致谢 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第8-13页 |
1.1 bHLH转录因子家族在植物中的研究进展 | 第8-10页 |
1.1.1 bHLH转录因子结构特点和分类 | 第8-9页 |
1.1.2 bHLH转录因子在植物中的功能 | 第9-10页 |
1.1.2.1 生长发育 | 第9页 |
1.1.2.2 光信号传导 | 第9页 |
1.1.2.3 次生代谢 | 第9-10页 |
1.1.2.4 逆境胁迫 | 第10页 |
1.2 糖信号与幼苗建成 | 第10-13页 |
1.2.1 糖信号对幼苗建成调控为浓度依赖性 | 第10页 |
1.2.2 糖信号通路 | 第10-13页 |
1.2.2.1 葡萄糖感受器 | 第10-11页 |
1.2.2.2 糖信号转导关键基因SnRK1 | 第11-13页 |
2 引言 | 第13-14页 |
3 材料与方法 | 第14-30页 |
3.1 实验材料 | 第14页 |
3.1.1 供试品种 | 第14页 |
3.1.2 实验试剂 | 第14页 |
3.1.3 实验仪器 | 第14页 |
3.2 实验方法 | 第14-30页 |
3.2.1 水稻幼苗培养 | 第14-15页 |
3.2.2 生物信息学分析 | 第15页 |
3.2.3 RNA提取 | 第15-16页 |
3.2.4 反转录 | 第16页 |
3.2.5 RT-PCR | 第16-17页 |
3.2.6 实时荧光定量PCR | 第17-18页 |
3.2.7 OsbHLH111载体构建 | 第18-20页 |
3.2.8 OsbHLH111-CRSIPR/Cas9载体构建 | 第20-21页 |
3.2.9 农杆菌转化 | 第21页 |
3.2.10 遗传转化组织培养 | 第21-22页 |
3.2.11 转基因株系阳性鉴定 | 第22-23页 |
3.2.12 GUS材料染色 | 第23页 |
3.2.13 亚细胞定位 | 第23-25页 |
3.2.14 酵母双杂交 | 第25-27页 |
3.2.15 酵母双杂交点对点验证 | 第27-28页 |
3.2.16 蛋白原核表达及纯化 | 第28-29页 |
3.2.17 多克隆抗体及免疫印迹检测 | 第29-30页 |
4 结果与分析 | 第30-43页 |
4.1 OsbHLH111的开放阅读框及氨基酸序列分析 | 第30页 |
4.2 OsbHLH111重组表达、标签蛋白纯化和多克隆抗体制备 | 第30-31页 |
4.3 OsbHLH111的发育阶段表达模式分析 | 第31-32页 |
4.4 OsbHLH111组织表达模式分析 | 第32-34页 |
4.5 OsbHLH111定位于细胞核 | 第34-35页 |
4.6 OsbHLH111缺失突变体及过表达突变体材料构建 | 第35-36页 |
4.7 OsbHLH111抑制水稻幼苗生长 | 第36-39页 |
4.8 OsbHLH111缺失突变体中内源蔗糖和葡萄糖含量升高 | 第39页 |
4.9 酵母双杂交筛选OsbHLH111互作蛋白 | 第39-42页 |
4.10 酵母双杂交点对点验证OsbHLH111与OsSnRK1a、OsSAMS1相互作用 | 第42-43页 |
5 结论与讨论 | 第43-44页 |
5.1 OsbHLH111抑制水稻幼苗生长 | 第43页 |
5.2 OsbHLH111通过与OsSnRK1a相互作用参与糖信号通路 | 第43页 |
5.3 酵母双杂交技术在筛选互作蛋白中的应用 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
ABSTRACT | 第49页 |