| 摘要 | 第2-3页 |
| abstract | 第3-4页 |
| 第一部分 Thrombospondin-1 通过FAK信号通路促进骨肉瘤迁移、侵袭和肺转移机制研究 | 第9-43页 |
| 1 引言 | 第9-14页 |
| 1.1 骨肉瘤概况 | 第9页 |
| 1.2 肿瘤转移的生物学行为 | 第9-10页 |
| 1.3 转移前小生境 | 第10-11页 |
| 1.4 血小板反应蛋白-1(Thrombospondin-1) | 第11-14页 |
| 2 材料和方法 | 第14-26页 |
| 2.1 主要仪器设备 | 第14-15页 |
| 2.2 试剂 | 第15页 |
| 2.3 常用溶液配制方法 | 第15-16页 |
| 2.4 动物饲养 | 第16-17页 |
| 2.5 骨肉瘤原位肺转移模型建立 | 第17页 |
| 2.6 表达谱检测和生物信息学分析 | 第17页 |
| 2.7 细胞培养 | 第17-19页 |
| 2.8 骨肉瘤临床标本收集 | 第19页 |
| 2.9 H＆E染色和免疫组化 | 第19-20页 |
| 2.10 Real-time PCR | 第20-21页 |
| 2.11 蛋白免疫印迹Western-blot | 第21-23页 |
| 2.12 慢病毒的包装 | 第23-24页 |
| 2.13 慢病毒载体转染骨肉瘤细胞 | 第24页 |
| 2.14 划痕实验 | 第24-25页 |
| 2.15 Transwell 迁移实验 | 第25页 |
| 2.16 Transwell 侵袭实验 | 第25页 |
| 2.17 统计学分析 | 第25-26页 |
| 3 结果 | 第26-40页 |
| 3.1 TSP1 表达在骨肉瘤恶性进展过程中获得富集 | 第26-30页 |
| 3.2 TSP1 加速骨肉瘤划痕愈合能力 | 第30-32页 |
| 3.3 TSP1 刺激骨肉瘤细胞的迁移和侵袭能力 | 第32-34页 |
| 3.4 TSP1 通过激活FAK信号通路促进骨肉瘤细胞的迁移和侵袭能力 | 第34-36页 |
| 3.5 抑制TSP1 表达可以明显抑制骨肉瘤肺转移 | 第36-38页 |
| 3.6 TGF-β通路调控骨肉瘤细胞中TSP1 表达 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| 第二部分 FAK在骨肉瘤中表达和其抑制剂PF562271 抗骨肉瘤机制研究 | 第43-80页 |
| 1 引言 | 第43-49页 |
| 1.1 FAK结构 | 第44页 |
| 1.2 FAK与肿瘤生存和生长 | 第44-45页 |
| 1.3 FAK与肿瘤侵袭 | 第45-46页 |
| 1.4 FAK与肿瘤干细胞 | 第46页 |
| 1.5 ATP竞争性FAK抑制剂 | 第46-47页 |
| 1.6 FAK特异性抑制剂 | 第47-49页 |
| 2 材料和方法 | 第49-64页 |
| 2.1 主要仪器和设备 | 第49-50页 |
| 2.2 细胞系和试剂 | 第50-51页 |
| 2.3 常用溶液配制方法 | 第51页 |
| 2.4 骨肉瘤组织芯片制备及病人预后统计 | 第51-56页 |
| 2.5 细胞培养 | 第56-58页 |
| 2.6 CCK8 细胞增殖实验 | 第58页 |
| 2.7 平板克隆形成实验 | 第58-59页 |
| 2.8 流式细胞术测定细胞凋亡 | 第59-60页 |
| 2.9 血管内皮细胞成管实验(Tuber formation assay) | 第60页 |
| 2.10 免疫荧光 | 第60页 |
| 2.11 TUNEL染色检测细胞凋亡 | 第60-62页 |
| 2.12 动物饲养 | 第62-63页 |
| 2.13 骨肉瘤细胞 143B 裸鼠皮下成瘤和给药实验 | 第63页 |
| 2.14 统计学方法 | 第63-64页 |
| 3 结果 | 第64-77页 |
| 3.1 p-FAK(Y397)在骨肉瘤组织中高表达且与患者临床预后和肺转移相关 | 第64-66页 |
| 3.2 PF562271 可以抑制骨肉瘤细胞的细胞活性和克隆形成能力 | 第66-68页 |
| 3.3 PF562271 诱导骨肉瘤细胞凋亡 | 第68-70页 |
| 3.4 PF562271 抑制AKT/mTOR信号通路的活性 | 第70-71页 |
| 3.5 PF562271 可以抑制内皮细胞成管能力 | 第71-74页 |
| 3.6 口服给药PF562271 可以抑制小鼠皮下肿瘤 | 第74-77页 |
| 4 讨论 | 第77-80页 |
| 结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-91页 |
| 学术论文和科研成果 | 第91-94页 |
