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绿色糖单孢菌木素过氧化物酶发酵工艺、纯化及酶学性质研究

摘要第1-4页
Abstract第4-5页
目录第5-8页
第一章 绪论第8-19页
   ·木质素生物降解第8-9页
     ·木素在自然界中的组成和存在第8页
     ·木素生物降解的研究现状第8-9页
     ·木素生物降解研究的意义第9页
   ·降解木质素的微生物第9-11页
     ·降解木质素的真菌第9-10页
     ·降解木质素的细菌第10页
     ·降解木质素的放线菌第10-11页
   ·木质素降解酶系的研究第11-12页
     ·木素过氧化物酶第11页
     ·锰过氧化物酶第11-12页
     ·漆酶第12页
   ·木素过氧化物酶的研究第12-17页
     ·木素过氧化物酶的结构第12-13页
     ·木素过氧化物酶的降解机制第13页
       ·直接氧化第13页
       ·间接氧化第13页
     ·木素过氧化物酶的酶学性质第13-16页
       ·酶的最适反应温度及热稳定性第13-14页
       ·酶的最适反应pH值及稳定性第14页
       ·木质素过氧化物酶的基因克隆、表达及调控第14-16页
     ·木素过氧化物酶的应用第16-17页
       ·木素过氧化物酶在生物漂白方面的应用第16-17页
       ·木素过氧化物酶在生物制浆方面的应用第17页
       ·木素过氧化物酶在降解污染物方面的应用第17页
   ·本课题的立题背景及意义第17-19页
第二章 实验材料与方法第19-31页
   ·实验材料与仪器第19-21页
     ·菌种第19页
     ·主要试剂第19页
     ·实验仪器第19-20页
     ·培养基第20-21页
   ·实验流程第21-22页
   ·实验方法第22-31页
     ·菌种保存方法第22页
     ·菌落与菌丝形态学观察第22页
     ·种子液培养第22页
     ·绿色糖单孢菌产木素过氧化物酶发酵罐发酵工艺条件研究第22-24页
       ·发酵前准备工作第22页
       ·发酵罐灭菌第22页
       ·发酵接种第22-23页
       ·发酵培养第23页
       ·发酵取样第23页
       ·绿色糖单孢菌生长曲线及菌液660nm处吸光度的测定第23页
       ·发酵过程中溶氧(DO)及pH变化第23页
       ·发酵培养中接种量对菌体产酶的影响第23页
       ·发酵培养基中碳氮源比例对菌体产酶的影响第23页
       ·发酵过程中搅拌速度对酶活的影响第23-24页
       ·发酵过程中通气量对酶活的影响第24页
       ·发酵罐中绿色糖单孢菌胞外蛋白表达及产LiP的时程分析第24页
     ·木质素过氧化物酶酶活性的测定第24页
     ·蛋白含量的测定第24-25页
       ·制作标准曲线第24-25页
       ·检测第25页
       ·相关溶液的配制第25页
     ·木素过氧化物酶的提取和分离纯化第25-26页
       ·粗酶液的制备第25页
       ·酶液的硫酸铵分级盐析第25-26页
         ·硫酸铵分级盐析条件摸索第25页
         ·酶的硫酸铵分级盐析第25-26页
       ·透析及冷冻干燥第26页
       ·Sephacryl S-200柱层析(凝胶过滤层析)第26页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析第26-28页
       ·相关溶液的配制第27页
       ·制胶第27-28页
       ·点样第28页
       ·电泳第28页
       ·染色与脱色第28页
       ·蛋白分子量测定第28页
         ·原理第28页
         ·步骤第28页
     ·木素过氧化物酶酶学性质研究第28-31页
       ·纯酶最适反应温度的测定第28页
       ·纯酶热稳定性的测定第28-29页
       ·木素过氧化物酶的低温保存稳定性第29页
       ·纯酶最适反应pH的测定第29页
       ·纯酶耐酸碱性的测定第29页
       ·金属离子、表面活性剂等对木素过氧化物酶活性的影响第29页
       ·酶动力学性质分析第29-30页
       ·糖浓度测定第30-31页
第三章 实验结果与分析第31-44页
   ·绿色糖单孢菌的形态学观察第31-32页
   ·绿色糖单孢菌产木素过氧化物酶发酵罐发酵工艺条件研究第32-36页
     ·发酵罐中绿色糖单孢菌菌体生长曲线及菌液光密度0D660第32页
     ·发酵过程中溶氧及pH变化第32-33页
     ·发酵过程中接种量对菌体产酶的影响第33页
     ·发酵培养基中碳氮源比例对菌体产酶的影响第33-34页
     ·搅拌速度对酶活的影响第34-35页
     ·通气量对酶活的影响第35页
     ·发酵罐中绿色糖单孢菌胞外蛋白表达及产LiP的时程分析第35-36页
   ·绿色糖单胞菌木素过氧化物酶的制备及纯化第36-38页
   ·木素过氧化物酶纯度鉴定及分子量测定第38-39页
   ·木素过氧化物酶酶学性质研究第39-44页
     ·木素过氧化物酶最适反应温度第39-40页
     ·木素过氧化物酶热稳定性分析第40页
     ·木素过氧化物酶的低温保存稳定性第40-41页
     ·木素过氧化物酶最适反应pH分析第41页
     ·木素过氧化物酶耐碱性分析第41-42页
     ·金属离子、表面活性剂等对木素过氧化物酶活性的影响第42-43页
     ·酶动力学性质分析第43页
     ·糖浓度测定第43-44页
第四章 结论第44-45页
第五章 讨论第45-47页
参考文献第47-52页
单位符号缩写第52-53页
个人简历第53-54页
导师简历第54-55页
发表论文第55-56页
致谢第56页

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