| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第12-20页 |
| 1.1 转录因子和植物非生物胁迫 | 第12页 |
| 1.2 C2H2型锌指蛋白家族 | 第12-19页 |
| 1.2.1 C2H2型锌指蛋白的概述 | 第13页 |
| 1.2.2 植物C2H2型锌指蛋白的结构 | 第13-15页 |
| 1.2.3 C2H2型锌指蛋白的分类 | 第15页 |
| 1.2.4 C2H2型锌指蛋白的功能 | 第15-18页 |
| 1.2.5 C2H2型锌指蛋白的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3 本实验的研究意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料和方法 | 第20-46页 |
| 2.1 基因鉴定和引物设计 | 第20页 |
| 2.2 总DNA提取 | 第20-22页 |
| 2.2.1 材料 | 第20页 |
| 2.2.2 仪器 | 第20页 |
| 2.2.3 试剂 | 第20-21页 |
| 2.2.4 方法（CTAB法） | 第21-22页 |
| 2.3 基因扩增 | 第22页 |
| 2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第22-23页 |
| 2.4.1 试剂 | 第22-23页 |
| 2.4.2 仪器 | 第23页 |
| 2.4.3 方法 | 第23页 |
| 2.5 总RNA提取 | 第23-25页 |
| 2.5.1 材料 | 第23页 |
| 2.5.2 仪器 | 第23-24页 |
| 2.5.3 试剂 | 第24页 |
| 2.5.4 方法 | 第24-25页 |
| 2.6 RT-PCR | 第25-27页 |
| 2.6.1 试剂 | 第25-26页 |
| 2.6.2 方法 | 第26-27页 |
| 2.7 测序 | 第27页 |
| 2.8 胶回收 | 第27-28页 |
| 2.9 克隆载体的构建 | 第28页 |
| 2.10 大肠杆菌感受态细胞的制备与保存 | 第28-29页 |
| 2.10.1 试剂 | 第28页 |
| 2.10.2 方法 | 第28-29页 |
| 2.11 克隆载体的转化 | 第29-30页 |
| 2.11.1 试剂 | 第29页 |
| 2.11.2 方法 | 第29-30页 |
| 2.12 菌种保存 | 第30页 |
| 2.13 质粒提取 | 第30-31页 |
| 2.13.1 克隆载体的提取 | 第30-31页 |
| 2.13.2 PCXSN质粒的提取 | 第31页 |
| 2.14 Peu AZF2过表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 2.14.1 目的基因的双酶切 | 第31页 |
| 2.14.2 PCXSN质粒的双酶切 | 第31-32页 |
| 2.14.3 连接反应 | 第32页 |
| 2.15 PalAZF2多靶点PYLCRISPR/Cas9-DH载体的构建 | 第32-36页 |
| 2.15.1 菌种活化 | 第32页 |
| 2.15.2 质粒提取 | 第32页 |
| 2.15.3 sg RNA表达盒构建 | 第32-35页 |
| 2.15.4 pYLCRISPR/Cas9双元载体与sg RNA表达盒的酶切-连接反应 | 第35页 |
| 2.15.5 连接产物转化 | 第35页 |
| 2.15.6 pYLCRISPR/Cas9和三个sgRNA表达盒重组载体的阳性检测 | 第35-36页 |
| 2.16 表达载体转入农杆菌 | 第36-37页 |
| 2.16.1 农杆菌感受态制备 | 第36页 |
| 2.16.2 农杆菌转化方法 | 第36-37页 |
| 2.17 新疆杨叶盘侵染转化实验 | 第37-38页 |
| 2.17.1 材料 | 第37页 |
| 2.17.2 培养基配方 | 第37页 |
| 2.17.3 方法 | 第37-38页 |
| 2.18 转基因新疆杨阳性苗验证与继代培养 | 第38-39页 |
| 2.18.1 阳性苗验证 | 第38-39页 |
| 2.18.2 阳性苗继代培养 | 第39页 |
| 2.19 实时荧光定量PCR（Real-time PCR） | 第39-41页 |
| 2.19.1 模板RNA提取 | 第39页 |
| 2.19.2 反转录 | 第39-40页 |
| 2.19.3 Real-time PCR | 第40页 |
| 2.19.4 实验结果分析 | 第40-41页 |
| 2.20 转基因新疆杨的生长情况 | 第41页 |
| 2.21 转基因新疆杨在盐处理下的生长表型 | 第41-42页 |
| 2.21.1 盐处理方法 | 第41页 |
| 2.21.2 生长表型统计 | 第41-42页 |
| 2.22 盐处理下转基因新疆杨中AZF2基因的表达 | 第42页 |
| 2.23 叶绿素荧光动力学参数测定 | 第42页 |
| 2.23.1 仪器设备 | 第42页 |
| 2.23.2 材料 | 第42页 |
| 2.23.3 测定步骤 | 第42页 |
| 2.24 脯氨酸含量测定 | 第42-44页 |
| 2.24.1 试剂和仪器 | 第42-43页 |
| 2.24.2 组织样品的制备 | 第43页 |
| 2.24.3 测定步骤 | 第43页 |
| 2.24.4 含量计算 | 第43-44页 |
| 2.25 可溶性糖含量测定 | 第44-46页 |
| 2.25.1 试剂和仪器 | 第44页 |
| 2.25.2 样品可溶性糖提取 | 第44页 |
| 2.25.3 测定步骤 | 第44页 |
| 2.25.4 含量计算 | 第44-46页 |
| 第三章 实验结果 | 第46-57页 |
| 3.1 胡杨C2H2-ZFP基因家族鉴定 | 第46页 |
| 3.2 外显子/内含子以及motif分析 | 第46-47页 |
| 3.3 染色体定位 | 第47-48页 |
| 3.4 系统发育分析 | 第48-49页 |
| 3.5 杨树AZF2基因克隆与结构分析 | 第49-51页 |
| 3.6 杨树AZF2基因的表达模式 | 第51-52页 |
| 3.7 35S::Peu AZF2和palazf2转基因植株的构建 | 第52-53页 |
| 3.8 35S::Peu AZF2和palazf2的根生长差异 | 第53-54页 |
| 3.9 盐处理下表型差异和生理指标差异 | 第54-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-62页 |
| 4.1 胡杨C2H2锌指蛋白家族的鉴定 | 第57-58页 |
| 4.2 杨树AZF2基因的表达模式分化 | 第58页 |
| 4.3 PeuAZF2与胡杨的根发育 | 第58-59页 |
| 4.4 PeuAZF2与胡杨的盐胁迫响应 | 第59页 |
| 4.5 PeuAZF2是一种正调控因子 | 第59-62页 |
| 第五章 结论 | 第62-64页 |
| 5.1 主要结论 | 第62页 |
| 5.2 研究展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 缩略词 | 第71-72页 |
| 附录 | 第72-76页 |
| 在读期间参与学术成果 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
