摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
英文缩略语 | 第10-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-28页 |
第一章 植物RNAI 机制研究进展及应用 | 第11-17页 |
1 植物RNAi 发生机制 | 第11-14页 |
·植物RNAi 途径 | 第11-12页 |
·RdRs 在植物RNAi 的作用 | 第12-14页 |
2 RNAi 技术在植物生物学中的应用 | 第14-17页 |
·RNAi 技术在研究植物基因功能的应用 | 第14页 |
·RNAi 技术在植物抗御逆境及病毒侵染的分子机制的研究的应用 | 第14-15页 |
·RNAi 技术对植物性状的改良 | 第15-17页 |
第二章 胡杨(POPULUS EUPHRATICA OLIV)耐盐机制的研究进展 | 第17-24页 |
1 胡杨耐盐机制的生理学研究 | 第18-22页 |
·胡杨细胞的耐盐性 | 第18-19页 |
·盐胁迫下离子的组织细胞分布 | 第19-20页 |
·盐胁迫下胡杨体内激素变化 | 第20-21页 |
·胡杨形态学上对盐胁迫的适应 | 第21-22页 |
2 胡杨耐盐机制的分子学方面的研究 | 第22-23页 |
3 结论与展望 | 第23-24页 |
第三章 NHX 与花花柴耐盐机理研究进展 | 第24-28页 |
1 NHX 及其基因家族与耐盐性 | 第24-26页 |
·NHX 的作用机理及生理功能 | 第24-25页 |
·NHX 的调控特性及机制 | 第25-26页 |
2 NHX 与花花柴耐盐机制相关性 | 第26-27页 |
·盐胁迫可诱导花花柴的肉质化 | 第26-27页 |
·花花柴是典型的泌盐生植物 | 第27页 |
3 结论与展望 | 第27-28页 |
第二部分 实验部分 | 第28-62页 |
第一章 胡杨NA~+/H~+反向运输载体(PENHX2)基因的克隆与序列分析 | 第28-39页 |
1 材料与方法 | 第30-32页 |
·材料 | 第30页 |
·植物材料 | 第30页 |
·试剂 | 第30页 |
·仪器 | 第30页 |
·方法 | 第30-32页 |
·胡杨总RNA 的提取依据Trizol 试剂盒的操作说明进行 | 第30页 |
·核心片段的克隆 | 第30-31页 |
·3’RACE | 第31页 |
·5’RACE | 第31-32页 |
·胡杨NHX 开放阅读框的扩增 | 第32页 |
·克隆与测序 | 第32页 |
·胡杨NHX cDNA 的全长序列分析 | 第32页 |
2 结果 | 第32-36页 |
·PeNHX2 的扩增及序列分析 | 第32-34页 |
·PeNHX2 蛋白序列跨膜区域的预测 | 第34页 |
·PeNHX2 基因序列同源性分析 | 第34-36页 |
3 讨论 | 第36-39页 |
第二章 花花柴NA~+/H~+反向运输载体基因家族(KCNHXS)的克隆及表达分析研究 | 第39-49页 |
1 材料与方法 | 第40-43页 |
·材料 | 第40-41页 |
·植物材料 | 第40页 |
·试剂 | 第40-41页 |
·方法 | 第41-43页 |
·花花柴总RNA 的提取依据Trizol 试剂盒的操作说明进行 | 第41页 |
·核心片段的克隆 | 第41页 |
·3’RACE | 第41页 |
·5’RACE | 第41-42页 |
·KcNHX1 和KcNHX2 开放阅读框的扩增 | 第42页 |
·克隆与测序 | 第42-43页 |
·KcNHX1 和KcNHX2 cDNA 的全长序列分析 | 第43页 |
·半定量RT-PCR | 第43页 |
2 结果 | 第43-47页 |
·KcNHX1 和KcNHX2 的扩增及序列分析 | 第43-45页 |
·KcNHX1 和KcNHX2 与几种不同植物的NHX 蛋白水平上的同源系统树分析 | 第45-46页 |
·不同浓度NaCl 胁迫下KcNHX1 与KcNHX2 的表达 | 第46-47页 |
3 讨论 | 第47-49页 |
第三章 花花柴的组织培养及植株再生 | 第49-52页 |
1 材料类别 | 第49页 |
2 培养条件 | 第49页 |
3 生长与分化情况 | 第49-52页 |
·无菌材料的获得 | 第49-50页 |
·不定芽的分化及增殖 | 第50页 |
·芽及根的生长 | 第50页 |
·试管苗移栽 | 第50-52页 |
第四章 花花柴KCNHXS 基因的RNAI 载体的构建及其对花花柴的转化 | 第52-62页 |
1 材料与方法 | 第54-57页 |
·材料 | 第54-55页 |
·植物材料 | 第54页 |
·菌种 | 第54页 |
·载体与基因 | 第54页 |
·培养基及其它试剂 | 第54-55页 |
·方法 | 第55-57页 |
·载体的构建 | 第55页 |
·农杆菌的转化 | 第55-57页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第55-56页 |
·农杆菌感受态细胞的转化 | 第56页 |
·重组质粒的鉴定 | 第56-57页 |
·农杆菌介导的叶盘法转化花花柴 | 第57页 |
·转基因花花柴的PCR 鉴定 | 第57页 |
2 结果与展望 | 第57-62页 |
·植物RNAi 载体pCAMBIA1301-1.1-KcNHX1i 和pCAMBIA1301-1.1-KcNHX2i 的构建 | 第57-59页 |
·植物RNAi 载体转化农杆菌鉴定 | 第59页 |
·抗性苗的初步鉴定 | 第59-62页 |
第三部分 结论 | 第62-63页 |
第四部分 展望 | 第63-64页 |
第五部分 创新点 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-73页 |
个人简历 | 第73-74页 |
致谢 | 第74-76页 |