摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-22页 |
1 根结线虫的研究进展 | 第11-15页 |
·根结线虫的分类与鉴定 | 第11-12页 |
·根结线虫病的发生与危害 | 第12页 |
·根结线虫病的防治 | 第12-15页 |
·根结线虫的化学防治 | 第13页 |
·根结线虫的生物防治 | 第13-15页 |
·利用天敌 | 第13-14页 |
·利用微生物和高等植物产生的拮抗代谢物 | 第14-15页 |
·根结线虫病的物理防治 | 第15页 |
·根结线虫病的农业防治 | 第15页 |
2 淡紫拟青霉的生物学特性及生防应用 | 第15-17页 |
·淡紫拟青霉的分类地位和生物学特性 | 第16页 |
·淡紫拟青霉对线虫的作用机制 | 第16-17页 |
3 绿色荧光蛋白的应用 | 第17-20页 |
·绿色荧光蛋白分子特性 | 第17页 |
·绿色荧光蛋白的基因克隆 | 第17页 |
·绿色荧光蛋白在植物细胞中的应用 | 第17-18页 |
·绿色荧光蛋白(GFP)在真菌中的应用 | 第18-20页 |
·绿色荧光蛋白作为转录报告基因在基因中的应用 | 第18页 |
·绿色荧光蛋白随机插入真菌基因中作为转化子的应用 | 第18-19页 |
·绿色荧光蛋白在真菌细胞亚细胞中的应用 | 第19-20页 |
4 引言 | 第20-22页 |
第二章 淡紫拟青霉GFP载体的构建与荧光表达 | 第22-33页 |
1. 材料与方法 | 第22-25页 |
·材料来源 | 第22页 |
·方法 | 第22-25页 |
2 结果与分析 | 第25-31页 |
·不同梯度4个菌株单菌落生长情况 | 第25-27页 |
·种菌株GFP转化菌株的验证 | 第27-28页 |
·种菌株GFP转化菌株PCR扩增 | 第28-30页 |
·PCR产物的回收,克隆和测序 | 第30页 |
·southern blotting验证 | 第30-31页 |
·淡紫拟青霉菌株的转化效率 | 第31页 |
3 结论与讨论 | 第31-33页 |
第三章 淡紫拟青霉618’菌株发酵液与南方根结线虫互作后混合液蛋白酶变化研究 | 第33-40页 |
1 材料与方法 | 第33-34页 |
·淡紫拟青霉菌株来源、培养及发酵液的制备 | 第33页 |
·根结线虫卵的收集 | 第33-34页 |
·方法 | 第34页 |
·相同量菌液与不同量的卵悬浮液混合液中蛋白酶含量的变化 | 第34页 |
·相同量菌液和卵悬浮液不同时间蛋白酶含量的变化 | 第34页 |
·随着时间变化卵在菌液中的变化情况 | 第34页 |
·相同量菌液与不同量的卵悬浮液混合不同时间蛋白酶的变化 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34-38页 |
·同量菌液与不同量的卵悬浮液混合后蛋白酶含量的变化 | 第34-35页 |
·同量菌液和不同卵悬浮液的混合液在不同时间蛋白酶含量的变化 | 第35-37页 |
·同量菌液与不同量的卵悬浮液混合不同时间蛋白酶含量的变化 | 第37页 |
·随着时间变化根结线虫的卵在菌液中的形态变化情况 | 第37-38页 |
3 结论与讨论 | 第38-40页 |
第四章 淡紫拟青霉20-7菌株转化子侵染根结线虫卵、幼虫及成虫的研究 | 第40-46页 |
1 材料与方法 | 第40-41页 |
·根结线虫来源 | 第40页 |
·转化子悬浮液的配制 | 第40页 |
·20-7菌株转化子对根结线虫卵及幼虫的侵染 | 第40-41页 |
·实验方法 | 第41页 |
·不同时间孢子悬浮液对卵孵化数量的影响 | 第41页 |
·淡紫拟青霉20-7菌株转化子对根结线虫卵及幼虫的荧光显微观察 | 第41页 |
·淡紫拟青霉20-7菌株转化子对根结线虫卵侵染的扫描电镜观察 | 第41页 |
2 结果与分析 | 第41-44页 |
·不同时间淡紫拟青霉20-7菌株转化子孢子悬浮液对卵孵化数量的影响 | 第41-42页 |
·淡紫拟青霉20-7菌株转化子对根结线虫卵及幼虫的荧光显微观察 | 第42-43页 |
·淡紫拟青霉20-7菌株转化子对根结线虫成虫的扫描电镜观察 | 第43-44页 |
3 结论与讨论 | 第44-46页 |
第五章 根结线虫发病区根际土壤主要微生物种群结构 | 第46-56页 |
1 材料与方法 | 第46-52页 |
·材料来源 | 第46页 |
·实验方法 | 第46-47页 |
·土壤微生物的分离 | 第46-47页 |
·土壤含水量的测定 | 第46页 |
·菌液的配制 | 第46页 |
·培养基的配制 | 第46页 |
·细菌的分离 | 第46-47页 |
·真菌的分离 | 第47页 |
·放线菌的分离 | 第47页 |
·土壤微生物的鉴定 | 第47-52页 |
·分子生物学鉴定步骤 | 第47-51页 |
·形态学鉴定 | 第51-52页 |
2 结果与分析 | 第52-54页 |
·根结线虫发病区根际土壤中主要微生物的数量 | 第52页 |
·根结线虫发病区根际土壤中优势种细菌的种类和数量 | 第52-53页 |
·根结线虫发病区根际土壤中优势种真菌的种类和数量 | 第53页 |
·根结线虫发病区根际土壤中优势种放线菌的种类和数量 | 第53-54页 |
3 结论与讨论 | 第54-56页 |
第六章 根结线虫发病区根际土壤非生物因子研究 | 第56-61页 |
1 材料与方法 | 第56-57页 |
·材料来源和采集 | 第56页 |
·土壤含水量的测定 | 第56页 |
·根际土壤非生物因子测定 | 第56-57页 |
2 结果与分析 | 第57-59页 |
·根际土壤中有机质和全氮的含量与根结线虫病的关系 | 第57-58页 |
·土壤中有效磷和有效钾的含量 | 第58页 |
·根际土壤的pH值 | 第58-59页 |
3 结论与讨论 | 第59-61页 |
第七章 金属离子对淡紫拟青霉及其绿色荧光蛋白转化菌株生长的影响 | 第61-67页 |
1 材料与方法 | 第61-62页 |
·菌株 | 第61页 |
·培养基 | 第61页 |
·所用试剂及处理浓度 | 第61页 |
·方法 | 第61-62页 |
2 结果与分析 | 第62-65页 |
·铜离子浓度对淡紫拟青霉618’菌株及其转化子生长的影响 | 第62-63页 |
·镁离子对淡紫拟青霉及其转化子生长的影响 | 第63-64页 |
·铝离子对淡紫拟青霉及其转化子生长的影响 | 第64-65页 |
3 结论与讨论 | 第65-67页 |
第八章 结论与讨论 | 第67-70页 |
参考文献 | 第70-80页 |
附件1 | 第80-88页 |
附录A | 第88-95页 |
附录B | 第95-98页 |
附录C 实验室所用的仪器设备 | 第98-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
作者简介 | 第100-101页 |
所参与或发表的论文 | 第101页 |