| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文缩略词 | 第7-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-16页 |
| ·鱼类泛素系统的研究概况 | 第10-13页 |
| ·泛素-蛋白酶体降解途径 | 第10-11页 |
| ·泛素-蛋白酶体系统的生物学功能 | 第11-12页 |
| ·泛素系统在病毒感染中的作用 | 第12-13页 |
| ·鱼类泛素的发现 | 第13页 |
| ·NEDD4 BINDING PROTEIN 的研究进展 | 第13-15页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 2 Ci N4BP1 的克隆与表达分析 | 第16-42页 |
| ·实验材料 | 第16-19页 |
| ·实验用鱼 | 第16页 |
| ·质粒载体和受体菌 | 第16-17页 |
| ·实验仪器 | 第17-18页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第18页 |
| ·所有溶液及试剂的配制方法 | 第18-19页 |
| ·主要溶液及器皿的预处理 | 第19页 |
| ·试验方法 | 第19-30页 |
| ·草鱼总 RNA 的提取 | 第19页 |
| ·DH5α感受态的制备 | 第19页 |
| ·Ci N4BP1 的 RACE 克隆 | 第19-26页 |
| ·Ci N4BP1 的原核表达 | 第26-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-40页 |
| ·草鱼总 RNA 的提取及反转录 | 第30-31页 |
| ·Ci N4BP1 的克隆结果 | 第31-32页 |
| ·Ci N4BP1 的生物信息学分析 | 第32-35页 |
| ·Ci N4BP1 的原核表达 | 第35-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 3 Ci N4BP1 的差异表达研究 | 第42-49页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·病毒和细胞 | 第42页 |
| ·实验鱼 | 第42页 |
| ·实验仪器、试剂盒及主要溶液的配制 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-45页 |
| ·草鱼肾细胞 CIK 的培养 | 第42页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒的采集及纯化 | 第42-43页 |
| ·引物设计 | 第43页 |
| ·样品采集 | 第43页 |
| ·样品总 RNA 的提取及 cDNA 一链的合成 | 第43-44页 |
| ·半定量 RT-PCR 检测 Ci N4BP1 的组织分布 | 第44页 |
| ·实时定量 PCR 检测 Ci N4BP1 的组织表达差异 | 第44页 |
| ·实时定量 PCR 检测 Ci N4BP1 的细胞表达差异 | 第44-45页 |
| ·数据统计与分析 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-47页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒感染前后 Ci N4BP1 的组织分布差异 | 第45页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒感染后 Ci N4BP1 在各个组织中的时间表达差异 | 第45-46页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒感染后 Ci N4BP1 在细胞中的时间表达差异 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 4 Ci N4BP1 的亚细胞定位及其对 GCRV 主要结构基因转录的影响 | 第49-57页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·病毒和细胞 | 第49页 |
| ·质粒载体和受体菌株 | 第49-50页 |
| ·主要试剂、工具酶及试剂盒 | 第50页 |
| ·主要溶液和试剂的配制 | 第50页 |
| ·实验仪器 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·CI N4BP1 的亚细胞定位 | 第50-52页 |
| ·对 GCRV 主要结构基因转录的影响 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-55页 |
| ·Ci N4BP1 在 CIK 细胞中的定位 | 第52-54页 |
| ·Ci N4BP1 对 GCRV 主要结构基因转录的影响 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简历 | 第65-66页 |
| 导师简介 | 第66页 |
