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水稻OsTUA2基因克隆与功能研究

致谢第1-10页
缩略语表第10-11页
摘要第11-13页
Abstract第13-15页
第一章 文献综述第15-39页
 第一部分 植物侧根的发生发育过程研究进展第15-24页
  引言第15页
  1.侧根的发生发育第15-24页
   ·侧根的起始过程的调节第16-19页
     ·侧根的起始需要auxin和调节蛋白的降解第16页
     ·侧根起始过程中的细胞周期调控与auxin信号的关系第16-17页
     ·影响侧根起始发育的其他激素第17-18页
     ·与激素信号不相关的调节侧根起始路径第18-19页
   ·侧根原基起始后的调节过程第19-21页
     ·植物激素对侧根原基的发育和分生组织的激活过程的调节第19-20页
     ·影响侧根伸长的植物激素第20页
     ·参与调控侧根原基发育过程的基因第20-21页
   ·营养元素和环境因子对侧根发育的影响和调控第21-24页
     ·局部供氮和系统供氮对根结构的影响第21-22页
     ·磷对根的构型的调节第22-24页
 第二部分 微管的结构和功能第24-39页
  1 微管的结构第24-31页
   ·与细菌FtsZ的同源性第27-28页
   ·微管蛋白的侧面连接第28页
   ·微管的动态和极性第28-29页
   ·微管的核化第29-30页
   ·微管结合蛋白MAPs的稳定作用第30页
   ·微管的解聚第30-31页
   ·联系微管和细胞膜的结构第31页
  2 微管的功能第31-39页
     ·维持细胞及器官形态第31-32页
   ·参与染色体的运动,调节细胞分裂第32-34页
   ·微管蛋白在植物适应低温胁迫中的功能第34-35页
   ·微管在盐胁迫中的作用第35页
   ·微管与纤维素合成之间的关系第35-36页
   ·参与细胞内信号转导第36-39页
     ·Ca~(2+)对微管骨架的调节第37页
     ·Ca~(2+)和CaM共同调节微管骨架的装配第37页
     ·微管骨架对Ca~(2+)通道的调控第37-38页
     ·PLD与微管之间的信号转导第38-39页
第二章 突变体Ostua2的筛选、表型鉴定和基因克隆第39-61页
 1 水稻根毛突变体筛选第39-40页
   ·材料第39页
   ·方法第39-40页
     ·突变体筛选第39页
     ·水稻营养液配方第39-40页
     ·水稻生长条件第40页
 2第40-45页
   ·材料第40-41页
   ·方法第41-42页
     ·表型观测第41页
     ·植株生长与根系参数测定第41页
     ·侧根原基形成的观察第41页
     ·盆栽及农艺学性状分析第41-42页
   ·结果与分析第42-45页
     ·突变体的表型及根部参数第42-44页
     ·侧根原基形成的观察第44-45页
     ·盆栽条件下突变体农艺性状的分析第45页
 3 突变体的遗传分析及基因克隆第45-46页
   ·材料第45-46页
   ·方法第46页
     ·突变体的F_2群体的构建第46页
     ·突变体的遗传分析第46页
   ·结果与分析第46页
 4 突变基因的克隆第46-54页
   ·材料第46-47页
   ·方法第47-52页
     ·F_2突变体样品DNA的提取第47-48页
     ·图位克隆第48-50页
       ·多态标记的选择第48页
       ·PCR扩增第48-49页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第49-50页
     ·候选基因的确定第50-52页
       ·cDNA第一链的制备第50-51页
       ·目的基因PCR扩增第51页
       ·连接T载体第51-52页
       ·热激转化DH5α第52页
       ·测序和序列比对第52页
   ·结果与分析第52-54页
 5 突变体中OsTUA2基因的功能互补验证第54-59页
   ·材料第54页
   ·方法第54-58页
     ·回复载体的构建第54-55页
     ·农杆菌介导的水稻(籼稻)转化第55-58页
       ·水稻成熟胚愈伤组织的准备第55-56页
       ·电转化农杆菌感受态细胞的制备第56页
       ·电击法转化农杆菌第56页
       ·农杆菌的培养第56-57页
       ·共培养及抗性愈伤的筛选第57页
       ·抗性愈伤的分化及成苗第57页
       ·转基因苗的锻炼和移栽第57-58页
     ·RT-PCR分析第58页
   ·结果与分析第58-59页
 6 小结与讨论第59-61页
第三章 水稻OsTUA2基因生物信息学及表达分析第61-68页
 1 OsTUA2和水稻α微管蛋白家族的分析第61-63页
   ·方法第61页
   ·结果与分析第61-63页
 2 基因表达分析第63-64页
   ·材料第63页
   ·方法第63-64页
   ·结果与分析第64页
 3 OsTUA2蛋白的亚细胞定位分析第64-67页
   ·材料第64页
   ·方法第64-67页
     ·sGFP融合载体的构建第64-65页
     ·样品的预处理第65页
     ·微弹的制备第65页
     ·质粒的包裹第65-66页
     ·PDS-1000/He型基因枪的操作步骤第66页
     ·轰击后样品的处理第66页
     ·GFP荧光的观察第66-67页
   ·结果与分析第67页
 4 小结与讨论第67-68页
第四章 磷胁迫、盐胁迫和药物条件对Ostua2突变体的影响第68-74页
 1 材料第68页
 2 方法第68页
   ·磷胁迫处理第68页
   ·盐胁迫处理第68页
   ·微管抑制剂药物处理第68页
 3 结果与分析第68-72页
   ·磷胁迫对突变体的影响第68-70页
   ·盐胁迫对突变体的影响第70-71页
   ·微管抑制剂对突变体的影响第71-72页
 4 小结与讨论第72-74页
第五章 结论与展望第74-76页
 1 结论第74-75页
 2 展望第75-76页
参考文献第76-86页

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