| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 1 综述 | 第13-24页 |
| ·猪链球菌病 | 第13-18页 |
| ·猪链球菌 | 第13-14页 |
| ·细菌病原学 | 第14页 |
| ·流行病学 | 第14-15页 |
| ·临床症状及病理学变化 | 第15页 |
| ·毒力因子研究进展 | 第15-17页 |
| ·致病机理 | 第17页 |
| ·疾病防治 | 第17-18页 |
| ·HtrA蛋白研究进展 | 第18-24页 |
| ·HtrA综述 | 第18-19页 |
| ·HtrA蛋白结构与作用机制 | 第19-21页 |
| ·HtrA蛋白功能研究 | 第21-24页 |
| 2 研究目的及意义 | 第24-25页 |
| 3 试验材料与方法 | 第25-50页 |
| ·材料 | 第25-31页 |
| ·菌株与细胞 | 第25页 |
| ·质粒及图谱 | 第25页 |
| ·试验动物 | 第25页 |
| ·培养基及配制 | 第25-27页 |
| ·主要试剂及配制 | 第27-30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·引物 | 第30-31页 |
| ·分析软件及说明 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-50页 |
| ·猪链球菌2型HtrA基因克隆 | 第31-33页 |
| ·原核表达质粒pET-32a(+)-HtrA的构建与鉴定 | 第33-36页 |
| ·重组蛋白pET-32a(+)-HtrA原核表达、纯化与鉴定 | 第36-39页 |
| ·重组HtrA蛋白小鼠免疫与保护力实验 | 第39-41页 |
| ·基因缺失株△HtrA与互补菌株c△HtrA的筛选及鉴定 | 第41-42页 |
| ·缺失株△HtrA与互补菌株c△HtrA的生物学特性鉴定 | 第42-45页 |
| ·基因分布测定 | 第45页 |
| ·HtrA基因的细胞相关研究 | 第45-50页 |
| 4 结果与分析 | 第50-80页 |
| ·猪链球菌2型HtrA基因分析 | 第50-53页 |
| ·猪链球菌2型HtrA基因进化分析 | 第50-51页 |
| ·猪链球菌2型HtrA基因分析 | 第51-53页 |
| ·重组质粒pET-32a(+)-HtrA构建与鉴定 | 第53-56页 |
| ·猪链球菌2型HtrA基因克隆和重组质粒酶切鉴定 | 第53-54页 |
| ·重组质粒pET-32a(+)-HtrA测序结果 | 第54-56页 |
| ·重组pET-32a(+)-HtrA蛋白表达、纯化 | 第56-58页 |
| ·重组pET-32a(+)-HtrA蛋白表达纯化鉴定结果 | 第56页 |
| ·重组pET-32a(+)-HtrA蛋白Western Blotting结果 | 第56-57页 |
| ·重组pET-32a(+)-HtrA蛋白定量结果 | 第57-58页 |
| ·重组HtrA蛋白小鼠免疫与保护力测定 | 第58-59页 |
| ·小鼠免疫后ELISA抗体和IgG亚类测定结果 | 第58页 |
| ·小鼠保护力测定 | 第58-59页 |
| ·基因缺失株△HtrA与互补菌株c△HtrA的筛选及鉴定 | 第59-61页 |
| ·同源重组pSET4s-△HtrA和互补pSET2s-c△HtrA质粒的鉴定 | 第59-60页 |
| ·基因缺失菌株△HtrA和互补菌株c△HtrA筛选、鉴定 | 第60-61页 |
| ·基因缺失株△HtrA与互补菌株生物学特性鉴定 | 第61-70页 |
| ·革兰氏染色结果 | 第61页 |
| ·生长特性测定 | 第61-62页 |
| ·遗传稳定性鉴定 | 第62页 |
| ·溶血活性测定 | 第62-63页 |
| ·温度敏感性试验 | 第63页 |
| ·氧化压力测定 | 第63-64页 |
| ·丝裂霉素C与嘌呤霉素压力试验 | 第64-66页 |
| ·pH耐受试验 | 第66-67页 |
| ·NaCl渗透压压力试验 | 第67-68页 |
| ·应激反应定量实验 | 第68-69页 |
| ·小鼠感染实验 | 第69-70页 |
| ·HtrA基因在各种标准菌株血清型中的分布 | 第70-71页 |
| ·间接免疫荧光 | 第71-72页 |
| ·黏附试验结果 | 第72页 |
| ·调理吞噬实验结果 | 第72-73页 |
| ·细胞凋亡与周期测定 | 第73-76页 |
| ·真核表达质粒构建鉴定 | 第73-74页 |
| ·真核表达质粒转染鉴定结果 | 第74页 |
| ·细胞凋亡和周期测定结果 | 第74-76页 |
| ·小结与讨论 | 第76-80页 |
| 5 全文总结 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
