中文摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACTS | 第7-9页 |
英文缩略语 | 第9-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-21页 |
1. 脂肪酶研究进展 | 第10-16页 |
·低温脂肪酶研究进展 | 第10-11页 |
·脂肪酶的结构特征 | 第11页 |
·脂肪酶的化学修饰 | 第11-12页 |
·脂肪酶催化反应 | 第12-13页 |
·脂肪酶的应用 | 第13-16页 |
2. 产脂肪酶菌株筛选研究进展 | 第16-17页 |
·碳源的影响 | 第16页 |
·氮源的影响 | 第16-17页 |
·金属离子的影响 | 第17页 |
3. 脂肪酶分离纯化研究进展 | 第17-20页 |
·双水相萃取 | 第17-18页 |
·反胶团萃取 | 第18-19页 |
·其它的纯化方法 | 第19-20页 |
4. 低温脂肪酶活力的测定方法 | 第20页 |
·紫外分光光度法(见附录1) | 第20页 |
·电位滴定法(见附录1) | 第20页 |
·指示剂滴定法(见附录1) | 第20页 |
5. 低温脂肪酶蛋白含量的测定 | 第20-21页 |
第二部分 实验部分 | 第21-53页 |
第一章、产低温脂肪酶的菌株筛选 | 第22-27页 |
1 实验材料 | 第22页 |
·菌种 | 第22页 |
·培养基 | 第22页 |
2. 实验方法 | 第22页 |
·菌种活化 | 第22页 |
·菌株初筛 | 第22页 |
·菌株复筛 | 第22页 |
·脂肪酶活力测定方法 | 第22页 |
·蛋白质含量测定方法 | 第22页 |
3. 实验结果与讨论 | 第22-27页 |
4. 结论 | 第27页 |
第二章、低温脂肪酶粗酶及纯酶部分酶学性质研究 | 第27-33页 |
1. 实验材料与方法 | 第27-28页 |
·材料 | 第27页 |
·试剂 | 第27页 |
·实验仪器 | 第27页 |
·纯化方法 | 第27-28页 |
2. 实验结果与讨论 | 第28-33页 |
·酶液纯化前后最适pH 值的比较 | 第28页 |
·酶液纯化前后最适反应温度的比较 | 第28-29页 |
·低温脂肪酶pH 稳定性 | 第29-30页 |
·低温脂肪酶保藏条件的选择 | 第30页 |
·低温脂肪酶保护剂的选择 | 第30-31页 |
·金属离子对低温脂肪酶活性的影响 | 第31页 |
·EDTA 对低温脂肪酶活性的影响 | 第31-32页 |
·低温脂肪酶Km、Vm 值 | 第32-33页 |
第三章、低温脂肪酶提取方法的选择 | 第33-44页 |
1. 实验材料与方法 | 第33-34页 |
·材料 | 第33页 |
·试剂 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-34页 |
2 实验结果与讨论 | 第34-44页 |
·传统硫酸铵沉淀法 | 第34-36页 |
·双水相萃取法提取脂肪酶 | 第36-40页 |
·反胶团法提取脂肪酶 | 第40-44页 |
第四章、Sephadex G-75 凝胶过滤纯化脂肪酶 | 第44页 |
1 葡聚糖凝胶的预处理 | 第44页 |
2 重力沉降法装柱 | 第44页 |
3 上样及洗脱 | 第44页 |
第五章、低温脂肪酶纯度鉴定及分子量标定 | 第44-45页 |
第六章、低温脂肪酶空间结构的预测 | 第45-47页 |
第七章、低温脂肪酶活性中心氨基酸测定 | 第47-49页 |
1 材料与方法 | 第47页 |
2 结果与讨论 | 第47-49页 |
·丝氨酸(Ser)残基的化学修饰 | 第47-48页 |
·组氨酸(His)残基的化学修饰 | 第48页 |
·天冬氨酸(Asp)残基的化学修饰 | 第48-49页 |
3. 结论 | 第49页 |
第八章、实验结果与讨论 | 第49-53页 |
1 纯化方法的比较 | 第49-50页 |
2 低温脂肪酶纯化方法的确定 | 第50-53页 |
第三部分 结论 | 第53-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
致谢 | 第62-64页 |
个人简历 | 第64-66页 |
附录 1 | 第66-68页 |
附录 2 | 第68-69页 |