中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-12页 |
前言部分 | 第12-33页 |
第一章 猪传染性胃肠炎病毒的研究进展 | 第12-20页 |
1 猪传染性胃肠炎的概述 | 第12页 |
2 猪传染性胃肠炎病毒研究进展 | 第12-20页 |
·TGEV 形态学特征 | 第12-13页 |
·TGEV 的理化特性 | 第13页 |
·TGEV 的生物学特性 | 第13页 |
·TGEV 的病原性 | 第13-14页 |
·TGEV 的抗原性 | 第14-15页 |
·TGEV 基因组结构 | 第15-18页 |
·TGEV S 糖蛋白 | 第15-16页 |
·TGEV M 糖蛋白 | 第16-17页 |
·TGEV N 糖蛋白 | 第17页 |
·TGEV 非结构蛋白 | 第17-18页 |
·TGEV 繁殖机制 | 第18-20页 |
第二章 DNA 疫苗研究进展 | 第20-28页 |
1 基因疫苗研究进程简介 | 第20-22页 |
2 DNA 疫苗的制备 | 第22-23页 |
·抗原编码基因的筛选 | 第22页 |
·质粒表达载体的构建 | 第22-23页 |
3 基因免疫机制及优点 | 第23-25页 |
·基因免疫机制 | 第23-24页 |
·基因免疫的优点 | 第24-25页 |
4 DNA 疫苗的安全性和存在问题 | 第25-26页 |
5 DNA 疫苗应用前景 | 第26-28页 |
第三章 猪传染性胃肠炎病毒 DNA 疫苗研究进展 | 第28-33页 |
1 猪传染性胃肠炎病毒转基因疫苗研究进展 | 第28-31页 |
·可食用转基因植物疫苗 | 第28-29页 |
·基因工程亚单位疫苗 | 第29页 |
·合成肽疫苗 | 第29-30页 |
·基因缺失疫苗 | 第30页 |
·RNA 复制子疫苗 | 第30-31页 |
·活载体重组病毒疫苗 | 第31页 |
2 猪传染性胃肠炎可食疫苗可行性及前景 | 第31-33页 |
实验研究部分 | 第33-56页 |
第四章 猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白 S 基因克隆 | 第33-48页 |
1 材料和方法 | 第33-41页 |
·组织来源 | 第33页 |
·质粒和菌种 | 第33-34页 |
·试剂和仪器 | 第34-35页 |
·引物设计合成 | 第35-36页 |
·TGEV 总 RNA 提取及检测 | 第36-37页 |
·TGEV 总 RNA 提取 | 第36页 |
·TGEV 总 RNA 完整性的检测 | 第36-37页 |
·RT-PCR | 第37-39页 |
·反转录合成 cDNA | 第37页 |
·片段 S1 和 S2 的 PCR 扩增 | 第37-38页 |
·PCR 产物的酶切鉴定 | 第38-39页 |
·扩增产物的 T-A 克隆 | 第39-40页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第40-41页 |
·目的片断序列测定 | 第41页 |
·S 基因全长序列 PCR 扩增 | 第41页 |
·S 基因克隆 | 第41页 |
·重组质粒 pGEM-S 酶切和 PCR 鉴定 | 第41页 |
2 结果与分析 | 第41-44页 |
·TGEV 总 RNA 完整性的检测 | 第41-42页 |
·TGEV S 基因分段扩增 | 第42页 |
·S1 和 S2 PCR 产物的酶切结果 | 第42页 |
·重组质粒 pMD- S1 和 pMD- S2 的酶切鉴定 | 第42-43页 |
·S 基因核酸序列分段测定及分析 | 第43页 |
·S 基因全长序列 PCR 扩增及重组子鉴定 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-47页 |
·总 RNA 的完整性及 cDNA 的克隆 | 第44页 |
·S 基因克隆策略与经验 | 第44-45页 |
·S 基因 RT-PCR 引物设计 | 第45-47页 |
4 小结 | 第47-48页 |
第五章 猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白 S 基因乳腺特异性表达载体的构建 | 第48-56页 |
1 材料和方法 | 第48-50页 |
·质粒和菌种 | 第48-49页 |
·工具酶和试剂 | 第49页 |
·仪器 | 第49页 |
·引物设计合成 | 第49页 |
·S 基因的 PCR 扩增 | 第49页 |
·S′基因克隆及重组子酶切鉴定 | 第49页 |
·真核表达载体构建 | 第49-50页 |
·质粒 pGEM-S′和 pG-BBCP 酶切鉴定 | 第49-50页 |
·重组质粒的克隆 pG-BBCPS′及鉴定 | 第50页 |
·真核表达载体 pEGFP-BCPS′构建及鉴定 | 第50页 |
2 结果与分析 | 第50-52页 |
·S′基因的 PCR 产物电泳 | 第50页 |
·重组子 pGEM-S′酶切鉴定 | 第50-51页 |
·质粒 pGEM-S′和 pG-BBCP 酶切鉴定 | 第51页 |
·重组质粒 pG-BBCPS′的克隆及鉴定 | 第51-52页 |
·真核表达载体 pEGFP-BCPS′构建及鉴定 | 第52页 |
3 讨论 | 第52-54页 |
4 小结 | 第54-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
附录 | 第65-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
个人简介 | 第76页 |