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赭曲霉毒素A和黄曲霉毒素B1的超微量免疫分析

主要缩略词第1-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-14页
第一章 绪论第14-32页
   ·概述第14页
   ·真菌毒素的危害第14-15页
   ·赭曲霉毒素 A 概述第15-18页
     ·赭曲霉毒素 A 的危害第15-16页
     ·国内外赭曲霉毒素 A 限量标准进展第16-17页
     ·国内外赭曲霉毒素 A 的检测方法进展第17-18页
   ·黄曲霉毒素B_1概述第18-21页
     ·黄曲霉毒素B_1的危害第18-20页
     ·国内外黄曲霉毒素B_1限量标准进展第20页
     ·国内外黄曲霉毒素B_1的检测方法进展第20-21页
   ·标记免疫分析发展方向第21-22页
   ·时间分辨荧光免疫分析第22-26页
     ·时间分辨荧光免疫分析的原理第23-25页
     ·时间分辨荧光免疫分析的标记第25页
     ·时间分辨荧光免疫分析的方法第25-26页
     ·时间分辨荧光分析测量仪器第26页
   ·课题的立题目的和意义第26页
   ·研究的主要内容第26-28页
 参考文献第28-32页
第二章 抗赭曲霉毒素 A 抗体的制备第32-48页
   ·引言第32页
   ·材料与仪器第32-33页
     ·材料第32-33页
     ·仪器第33页
   ·人工抗原 OTA-KLH 的制备第33-34页
     ·OTA-KLH 制备步骤第33-34页
     ·OTA-KLH 偶联的确证第34页
   ·抗赭曲霉毒素 A 多克隆抗体的制备第34-35页
     ·原理第34页
     ·油包水抗原乳化剂的制备第34页
     ·免疫新西兰大白兔第34-35页
   ·抗赭曲霉毒素 A 多克隆抗体的鉴定第35-37页
     ·抗赭曲霉毒素 A 多克隆抗体滴度的测定第35-36页
     ·抗赭曲霉毒素 A 多克隆抗体特异性初步验证第36-37页
   ·抗赭曲霉毒素 A 单克隆抗体的制备第37-40页
     ·制备流程第37页
     ·OTA-BSA 免疫 BALB/c 鼠做融合第37-40页
   ·结果和讨论第40-46页
     ·OTA-KLH 偶联的结果第40-41页
     ·抗赭曲霉毒素 A 多克隆抗体的制备和鉴定结果第41-44页
     ·抗赭曲霉毒素 A 单克隆抗体的制备和鉴定结果第44-45页
     ·单克隆抗体和多克隆抗体的各自特点第45-46页
   ·本章小结第46-47页
 参考文献第47-48页
第三章 赭曲霉毒素 A 时间分辨荧光免疫分析方法的建立第48-67页
   ·引言第48页
   ·材料与方法第48-49页
     ·材料第48-49页
     ·主要仪器第49页
   ·应用多克隆抗体建立赭曲霉毒素A的时间分辨荧光免疫分析第49-50页
     ·固相抗原包被条件的优化第49页
     ·Eu~(3+)-羊抗兔抗体的制备第49页
     ·OTA 标准的配制第49页
     ·抗 OTA 兔血清的稀释实验第49-50页
     ·间接竞争 OTA-TRFIA 检测步骤第50页
   ·应用单克隆抗体建立赭曲霉毒素 A 的时间分辨荧光免疫分析第50-52页
     ·固相抗原的包被第50页
     ·羊抗鼠抗体包被板的制备第50页
     ·Eu~(3+)-标记物的制备第50-51页
     ·抗 OTA 腹水的稀释实验第51页
     ·免疫分析检测步骤第51-52页
   ·结果与讨论第52-64页
     ·多克隆抗体 OTA-TRFIA 中固相抗原包被条件优化的结果第52-54页
     ·Eu~(3+)-羊抗兔抗体制备的条件优化第54页
     ·Eu~(3+)标记抗体的分离纯化第54-56页
     ·Eu~(3+)标记抗体的标记率第56-57页
     ·Eu~(3+)标记抗体得率的提高第57页
     ·OTA-BSA 包被浓度对多克隆抗体 OTA-TRFIA 的影响第57-58页
     ·抗 OTA 兔血清的稀释实验第58-59页
     ·反应温度和反应时间对 OTA-TRFIA 检测的影响第59页
     ·应用多克隆抗体建立间接竞争OTA-TRFIA的标准曲线第59-60页
     ·免疫分析检测步骤结果第60-63页
     ·应用单克隆抗体建立 OTA-TRFIA 时包被浓度的选择第63页
     ·抗 OTA 腹水的稀释实验第63-64页
     ·应用单克隆抗体建立间接竞争 OTA-TRFIA 的标准曲线第64页
   ·本章小结第64-65页
 参考文献第65-67页
第四章 赭曲霉毒素 A 时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制及考核第67-80页
   ·引言第67页
   ·材料与方法第67-68页
     ·材料第67-68页
     ·主要仪器第68页
   ·主要试剂的配制第68-70页
     ·OTA 标准溶液第68页
     ·分析缓冲液的配制第68页
     ·浓缩洗涤液的配制第68页
     ·增强液主要成分的合成及配制第68-69页
     ·抗 OTA 腹水分装第69页
     ·抗 OTA 兔血清分装第69页
     ·Eu~(3+)-羊抗鼠抗体分装第69页
     ·Eu~(3+)-羊抗兔抗体分装第69页
     ·包被板第69-70页
   ·样品处理第70页
   ·应用单克隆抗体间接竞争 OTA-TRFIA 试剂盒组成及检测步骤第70页
     ·试剂盒的组成第70页
     ·检测步骤第70页
   ·应用多克隆抗体间接竞争OTA-TRFIA试剂盒组成及检测步骤第70-71页
     ·试剂盒的组成第70-71页
     ·应用多克隆抗体间接竞争OTA-TRFIA检测步骤第71页
   ·全自动操作OTA-TRFIA程序及试剂盒第71-72页
   ·方法的考核第72-73页
   ·结果与讨论第73-77页
     ·增强液的配制结果第73-74页
     ·应用单克隆抗体间接竞争 OTA-TRFIA 试剂盒的考核第74-76页
     ·应用多克隆抗体间接竞争 OTA-TRFIA 试剂盒的考核第76-77页
   ·本章小结第77-78页
 参考文献第78-80页
第五章 黄曲霉毒素B_1时间分辨荧光免疫分析法的建立及试剂盒的研制--第80-95页
   ·引言第80-81页
   ·材料与方法第81-82页
     ·材料第81页
     ·主要仪器第81-82页
   ·实验方法第82-83页
     ·抗AFB_1多克隆抗体的制备第82页
     ·固相抗原制备第82页
     ·Eu~(3+)-羊抗兔抗体的制备第82-83页
     ·AFB_1标准的配制第83页
     ·AFB_1分析缓冲液第83页
     ·洗涤液的配制第83页
     ·间接竞争AFB_1-TRFIA检测步骤第83页
   ·结果与讨论第83-92页
     ·抗AFB_1兔血清的稀释实验第83-84页
     ·Eu~(3+)-羊抗兔抗体的浓度选择第84页
     ·AFB_1-HRP固相抗原包被量的优化第84-85页
     ·加样顺序对AFB-TRFIA灵敏度的影响第85-87页
     ·灵敏度的影响因素第87-88页
     ·标准点的设置第88页
     ·标准曲线的数学模型第88-90页
     ·标准曲线的拟和方式第90-91页
     ·黄曲霉毒素B_1的时间分辨荧光免疫分析试剂盒第91-92页
   ·本章小结第92-93页
 参考文献第93-95页
第六章 黄曲霉毒素B_1时间分辨荧光免疫分析试剂盒方法学考核第95-104页
   ·引言第95页
   ·材料与方法第95-96页
     ·材料第95页
     ·主要仪器第95-96页
   ·实验方法第96-98页
     ·样品制备和提取第96页
     ·测试步骤第96页
     ·AFB-TRFIA的考核方法第96-98页
   ·结果与讨论第98-102页
     ·标准曲线第98页
     ·标准曲线的批间稳定性第98-99页
     ·灵敏度和测量范围第99-100页
     ·特异性第100页
     ·精密度第100-101页
     ·回收率第101页
     ·有效期第101-102页
     ·AFB_1-TRFIA与AFB_1-ELISA试剂盒的比较第102页
   ·本章小结第102-103页
 参考文献第103-104页
总结第104-106页
主要创新点第106-107页
致谢第107-108页
攻读博士学位期间发表的论文第108-109页
攻读博士学位期间申请专利第109页
攻读博士学位期间鉴定课题第109页

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