞培养第73页
     ·细胞总RNA的提取和逆转录第73页
     ·引物设计第73-74页
     ·SEA对巨噬细胞最佳作用浓度的选择第74页
     ·SEA对巨噬细胞最佳作用时间的选择第74-75页
     ·骨髓间质干细胞和大鼠肾小管上皮细胞的培养和上清收集第75页
     ·实验分组第75页
     ·实时荧光定量PCR检测TNF-αmRNA转录水平第75页
     ·Western blotting分析TGF-β1蛋白表达水平第75-76页
     ·MTT比色法测定巨噬细胞增殖情况第76页
     ·统计学分析第76页
   ·结果第76-83页
     ·SEA对巨噬细胞株RAW264.7形态的影响第76-77页
     ·SEA活化巨噬细胞株RAW264.7的最佳浓度和时间第77-78页
     ·MSCs培养上清作用12小时后巨噬细胞株RAW264.7形态第78-79页
     ·MSCs培养上清对巨噬细胞株RAW264.7 TNF-α mRNA的影响第79-80页
     ·MSCs培养上清对巨噬细胞株RAW264.7 TGF-β1蛋白表达的影响第80-81页
     ·MSCs培养上清对巨噬细胞株RAW264.7增殖的影响第81-83页
   ·讨论第83-85页
   ·小结第85-86页
结论与展望第86-87页
参考文献第87-103页
致谢第103-104页
攻读博士期间发表的学术论文第104页

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