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水稻侧根发育基因OsSLR1的克隆和功能研究

致谢第1-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1.文献综述第12-32页
   ·植物根系发生发育的研究进展第12-15页
  引言第12页
     ·植物根系的形态结构第12-13页
     ·主根(胚生根)的发育过程第13页
     ·胚后根形态结构和发生发育方式第13-15页
       ·侧根的形态结构和发生发育方式第13-14页
       ·不定根的形态结构发生发育过程第14-15页
   ·根系伸长调控机制第15-26页
     ·植物激素第15-18页
     ·细胞周期第18-19页
     ·根分生组织第19-22页
     ·营养元素对根长生长发育的影响第22-26页
   ·植物对铁和锰吸收研究进展第26-31页
   ·本研究的目的和意义第31-32页
2.突变体的筛选及表型分析第32-41页
   ·材料与方法第32-35页
     ·供试材料第32页
     ·实验方法第32-35页
       ·突变体筛选第32页
       ·水稻生长条件第32页
       ·表型分析第32-35页
         ·表型观察第32-33页
         ·植株生长与根部参数分析第33页
         ·细胞调亡(埃文斯蓝Evans Blue法和3,3-二氨基联苯胺(DAB))第33页
         ·活性氧测定(NBT(氯化硝基四氮唑蓝)和DAB(3,3-二氨基联苯胺)染色法)第33页
         ·地上部分茎的负向重力性反应分析第33-34页
         ·水稻营养液的配制第34页
         ·根部细胞的组织形态学观察第34-35页
   ·结果与分析第35-40页
     ·突变体的筛选和突变体的表型分析第35-36页
     ·根部的组织切片分析第36-37页
     ·细胞调亡(埃文斯蓝Evans Blue法)第37-38页
     ·茎负向地性分析第38页
     ·Osslr1对缺钙超敏第38-39页
     ·Osslr1根系伸长受氮饥饿的强烈诱导第39-40页
   ·小结第40-41页
3.基因克隆及基因表达分析第41-61页
   ·材料与方法第41-54页
     ·供试材料第41页
     ·试验方法第41-54页
       ·F_2群体的构建及遗传分析第41页
       ·突变基因的遗传分析和F_2群体DNA的提取第41-42页
       ·突变基因的图位克隆第42-44页
       ·精细定位的分子标记第44-45页
       ·RNA提取及RT-PCR第45-46页
         ·RNA提取第45页
         ·RNA逆转录第45-46页
         ·RT-PCR第46页
       ·基因克隆与测序分析第46-47页
       ·回复载体构建第47-48页
       ·启动子融合GUS载体构建第48-50页
       ·GUS染色及显微观察第50-52页
       ·Southern杂交对转基因回复株系的分子验证第52-54页
   ·结果与分析第54-60页
     ·基因定位群体的创建和遗传分析第54-55页
     ·SLR1基因定位和克隆第55-60页
       ·突变基因的定位第55-56页
       ·候选基因的分析第56-58页
       ·SLR1基因表达模式第58-60页
   ·小结第60-61页
4 SLR1蛋白的生物信息学分析及其蛋白的亚细胞定位第61-71页
   ·材料与方法第61-64页
     ·材料第61页
     ·方法第61-64页
       ·基因家族的进化分析第61-62页
       ·基因亚细胞定位分析第62-64页
         ·基因与GFP融合载体的构建第62页
         ·基因枪法转化洋葱表皮细胞第62-64页
           ·轰击前受体材料的预处理第62页
           ·微弹的准备第62-63页
           ·DNA的包裹第63页
           ·PDS-1000/He型基因枪的操作第63-64页
           ·轰击后样品的处理第64页
           ·GFP荧光的观察第64页
   ·结果第64-70页
     ·SLR1基因的生物信息学分析第64-66页
     ·进化树分析第66-69页
     ·OsSLR1蛋白的亚细胞定位第69-70页
   ·小结第70-71页
5.突变体对锰和铁的吸收受到抑制第71-81页
   ·供试材料第71页
   ·实验方法第71-73页
     ·叶绿素含量的测定第71页
     ·ICP-MS测定Osslr1和野生型中金属元素的含量第71页
     ·半定量、定量RT-PCR分析Fe和Mn吸收、转运相关的基因表达第71-73页
   ·结果与分析第73-80页
     ·Osslr1对Fe(Ⅲ)的吸收受到抑制第73页
     ·slr1突变体的主根对锰毒害超敏而地上部分能抗锰毒害第73-75页
     ·slr1突变体锰和铁等二价金属离子含量下降第75-76页
     ·Osslr1和野生型在不同供Fe状态下,地上部分和根中锰、铁及其他金属离子含量的比较第76-77页
     ·野生型植株在不同Fe供应条件下,Fe和Mn吸收相关基因的表达第77-79页
     ·电子传梯链支路基因和线粒体基因MnSODs的表达第79-80页
   ·结论第80-81页
结论与展望第81-84页
参考文献第84-97页
附录第97页

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