摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第1章 文献综述 | 第11-23页 |
·植物水通道蛋白发现和命名 | 第11页 |
·植物水通道蛋白分类 | 第11-12页 |
·质膜内在蛋白(PIPs) | 第12页 |
·液泡膜内在蛋白(TIPs) | 第12页 |
·根瘤菌周膜上的NOD26类似的内在蛋白(NIPs) | 第12页 |
·小分子碱性内在蛋白(SIPs) | 第12页 |
·植物水通道蛋白的表达调控 | 第12-15页 |
·转录水平调控 | 第12-13页 |
·转录后水平调控 | 第13-14页 |
·跨膜运输调节 | 第14-15页 |
·植物水通道蛋白参与的生理功能 | 第15-17页 |
·植物AQPs的运输功能 | 第15页 |
·渗透调节作用 | 第15页 |
·调节细胞缩胀 | 第15页 |
·维持水势平衡 | 第15页 |
·植物生长发育中的作用 | 第15-16页 |
·植物逆境胁迫反应 | 第16页 |
·参与栓塞的修复 | 第16-17页 |
·启动子的结构 | 第17-18页 |
·转录起始位点 | 第17页 |
·TATA box | 第17页 |
·一般上游启动子元件 | 第17页 |
·特有上游启动子元件 | 第17-18页 |
·启动子分类 | 第18-19页 |
·组成型启动子 | 第18页 |
·组织特异性启动子 | 第18页 |
·诱导型启动子 | 第18-19页 |
·克隆启动子的常用PCR技术 | 第19-22页 |
·常规PCR技术 | 第19页 |
·环状PCR技术 | 第19页 |
·Y型接头扩增法 | 第19-20页 |
·热不对称交错式PCR技术(TAIL-PCR) | 第20-22页 |
·启动子功能分析方法 | 第22-23页 |
·生物(?)分析与预测 | 第22页 |
·实验方法功能分析 | 第22-23页 |
第2章 引言 | 第23-25页 |
第3章 蜡梅水通道蛋白基因CpAQP1实时荧光定量分析 | 第25-37页 |
·实验技术路线 | 第25页 |
·实验材料 | 第25-26页 |
·材料和cDNA文库 | 第25页 |
·试剂 | 第25页 |
·仪器设备 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-29页 |
·采集蜡梅组织 | 第26页 |
·采集不同时期蜡梅的花芽 | 第26页 |
·不同胁迫处理 | 第26页 |
·总RNA提取 | 第26-27页 |
·cDNA第一链合成 | 第27页 |
·CpAQP1表达特性分析 | 第27-29页 |
·结果与分析 | 第29-34页 |
·总RNA提取 | 第29页 |
·熔解曲线分析和标准曲线分析 | 第29-32页 |
·CpAQP1实时荧光定量分析 | 第32-34页 |
·讨论 | 第34-37页 |
第4章 蜡梅水通道蛋白基因CpAQP1启动子的克隆和分析 | 第37-57页 |
·技术路线 | 第37页 |
·实验材料 | 第37-39页 |
·蜡梅基因组DNA | 第37页 |
·菌株和载体 | 第37-38页 |
·试剂 | 第38页 |
·仪器设备 | 第38页 |
·自配试剂 | 第38-39页 |
·常用培养基配方 | 第39页 |
·实验方法 | 第39-49页 |
·蜡梅基因组DNA提取纯化 | 第39-40页 |
·hiTAIL-PCR法扩增上游启动子序列 | 第40-45页 |
·启动子序列生物信息学分析 | 第45页 |
·植物表达载体构建 | 第45-47页 |
·农杆菌介导转化烟草 | 第47-49页 |
·启动子稳定表达活性分析 | 第49页 |
·结果与分析 | 第49-55页 |
·DNA的提取和纯化检测 | 第49-50页 |
·CPAQP1基因启动子克隆 | 第50-51页 |
·启动子序列生物信息学分析 | 第51-53页 |
·中间载体构建 | 第53-54页 |
·植物表达载体构造 | 第54页 |
·电转化法转入农杆菌验证 | 第54-55页 |
·转基因阳性植株鉴定及启动子活性分析 | 第55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
第5章 总结 | 第57-59页 |
·结论 | 第57页 |
·后续研究 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
缩略词表 | 第67-69页 |
致谢 | 第69-71页 |
发表论文与参加的研究课题 | 第71页 |