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Del/Ros共表达提高新疆杨的抗病性

中文摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 前言第11-23页
    1.1 杨树生物学特征的介绍第11页
    1.2 杨树病害的介绍第11-12页
    1.3 杨树对病原菌的防御机制第12-14页
    1.4 黄酮类化合物与杨树抗病机制的关系第14-15页
    1.5 黄酮类化合物的研究进展第15-20页
        1.5.1 黄酮类化合物的分类第15页
        1.5.2 花青素的功能特点第15-16页
        1.5.3 单宁的功能特点第16页
        1.5.4 黄酮类化合物的转录调控机制第16-18页
        1.5.5 MYB和bHLH转录因子基因家族在苯丙烷代谢通路中的作用第18-20页
    1.6 杨树转基因工程研究概况第20-21页
        1.6.1 杨树转基因工程发展近况第20-21页
        1.6.2 利用转基因技术提高杨树抗病性的研究进展第21页
    1.7 本研究的内容及技术路线第21-23页
第二章 材料与方法第23-44页
    2.1 材料第23-26页
        2.1.1 植物材料第23页
        2.1.2 菌种、质粒第23页
        2.1.3 试剂、试剂盒第23-24页
        2.1.4 激素、抗生素第24-25页
        2.1.5 植物、细菌、真菌培养基第25-26页
        2.1.6 分析软件第26页
        2.1.7 仪器设备第26页
    2.2 方法第26-44页
        2.2.1 RT-qPCR验证Del、Ros表达量第26-28页
        2.2.2 花青素的提取第28-29页
        2.2.3 CTAB法提新疆杨DNA第29-30页
        2.2.4 新疆杨总RNA提取第30-31页
        2.2.5 目的基因扩增,胶回收纯化,加“A”反应以及连接第31-34页
        2.2.6 DH5a大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法)第34-35页
        2.2.7 重组质粒、连接反应产物转化DH5α感受态单细胞第35-36页
        2.2.8 扩大培养阳性单菌落并进行质粒提取第36页
        2.2.9 酶切pMD19-Ros、pCXSN-Del,并重新拼接第36-38页
        2.2.10 过表达载体转入农杆菌第38-40页
        2.2.11 新疆杨的遗传转化过表达载体转入农杆菌第40-41页
        2.2.12 转基因新疆杨的鉴定(PCR法)第41页
        2.2.13 RT-qPCR验证阳性苗表达量第41页
        2.2.14 新疆杨总酚的测定第41页
        2.2.15 花青素、单宁含量的测定第41-42页
        2.2.16 新疆杨槲皮素、山奈酚的测定第42-43页
        2.2.17 新疆杨叶片DMACA的染色第43页
        2.2.18 灰霉病、溃疡病的培养和接种第43-44页
第三章 结果与讨论第44-62页
    3.1 结果第44-59页
        3.1.1 Del、Ros在两种杨树里的表达量比较第44页
        3.1.2 两种杨树花青素含量以及抗病性的比较第44-46页
        3.1.3 Del、Ros氨基酸序列结构分析第46-47页
        3.1.4 Del、Ros基因的进化分析第47-48页
        3.1.5 新疆杨DNA提取结果并作为模板扩增Del/Ros第48-49页
        3.1.6 新疆杨总RNA提取结果并作为模板扩增Del/Ros第49页
        3.1.7 pMD19-Ros、pCXSN-Del的连接第49-50页
        3.1.8 pCAMBIA1305-Ros-Del的构建第50页
        3.1.9 转基因新疆杨的获得第50-52页
        3.1.10 Del/Ros-2、Del/Ros-5、WT中单宁含量的对比第52-53页
        3.1.11 DMACA染色检测叶片单宁含量第53-54页
        3.1.12 Del/Ros-2、Del/Ros-5、WT中花青素含量的对比第54-55页
        3.1.13 转基因新疆杨植株槲皮素、山奈酚含量的检测第55-56页
        3.1.14 转基因新疆杨总酚含量的检测分析第56页
        3.1.15 Del/Ros-2、Del/Ros-5、WT抗病性的比较分析第56-58页
        3.1.16 结论第58-59页
    3.2 讨论第59-62页
        3.2.1 杨树转基因工程进展第59页
        3.2.2 黄酮类化合物和杨树抗病性的关系第59-60页
        3.2.3 白杨派杨树的抗病性第60-62页
参考文献第62-65页
在学期间的研究成果第65-66页
致谢第66页

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