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Fhit相关基因的筛选及部分基因的鉴定

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第11-12页
前言第12-18页
 1.Fhit 基因的发现第12-13页
 2 Fhit 基因的结构第13-14页
 3 Fhit 基因的肿瘤抑制机理第14-16页
   ·蛋白激酶C 抑制剂(protein kinase C inhibitor, PKCI)第14页
   ·AP3A 水解酶—细胞增殖调节假说第14页
   ·APnA-Fhit 聚合物———细胞凋亡传导信号假说第14-16页
 4 本研究的主要目的第16页
 5 问题与展望第16-18页
1. 材料第18-19页
   ·质粒、菌株、细胞株、弗氏佐剂及动物第18页
   ·引物合成及序列测定第18页
   ·分子生物学工具酶第18页
   ·常用分子生物学试剂盒第18页
   ·细胞培养试剂与耗材第18-19页
   ·免疫印迹试剂第19页
   ·RNA 提取相关试剂第19页
   ·其它常规试剂第19页
   ·常用缓冲液及细菌培养液第19页
   ·大型仪器第19页
2. 方法第19-28页
   ·重组质粒构建、阳性克隆的鉴定第19-22页
     ·常规 PCR 反应第19-20页
     ·GST 融合表达载体的构建、阳性克隆的鉴定第20-22页
     ·重组克隆质粒提取、酶切片段及PCR 反应产物回收第22页
   ·融合蛋白在大肠杆菌中的表达纯化第22-23页
   ·免疫印迹实验第23-24页
   ·动物免疫第24页
   ·细胞培养及细胞裂解第24-25页
     ·细胞培养第24-25页
     ·细胞裂解第25页
   ·细胞中总RNA 的提取及RT-PCR 鉴定第25-26页
     ·总RNA 的提取第25-26页
     ·RT-PCR 鉴定第26页
   ·ELISA 检测抗体的效价第26-27页
   ·细胞辐射第27-28页
3. 结果与讨论第28-45页
   ·用高通量基因芯片技术对Fhit 影响的基因进行表达差异筛选第28-30页
     ·细胞培养及电离辐射处理第28-29页
     ·差异基因分类分析第29-30页
   ·芯片结果的验证第30-44页
     ·在 mRNA 水平验证差异基因的表达第30-34页
     ·在蛋白质水平验证差异基因的表达第34-44页
   ·讨论第44-45页
4. 结论第45-46页
参考文献第46-49页
攻读硕士期间发表及投稿的文章第49-50页
致谢第50-51页

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