致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-19页 |
·玉米穗分化过程 | 第9-11页 |
·玉米雌穗分化过程 | 第9-10页 |
·玉米雄穗分化过程 | 第10页 |
·玉米穗分化的分子生物学研究 | 第10-11页 |
·转座子标签法克隆基因 | 第11-17页 |
·转座子的概念 | 第12页 |
·转座子标签法克隆基因的原理和方法 | 第12页 |
·转座子标签法克隆基因的原理 | 第12页 |
·转座子标签法克隆植物基因的方法 | 第12页 |
·Ac/Ds、Spm/dspm 转座子 | 第12-13页 |
·Mu 转座子 | 第13-17页 |
·Mu 转座子的发现及类型 | 第13-14页 |
·Mu 的插入突变的特点 | 第14页 |
·Mu 因子的应用 | 第14-15页 |
·利用Mu 转座子克隆基因 | 第15-17页 |
·AFLP 的标记 | 第17-19页 |
·AFLP 标记的基本原理 | 第17页 |
·AFLP 技术特点 | 第17-18页 |
·改良的AFLP 技术 | 第18页 |
·AFLP 标记的应用 | 第18-19页 |
·遗传多态性和种质鉴定 | 第18页 |
·构建遗传图谱 | 第18页 |
·辅助育种 | 第18-19页 |
2 引言 | 第19页 |
3 材料与方法 | 第19-28页 |
·试验材料 | 第19页 |
·玉米穗分化相关基因突变体的筛选 | 第19页 |
·高质量 DNA 的提取和纯化 | 第19-21页 |
·采用改良的 SDS 法提取亲本及突变体的基因组 DNA | 第19-20页 |
·DNA 的纯化及质量检测 | 第20-21页 |
·改良的 AFLP 的基本程序 | 第21-25页 |
·限制性内切酶酶切 | 第21页 |
·酶切产物和接头引物连接 | 第21-22页 |
·连接反应的接头序列 | 第21页 |
·接头的制备和连接反应 | 第21-22页 |
·预扩增和选择性扩增的体系及 PCR 反应的程序 | 第22-23页 |
·预扩增的引物和体系 | 第22-23页 |
·选择性扩增的体系和 PCR 反应程序 | 第23页 |
·选择性扩增产物检测 | 第23-25页 |
·扩增 DNA 变性 | 第23-24页 |
·电泳准备 | 第24页 |
·扩增产物的电泳 | 第24页 |
·扩增产物的银染检测——聚丙烯酰胺凝胶 NaOH 染色方法 | 第24-25页 |
·差异片段的回收和测序 | 第25-28页 |
·差异片段的回收 | 第25页 |
·PCR 产物的纯化 | 第25-26页 |
·差异片段的测序 | 第26-28页 |
·差异 DNA 片段与 PMD18-T 载体连接 | 第26页 |
·热击转化 | 第26-28页 |
·PCR 检测阳性克隆 | 第28页 |
·PCR 产物的测序 | 第28页 |
4 结果与分析 | 第28-36页 |
·F1 代种子的筛选 | 第28页 |
·穗分化基因突变体 F-m 的筛选 | 第28-29页 |
·穗分化突变体侧翼片段扩增 | 第29-36页 |
·基因组模板 DNA 质量的检测 | 第29页 |
·基因组DNA 的酶切和连接的检测 | 第29-30页 |
·AFLP 预扩增的检测 | 第30页 |
·AFLP 选择性扩增的检测 | 第30-31页 |
·差异片段的回收检测 | 第31-36页 |
·220bp 差异片段的序列分析 | 第31-33页 |
·候选基因的生物信息学分析 | 第31-33页 |
·673bp 差异片段的序列分析 | 第33-36页 |
·候选基因的生物信息学分析 | 第34-36页 |
5 结论和讨论 | 第36-38页 |
·结论 | 第36页 |
·讨论 | 第36-38页 |
·Mu 转座子的突变频率 | 第36页 |
·改良的AFLP 法在分离Mu7 插入的侧翼片段中的应用 | 第36-37页 |
·玉米穗分化与rps4 基因 | 第37页 |
·进一步工作 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-48页 |
英文摘要 | 第48-49页 |