摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
前言 | 第12-18页 |
1.Fhit 基因的发现 | 第12-13页 |
2 Fhit 基因的结构 | 第13-14页 |
3 Fhit 基因的肿瘤抑制机理 | 第14-16页 |
·蛋白激酶C 抑制剂(protein kinase C inhibitor, PKCI) | 第14页 |
·AP3A 水解酶—细胞增殖调节假说 | 第14页 |
·APnA-Fhit 聚合物———细胞凋亡传导信号假说 | 第14-16页 |
4 本研究的主要目的 | 第16页 |
5 问题与展望 | 第16-18页 |
1. 材料 | 第18-19页 |
·质粒、菌株、细胞株、弗氏佐剂及动物 | 第18页 |
·引物合成及序列测定 | 第18页 |
·分子生物学工具酶 | 第18页 |
·常用分子生物学试剂盒 | 第18页 |
·细胞培养试剂与耗材 | 第18-19页 |
·免疫印迹试剂 | 第19页 |
·RNA 提取相关试剂 | 第19页 |
·其它常规试剂 | 第19页 |
·常用缓冲液及细菌培养液 | 第19页 |
·大型仪器 | 第19页 |
2. 方法 | 第19-28页 |
·重组质粒构建、阳性克隆的鉴定 | 第19-22页 |
·常规 PCR 反应 | 第19-20页 |
·GST 融合表达载体的构建、阳性克隆的鉴定 | 第20-22页 |
·重组克隆质粒提取、酶切片段及PCR 反应产物回收 | 第22页 |
·融合蛋白在大肠杆菌中的表达纯化 | 第22-23页 |
·免疫印迹实验 | 第23-24页 |
·动物免疫 | 第24页 |
·细胞培养及细胞裂解 | 第24-25页 |
·细胞培养 | 第24-25页 |
·细胞裂解 | 第25页 |
·细胞中总RNA 的提取及RT-PCR 鉴定 | 第25-26页 |
·总RNA 的提取 | 第25-26页 |
·RT-PCR 鉴定 | 第26页 |
·ELISA 检测抗体的效价 | 第26-27页 |
·细胞辐射 | 第27-28页 |
3. 结果与讨论 | 第28-45页 |
·用高通量基因芯片技术对Fhit 影响的基因进行表达差异筛选 | 第28-30页 |
·细胞培养及电离辐射处理 | 第28-29页 |
·差异基因分类分析 | 第29-30页 |
·芯片结果的验证 | 第30-44页 |
·在 mRNA 水平验证差异基因的表达 | 第30-34页 |
·在蛋白质水平验证差异基因的表达 | 第34-44页 |
·讨论 | 第44-45页 |
4. 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
攻读硕士期间发表及投稿的文章 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |