| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第8-13页 |
| 1 引言 | 第13-36页 |
| ·植物对逆境胁迫应答的激素信号转导途径 | 第13-19页 |
| ·乙烯合成和乙烯信号传导途径 | 第13-19页 |
| ·乙烯在植物体内的作用 | 第13-14页 |
| ·乙稀的合成及调控 | 第14-16页 |
| ·乙炼的信号传导途径 | 第16-19页 |
| ·植物对非生物胁迫的响应机制 | 第19-20页 |
| ·抗逆相关的转录因子 | 第20-26页 |
| ·转录因子的概念 | 第20页 |
| ·抗逆相关转录因子的分类 | 第20-26页 |
| ·ERF类转录因子的研究进展 | 第26-34页 |
| ·ERFs转录因子的结构特征 | 第26-28页 |
| ·ERFs转录因子在生物胁迫中的作用 | 第28-31页 |
| ·ERFs转录因子在非生物胁迫中的作用 | 第31-33页 |
| ·ERFs转录因子与其他转录因子或蛋白质的协同作用参与逆境胁迫 | 第33-34页 |
| ·本研究的目的意义 | 第34页 |
| ·本研究的主要内容和技术路线 | 第34-36页 |
| ·主要研究内容 | 第34-35页 |
| ·技术路线 | 第35-36页 |
| 2 麦冬OjERF基因cDNA序列的获得及生物信息学分析 | 第36-48页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·质粒及菌种 | 第36页 |
| ·酶类和试剂 | 第36页 |
| ·引物合成 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-40页 |
| ·麦冬叶片总RNA的提取及纯度检测 | 第36-37页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第37页 |
| ·PCR产物的回收 | 第37-38页 |
| ·连接和转化 | 第38页 |
| ·阳性克隆的鉴定与测序 | 第38-39页 |
| ·重组质粒的提取及酶切鉴定 | 第39页 |
| ·麦冬OjERF基因序列的生物信息学分析 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-46页 |
| ·麦冬叶片总RNA的提取及纯度检测 | 第40页 |
| ·麦冬OjERF基因全长cDNA的克隆 | 第40-41页 |
| ·麦冬OjERF基因的生物信息学分析 | 第41-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 3. 麦冬PkERF基因的表达特性分析 | 第48-53页 |
| ·材料与方法 | 第48-49页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·处理条件 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-51页 |
| ·麦冬OjERF基因在不同胁迫和激素处理条件下的表达模式分析 | 第49-50页 |
| ·麦冬OjERF基因在根、匍匐茎、叶中的表达模式分析 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 4 麦冬OjERF基因的原核表达、亚细胞定位、转录自激活功能分析 | 第53-69页 |
| ·麦冬OjERF基因的原核表达 | 第53-56页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-56页 |
| ·麦冬OjERF基因的亚细胞定位 | 第56-59页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-59页 |
| ·麦冬OjERF基因的转录自激活分析 | 第59-60页 |
| ·材料 | 第59页 |
| ·酵母单杂交实验方法 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-66页 |
| ·麦冬OjERF基因的原核表达 | 第60-62页 |
| ·麦冬OjERF基因的亚细胞定位 | 第62-64页 |
| ·麦冬OjERF基因的转录自激活分析 | 第64-66页 |
| ·讨论 | 第66-69页 |
| 5 转基因烟草的鉴定 | 第69-79页 |
| ·实验材料 | 第69页 |
| ·植物材料 | 第69页 |
| ·质粒及菌种 | 第69页 |
| ·酶类和试剂 | 第69页 |
| ·引物合成和测序 | 第69页 |
| ·培养基 | 第69页 |
| ·实验方法 | 第69-73页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第69-70页 |
| ·CaCl_2法的制备农杆菌感受态 | 第70页 |
| ·质粒转化EHA105农杆菌感受态细胞 | 第70-71页 |
| ·烟草的叶盘侵染法 | 第71页 |
| ·转基因植株的检测 | 第71-72页 |
| ·PCR检测 | 第72页 |
| ·转基因植株的RT-PCR检测 | 第72-73页 |
| ·转基因阳性植株的大量扩繁 | 第73页 |
| ·结果与分析 | 第73-78页 |
| ·植物表达载体的构建及检测 | 第73-74页 |
| ·农杆菌转化及阳性鉴定 | 第74-75页 |
| ·转基因烟草植株的获得 | 第75-76页 |
| ·转基因植株和野生型植株的形态比较 | 第76页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第76-77页 |
| ·转基因阳性植株的大量扩繁 | 第77-78页 |
| ·讨论 | 第78-79页 |
| 6 麦冬OjERF基因可以提高烟草的耐盐与抗旱性 | 第79-96页 |
| ·麦冬OjERF基因可以提高烟草的耐盐性 | 第79页 |
| ·实验材料 | 第79页 |
| ·实验方法 | 第79页 |
| ·数据分析 | 第79页 |
| ·麦冬OjERF基因可以提高烟草的抗早性 | 第79-82页 |
| ·实验材料 | 第79页 |
| ·实验方法 | 第79-82页 |
| ·相关基因的表达情况分析 | 第82-83页 |
| ·实验材料 | 第82页 |
| ·试剂 | 第82页 |
| ·实验方法 | 第82-83页 |
| ·ABA合成相关NtSDR基因表达分析 | 第83-84页 |
| ·利用Primer Premier 5.0软件设计荧光定量PCR所需引物 | 第83页 |
| ·PCR产物的定量分析 | 第83-84页 |
| ·ABA含量的测定 | 第84-85页 |
| ·实验材料 | 第84页 |
| ·实验试剂和耗材 | 第84页 |
| ·实验方法 | 第84-85页 |
| ·结果与分析 | 第85-93页 |
| ·麦冬OjERF基因可以提高烟草的耐盐性 | 第85-86页 |
| ·麦冬OjERF基因可以提高烟草的抗旱性 | 第86-90页 |
| ·相关基因的表达情况分析 | 第90-92页 |
| ·ABA合成基因NtSDR表达水平分析 | 第92页 |
| ·ABA含量测定 | 第92-93页 |
| ·讨论 | 第93-96页 |
| 7 结论 | 第96-97页 |
| 创新点 | 第97页 |
| 研究展望 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-112页 |
| 个人简介 | 第112-113页 |
| 导师简介 | 第113-114页 |
| 获得成果目录 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
