| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 縮略语的中英文对照 | 第11-13页 |
| 第一篇 文献综述 | 第13-29页 |
| 第一章 细胞重编程方法 | 第13-21页 |
| 1 核移植 | 第13-14页 |
| 2 细胞融合 | 第14-15页 |
| 3 iPSC | 第15-18页 |
| ·诱导方法 | 第15-16页 |
| ·重编程过程中面临的问题 | 第16-17页 |
| ·iPSC的临床应用价值 | 第17-18页 |
| 参考文献 | 第18-21页 |
| 第二章 组蛋白变异体H2A.Z研究进展 | 第21-29页 |
| 1 H2A.Z概述 | 第21-22页 |
| 2 H2A.Z掺入改变核小体结构 | 第22页 |
| 3 H2A.Z掺入到基因组的特殊位置 | 第22-23页 |
| 4 H2A.Z与转录调控 | 第23-24页 |
| 参考文献 | 第24-29页 |
| 第二篇 试验部分 | 第29-81页 |
| 第一章 小鼠iPSC的诱导及鉴定 | 第29-45页 |
| 1 实验方法 | 第29-37页 |
| ·MEF的培养 | 第29-31页 |
| ·饲养层细胞的制备 | 第31页 |
| ·mESC的培养 | 第31-32页 |
| ·逆转录病毒载体质粒的扩增 | 第32-33页 |
| ·逆转录病毒的包装 | 第33-34页 |
| ·逆转录病毒感染MEF及挑取克隆 | 第34页 |
| ·免疫荧光染色 | 第34-35页 |
| ·碱性磷酸酶检测 | 第35页 |
| ·畸胎瘤、石蜡切片及苏木精、伊红染色(HE染色) | 第35-37页 |
| ·核型分析 | 第37页 |
| 2 试验结果 | 第37-42页 |
| ·iPSC的诱导 | 第37-39页 |
| ·iPSC细胞的鉴定 | 第39-42页 |
| 3 讨论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-45页 |
| 第二章 小鼠体细胞重编程过程中的全基因组转录分析 | 第45-65页 |
| 1 实验方法 | 第45-49页 |
| ·诱导iPSC | 第45页 |
| ·RNA提取 | 第45-46页 |
| ·RNA浓度和纯度检测 | 第46页 |
| ·反转录 | 第46-47页 |
| ·qRT-RCR | 第47-48页 |
| ·表达芯片分析 | 第48-49页 |
| 2 试验结果 | 第49-58页 |
| ·iPSC细胞和MEF具有相反的表达模式 | 第49-51页 |
| ·重编程基因表达总体变化模式 | 第51-52页 |
| ·四个重编程因子OSKM的转录变化 | 第52-53页 |
| ·7D中特异上升及特异下降基因的GO分析 | 第53-55页 |
| ·重编程过程中分子事件分析 | 第55-57页 |
| ·P53信号转导通路是参与细胞重编程的关键环节 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-62页 |
| ·iPSC与ESC具有相似的基因表达特征 | 第58-59页 |
| ·7D的基因表达模式对于重编程起着重要的作用 | 第59-60页 |
| ·重编程过程中究竟发生了什么 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
| 第三章 小鼠体细胞重编程过程中H2A.Z的掺入及其与基因表达的关系 | 第65-81页 |
| 1 材料方法 | 第65-68页 |
| ·染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第65-67页 |
| ·高通量测序 | 第67页 |
| ·ChIP-Seq数据分析 | 第67-68页 |
| 2. 试验结果 | 第68-77页 |
| ·全基因组鉴定H2A.Z掺入位点 | 第68-71页 |
| ·转录起始位点附近H2A.Z掺入情况分析 | 第71-72页 |
| ·启动子区H2A.Z掺入与基因表达的关系 | 第72-76页 |
| ·H2A.Z靶基因GO分析 | 第76-77页 |
| 3 讨论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-81页 |
| 全文结论 | 第81-83页 |
| 创新点 | 第83-85页 |
| 致谢 | 第85-87页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第87-89页 |
| 附录 | 第89-92页 |