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玉米穗分化候选基因的克隆

致谢第1-8页
摘要第8-9页
1 文献综述第9-19页
   ·玉米穗分化过程第9-11页
     ·玉米雌穗分化过程第9-10页
     ·玉米雄穗分化过程第10页
     ·玉米穗分化的分子生物学研究第10-11页
   ·转座子标签法克隆基因第11-17页
     ·转座子的概念第12页
     ·转座子标签法克隆基因的原理和方法第12页
       ·转座子标签法克隆基因的原理第12页
       ·转座子标签法克隆植物基因的方法第12页
     ·Ac/Ds、Spm/dspm 转座子第12-13页
     ·Mu 转座子第13-17页
       ·Mu 转座子的发现及类型第13-14页
       ·Mu 的插入突变的特点第14页
       ·Mu 因子的应用第14-15页
       ·利用Mu 转座子克隆基因第15-17页
   ·AFLP 的标记第17-19页
     ·AFLP 标记的基本原理第17页
     ·AFLP 技术特点第17-18页
     ·改良的AFLP 技术第18页
     ·AFLP 标记的应用第18-19页
       ·遗传多态性和种质鉴定第18页
       ·构建遗传图谱第18页
       ·辅助育种第18-19页
2 引言第19页
3 材料与方法第19-28页
   ·试验材料第19页
   ·玉米穗分化相关基因突变体的筛选第19页
   ·高质量 DNA 的提取和纯化第19-21页
     ·采用改良的 SDS 法提取亲本及突变体的基因组 DNA第19-20页
     ·DNA 的纯化及质量检测第20-21页
   ·改良的 AFLP 的基本程序第21-25页
     ·限制性内切酶酶切第21页
     ·酶切产物和接头引物连接第21-22页
       ·连接反应的接头序列第21页
       ·接头的制备和连接反应第21-22页
     ·预扩增和选择性扩增的体系及 PCR 反应的程序第22-23页
       ·预扩增的引物和体系第22-23页
       ·选择性扩增的体系和 PCR 反应程序第23页
     ·选择性扩增产物检测第23-25页
       ·扩增 DNA 变性第23-24页
       ·电泳准备第24页
       ·扩增产物的电泳第24页
       ·扩增产物的银染检测——聚丙烯酰胺凝胶 NaOH 染色方法第24-25页
   ·差异片段的回收和测序第25-28页
     ·差异片段的回收第25页
     ·PCR 产物的纯化第25-26页
     ·差异片段的测序第26-28页
       ·差异 DNA 片段与 PMD18-T 载体连接第26页
       ·热击转化第26-28页
       ·PCR 检测阳性克隆第28页
     ·PCR 产物的测序第28页
4 结果与分析第28-36页
   ·F1 代种子的筛选第28页
   ·穗分化基因突变体 F-m 的筛选第28-29页
   ·穗分化突变体侧翼片段扩增第29-36页
     ·基因组模板 DNA 质量的检测第29页
     ·基因组DNA 的酶切和连接的检测第29-30页
     ·AFLP 预扩增的检测第30页
     ·AFLP 选择性扩增的检测第30-31页
     ·差异片段的回收检测第31-36页
       ·220bp 差异片段的序列分析第31-33页
         ·候选基因的生物信息学分析第31-33页
       ·673bp 差异片段的序列分析第33-36页
         ·候选基因的生物信息学分析第34-36页
5 结论和讨论第36-38页
   ·结论第36页
   ·讨论第36-38页
     ·Mu 转座子的突变频率第36页
     ·改良的AFLP 法在分离Mu7 插入的侧翼片段中的应用第36-37页
     ·玉米穗分化与rps4 基因第37页
     ·进一步工作第37-38页
参考文献第38-48页
英文摘要第48-49页

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