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龙须草微卫星文库的构建及其遗传学研究

摘要第1-8页
Abstract第8-9页
1.前言第9-17页
   ·课题的提出及研究的目的和意义第9-10页
   ·文献综述第10-17页
     ·龙须草研究现状第10-11页
     ·植物无融合生殖的研究第11-15页
       ·无融合生殖类型第11-12页
       ·无融合生殖体类型第12-13页
       ·植物无融合生殖的分子标记研究第13-15页
     ·SSR标记的研究第15-17页
       ·SSR标记的概念及特点第15页
       ·SSR标记的应用第15-17页
2.材料和方法第17-29页
   ·龙须草微卫星文库的构建第17-25页
     ·材料第17页
     ·方法第17-25页
       ·龙须草微卫星文库的构建第17-25页
         ·龙须草基因组总D N A的提取第18-19页
         ·BamHⅠ和HindⅢ双酶切基因组DNA及酶切片段的选择回收第19-20页
         ·接头的准备第20页
         ·接头的连接及回收产物的检测第20-21页
         ·磁珠捕获目的片段第21-22页
         ·PCR检测富集捕获的目的片段第22页
         ·制备感受态细胞--氯化钙法第22-23页
         ·目的片段的克隆第23页
         ·阳性克隆的筛选第23-24页
         ·阳性克隆的鉴定第24页
         ·阳性克隆测序第24页
         ·设计引物第24页
         ·PCR检测第24-25页
   ·龙须草的遗传多样性分析第25-26页
     ·材料第25页
     ·方法第25-26页
       ·DNA提取第25页
       ·PCR反应及扩增产物的检测第25-26页
       ·数据统计分析第26页
   ·龙须草不同单株生殖方式的鉴定第26-29页
     ·材料第26-27页
     ·方法第27-29页
       ·龙须草杂交后代的SSR分子标记检测第27-28页
       ·用流式细胞仪检测种子胚和胚乳的倍性水平第28-29页
3.结果与分析第29-46页
   ·龙须草微卫星文库的构建第29-35页
     ·龙须草样品基因组总DNA的提取第29页
     ·HindⅢ和BamHⅠ双酶切基因组DNA与片段的选择回收第29-30页
     ·选择性片段连接adaptor产物的PCR检测与扩增第30页
     ·磁珠富集目的DNA片段及PCR产物的纯化第30-31页
     ·用PIMA法筛选阳性克隆第31-32页
     ·测序第32页
     ·设计引物第32页
     ·检测引物的多态性第32-35页
   ·龙须草的遗传多样性分析第35-41页
     ·SSR分析第35-36页
     ·龙须草不同居群的遗传多样性分析第36-38页
     ·龙须草不同单株的遗传多样性分析第38-41页
   ·龙须草不同单株生殖方式的鉴定第41-46页
     ·龙须草杂交后代的SSR分子标记检测第41-43页
     ·用流式细胞仪检测成熟种子胚和胚乳的倍性水平第43-46页
4.讨论第46-52页
   ·微卫星文库的构建第46-49页
     ·用磁珠富集法开发龙须草的SSR引物第46-47页
     ·影响磁珠富集的关键因素和在磁珠富集中应注意的问题第47-49页
   ·龙须草的遗传多样性分析第49-50页
   ·龙须草不同单株生殖方式的鉴定第50-52页
5 结论和展望第52-54页
   ·结论第52页
   ·研究展望第52-54页
参考文献第54-64页
致谢第64页

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