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低温脂肪酶的筛选、纯化及特性研究

摘要第1-3页
Abstract第3-4页
中文文摘第4-10页
绪论第10-32页
   ·微生物脂肪酶的研究第10-11页
   ·脂肪酶的结构与水解机制第11-14页
     ·脂肪酶的定义第11-12页
     ·脂肪酶分子的结构特征第12-13页
     ·脂肪酶的水解机制第13-14页
   ·脂肪酶活性的常用测定方法第14-16页
     ·测定底物的减少量第15页
     ·测定产物的增加量第15-16页
   ·脂肪酶的多样性第16-20页
     ·来源的多样性第16-18页
     ·特性的多样性第18-19页
     ·分子组成的多样性第19-20页
   ·脂肪酶的应用第20-25页
     ·在食品、奶制品工业的应用第20-21页
     ·在纺织、洗涤业的应用第21-22页
     ·在生物医药领域的应用第22-24页
     ·在生物柴油中的应用第24-25页
     ·在其他工业中的应用第25页
   ·低温微生物与低温酶第25-27页
     ·低温微生物第25-26页
     ·低温酶第26-27页
   ·低温脂肪酶第27-30页
     ·低温脂肪酶产生菌来源第27-29页
     ·低温脂肪酶的结构特征第29-30页
   ·低温脂肪酶的研究意义及概况第30-32页
第1章 低温脂肪酶产生菌的筛选第32-38页
   ·低温脂肪酶产生菌的筛选第32-34页
     ·样品的采集及处理第32页
     ·菌株的分离和培养第32页
     ·溶液和其它试剂第32-33页
     ·脂肪酶活性的测定第33页
     ·脂肪酶产生菌的筛选第33-34页
   ·结果与分析第34-37页
     ·脂肪酶产生菌的筛选第34-35页
     ·各株脂肪酶的特性第35-37页
   ·小结第37-38页
第2章 脂肪酶产生菌的鉴定第38-48页
   ·材料与方法第38-42页
     ·材料第38页
       ·菌株和质粒第38页
       ·培养基和溶液第38页
       ·试剂第38页
       ·仪器第38页
     ·方法第38-42页
       ·菌株表型第38-39页
       ·16SrDNA分子鉴定第39-42页
   ·结果与分析第42-46页
     ·基因组提取第42-43页
     ·pSK-16SrDNA的构建第43-44页
       ·16SrDNA的扩增第43页
       ·阳性克隆子的验证第43-44页
     ·菌株16SrDNA进化树分析第44-46页
   ·小结第46-48页
第3章 RT7低温脂肪酶的纯化与性质分析第48-66页
   ·材料第48-50页
     ·菌种第48页
     ·试剂第48页
     ·仪器第48-49页
     ·常用溶液第49页
     ·培养基第49-50页
   ·方法第50-53页
     ·脂肪酶酶活的测定第50-51页
       ·平板透明圈法第50页
       ·分光光度法第50页
       ·标准曲线的绘制第50-51页
     ·发酵培养基的优化第51-52页
       ·氮源对产酶的影响测定第51页
       ·碳源对产酶的影响测定第51-52页
     ·Pseudomonas RT-7脂肪酶(PL-7)的纯化第52-53页
       ·硫酸铵分级沉淀第52页
       ·Pseudomonas RT-7脂肪酶的纯化第52-53页
     ·Pseudomonas RT-7脂肪酶的理化性质分析第53页
       ·分子量的测定-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第53页
       ·酶学特性分析第53页
   ·结果与分析第53-64页
     ·产酶优化第53-55页
       ·氮源对产酶的影响第53-54页
       ·碳源对产酶发酵条件的影响第54-55页
     ·Pseudomonas RT-7脂肪酶的纯化第55-58页
       ·硫酸铵分级沉淀第55-56页
       ·DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析第56-57页
       ·Sephacryl S-100分子筛层析第57-58页
     ·PL-7的理化性质分析第58-64页
       ·酶分子量测定:SDS-PAGE测定第58页
       ·pH对酶活性的影响第58-59页
       ·温度对酶活性的影响第59页
       ·酶的pH稳定性研究第59-60页
       ·酶的热稳定性研究第60-61页
       ·有机溶剂对酶稳定性的影响第61-62页
       ·酶的抑制剂和激活剂研究第62页
       ·DTT与PMSF对酶活性的影响第62-63页
       ·酶的底物特异性第63-64页
   ·小结第64-66页
第4章 小结与结论第66-70页
   ·结论第66-68页
   ·讨论第68-70页
参考文献第70-78页
附录I 英文缩略词表第78-80页
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果第80-82页
致谢第82-84页
个人简历第84页

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