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耐热β-1,3-1,4-葡聚糖酶的构建及其酶学性质研究

中英文缩略语对照表第1-4页
摘要第4-6页
Abstract第6-8页
目录第8-10页
第一章 绪论第10-22页
   ·β-葡聚糖酶概述第10-11页
     ·β-葡聚糖酶的三级结构第10-11页
     ·β-葡聚糖酶的生化特性第11页
   ·β-葡聚糖酶的分子生物学研究第11-13页
     ·β-葡聚糖酶基因克隆第11-12页
     ·β-葡聚糖酶基因表达第12-13页
   ·β-葡聚糖酶耐热性的研究第13-15页
     ·定点突变第13-14页
     ·基因部分缺失第14页
     ·酶的定向进化第14页
     ·构建杂合酶第14-15页
     ·构建双功能酶第15页
   ·β-葡聚糖酶的应用第15-16页
     ·啤酒第15页
     ·饲料第15页
     ·制糖第15-16页
     ·生物防治第16页
   ·立题背景及意义第16页
   ·主要研究内容第16-17页
   ·研究路线第17页
 参考文献第17-22页
第二章 β-葡聚糖酶基因克隆表达及其酶学性质研究第22-40页
   ·前言第22页
   ·材料与方法第22-27页
     ·菌株和质粒第22页
     ·主要试剂第22-23页
     ·主要仪器第23页
     ·培养基及主要试剂配制第23页
     ·β-葡聚糖酶基因的克隆第23-25页
     ·β-葡聚糖酶基因的表达第25-26页
     ·β-葡聚糖酶的纯化第26页
     ·β-葡聚糖酶的酶学性质研究第26页
     ·β-葡聚糖酶的疏水性预测第26-27页
   ·结果与讨论第27-37页
     ·β-葡聚糖酶基因克隆第27页
     ·β-葡聚糖酶基因的表达第27-29页
     ·葡萄糖标准曲线绘制第29页
     ·蛋白含量测定标准曲线第29页
     ·β-葡聚糖酶诱导表达条件的优化第29-31页
     ·β-葡聚糖酶的纯化第31-32页
     ·β-葡聚糖酶的酶学性质第32-36页
     ·β-葡聚糖酶的疏水性分析第36-37页
   ·本章小结第37页
 参考文献第37-40页
第三章 融合β-葡聚糖酶的构建及其酶学性质研究第40-50页
   ·前言第40页
   ·材料与方法第40-42页
     ·材料第40页
     ·融合基因的构建第40-41页
     ·融合基因克隆、表达及其酶学性质第41-42页
   ·结果与讨论第42-48页
     ·融合基因 r13 和 r27 的构建第42页
     ·融合基因 r13 和 r27 的克隆和表达第42-44页
     ·R13 和 R27 的纯化第44页
     ·R13 和 R27 的酶学性质研究第44-47页
     ·R13 和 R27 酶学性质改变的可能机理第47-48页
   ·本章小结第48页
 参考文献第48-50页
第四章 双催化结构域β-葡聚糖酶的构建及其耐热机理初步研究第50-62页
   ·前言第50页
   ·材料与方法第50-52页
     ·材料第50页
     ·双催化结构域β-葡聚糖酶基因及定点突变基因的构建第50-52页
     ·双催化结构域β-葡聚糖酶基因和突变基因的克隆表达及其酶学性质第52页
   ·结果与讨论第52-59页
     ·rq 和 rqm 的构建第52-53页
     ·rq 和 rqm 的克隆和表达第53-54页
     ·RQ 和 RQM 的纯化第54页
     ·RQ 和 RQM 的酶学性质第54-57页
     ·RQ 和 RQM 酶学性质改变的可能机理第57-58页
     ·已构建β-葡聚糖酶的热稳定性比较研究第58-59页
   ·本章小结第59页
 参考文献第59-62页
第五章 双催化结构域β-葡聚糖酶发酵工艺条件研究第62-74页
   ·前言第62页
   ·材料与方法第62-63页
     ·材料第62页
     ·基因工程菌的培养方法第62页
     ·基因工程菌的生长曲线第62页
     ·酶活性的测定第62页
     ·培养基的优化第62-63页
     ·最适培养条件优化第63页
   ·结果与讨论第63-72页
     ·基因工程菌的生长曲线第63页
     ·碳源、氮源和无机盐的筛选第63-65页
     ·发酵培养基中主要成分的单因素实验第65-66页
     ·响应面实验设计第66-69页
     ·发酵条件优化第69-72页
   ·本章小结第72页
 参考文献第72-74页
论文主要结论与展望第74-76页
论文主要创新点第76-78页
致谢第78-80页
攻读博士学位期间发表的论文第80-82页
附录第82-84页

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