| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-23页 |
| ·VDAC 蛋白 | 第9-19页 |
| ·VDAC 的结构 | 第9-12页 |
| ·VDAC 的定位 | 第12-14页 |
| ·VDAC 沉默对细胞的影响 | 第14-17页 |
| ·植物 VDAC | 第17-19页 |
| ·RNAi 技术 | 第19-22页 |
| ·RNA 干扰的发现 | 第19-20页 |
| ·RNA 干扰的分子作用机制 | 第20-21页 |
| ·RNA 干扰的特点 | 第21页 |
| ·RNAi 在植物中的应用 | 第21-22页 |
| ·本研究的主要内容、目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 5 个 osvdac 基因 RNAi 表达载体的构建 | 第23-39页 |
| ·前言 | 第23-24页 |
| ·材料和试剂 | 第24页 |
| ·试验材料 | 第24页 |
| ·试验试剂 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-32页 |
| ·RNAi 引物的设计 | 第24-25页 |
| ·总 RNA 的获得 | 第25-26页 |
| ·RNA 样品的 DNase I 处理 | 第26-27页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第27-28页 |
| ·RNAi 表达载体的构建 | 第28-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-37页 |
| ·目的片段的获得 | 第32-33页 |
| ·第一链的插入 | 第33-34页 |
| ·第二链的插入 | 第34-36页 |
| ·RNAi 表达载体的获得 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 干涉表达载体对水稻日本晴的遗传转化 | 第39-52页 |
| ·前言 | 第39页 |
| ·材料与试剂 | 第39页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·培养基 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-44页 |
| ·日本晴愈伤组织的诱导及继代培养 | 第39-40页 |
| ·RNAi 载体农杆菌的活化 | 第40页 |
| ·侵染及共培养 | 第40页 |
| ·筛选培养 | 第40-41页 |
| ·分化培养 | 第41页 |
| ·生根培养及大田移栽 | 第41页 |
| ·T0 代转化植株在 DNA 水平上的阳性鉴定 | 第41-42页 |
| ·T0 代阳性植株在 RNA 水平的定量检测 | 第42-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-50页 |
| ·RNAi 载体对日本晴的遗传转化 | 第44-45页 |
| ·干涉 osvdac7 基因转化植株的分子检测 | 第45-47页 |
| ·osvdac4 基因 RNAi 植株的分子检测 | 第47-49页 |
| ·所获 T0 代转化植株数量统计 | 第49页 |
| ·干涉 osvdac4 基因 T1 代植株的阳性检测 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 水稻 osvdac7 基因下调植株中 8 个 osvdac 的表达水平分析 | 第52-58页 |
| ·前言 | 第52页 |
| ·材料和试剂 | 第52页 |
| ·试验材料 | 第52页 |
| ·试验试剂 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-54页 |
| ·qRT-PCR 引物设计 | 第52-53页 |
| ·osvdac7 基因下调植株 RNA 的提取 | 第53页 |
| ·RNA 的 DNaseI 处理 | 第53页 |
| ·单链 cDNA 的合成 | 第53页 |
| ·cDNA 质量检测 | 第53页 |
| ·水稻 8 个 osvdac 基因的表达量分析 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 附录一：相关试剂及培养基的配制方法 | 第70-72页 |
| 附录二：相关激素和抗生素的配制 | 第72-73页 |
| 在读期间发表的论文 | 第73页 |
| 参与的科研课题及学术活动 | 第73页 |
