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亚洲镰孢菌(Fusarium asiaticum)三个特有基因生物学功能及其潜在药靶发掘

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
符号及缩略说明表第11-13页
第一章 文献综述、研究目的及意义第13-29页
    1 亚洲镰孢菌研究进展第13-23页
        1.1 小麦赤霉病的危害第14-15页
        1.2 小麦赤霉病侵染循环第15-16页
        1.3 小麦赤霉病发病症状第16-17页
        1.4 影响小麦赤霉病发病情况的因素第17-19页
            1.4.1 菌源量情况第18页
            1.4.2 品种的抗病性和感病生育期第18页
            1.4.3 气候和温度第18-19页
            1.4.4 其它因素第19页
        1.5 小麦赤霉病防治第19-21页
            1.5.1 农业防治第19页
            1.5.2 化学防治第19-20页
            1.5.3 生物防治第20-21页
            1.5.4 抗性育种第21页
            1.5.5 抗菌性的转基因技术第21页
            1.5.6 展望第21页
        1.6 小麦赤霉病的分布第21-23页
    2 二氢吡啶二羧酸合成酶的研究进展第23-25页
    3 细胞色素P450研究进展第25-26页
    4 本论文的研究目的和意义第26-29页
第二章 亚洲镰孢菌FaDHDPS1生物学功能研究第29-47页
    1 材料与方法第30-34页
        1.1 菌株第30-31页
        1.2 培养基第31页
        1.3 DNA和RNA的提取第31页
        1.4 亚洲镰孢菌FaDHDPS1基因的序列分析第31页
        1.5 RT-PCR进行基因表达量测定第31页
        1.6 GFP标签融合蛋白载体构建第31页
        1.7 FaDHDPS1基因的敲除第31-33页
            1.7.1 敲除载体的构建第31-32页
            1.7.2 同源置换法敲除FaDHDPS1第32页
            1.7.3 突变体的验证第32-33页
        1.8 FaDHDPS1基因敲除突变体表型测定第33-34页
            1.8.1 突变体对药剂的敏感性测定第33页
            1.8.2 菌落生长速率和产孢能力测定第33页
            1.8.3 对外界胁迫因子的敏感性测定第33-34页
            1.8.4 致病力测定第34页
            1.8.5 突变体产DON能力测定以及对毒素合成基因表达的影响第34页
            1.8.6 FaDHDPS1的基因定位第34页
    2 结果与分析第34-44页
        2.1 亚洲镰孢菌中FaDHDPS1基因的鉴定与序列分析年第34-36页
        2.2 亚洲镰孢菌FaDHDPS1基因敲除突变体的生物学特征第36-44页
            2.2.1 FaDHDPS1基因敲除突变体的获得第36-37页
            2.2.2 FaDHDPS1基因敲出突变体对主流杀菌剂的敏感性第37页
            2.2.3 FaDHDPS1的缺失对渗透压的敏感性第37-38页
            2.2.4 FaDHDPS1基因对生长速率的影响第38-40页
            2.2.5 FaDHDPS1对低温胁迫的敏感性第40页
            2.2.6 FaDHDPS1基因影响亚洲镰孢菌致病力第40-41页
            2.2.7 FaDHDPS1对亚洲镰孢菌产毒能力的影响第41-42页
            2.2.8 FaDHDPS1对毒素相关基因表达量的调控作用第42-43页
            2.2.9 FaDHDPS1降低亚洲镰孢菌的穿透能力第43页
            2.2.10 FaDHDPS1基因在细胞内的定位第43-44页
    3 讨论第44-47页
第三章 亚洲镰孢菌豌豆素脱甲基酶基因FaPDA1和FaPDA2功能研究第47-63页
    1 材料与方法第48-52页
        1.1 菌株第48-49页
        1.2 培养基第49页
        1.3 DNA和RNA的提取第49页
        1.4 亚洲镰孢菌FaPDA1和FaPDA2基因的序列分析第49页
        1.5 RT-PCR进行基因表达量测定第49页
        1.6 FaPDA1和FaPDA2基因的敲除及回复第49-51页
            1.6.1 敲除载体的构建第50页
            1.6.2 基于同源置换法的FaPDA1和FaPDA2基因的敲除与回复第50页
            1.6.3 突变体的验证第50-51页
        1.7 FaPDA1和FaPDA2基因敲除与回复突变体的表型测定第51-52页
            1.7.1 突变体对多种杀菌剂的敏感性测定第51页
            1.7.2 菌落生长速率测定第51页
            1.7.3 对外界胁迫因子敏感性测定第51页
            1.7.4 致病力测定第51-52页
            1.7.5 突变体产DON能力测定及对毒素合成基因表达影响第52页
    2 结果与分析第52-60页
        2.1 亚洲镰孢菌中FaPDA1和FaPDA2基因的鉴定与序列分析第52-55页
        2.2 亚洲镰孢菌和基因敲除突变体的生物学特征第55-60页
            2.2.1 FaPDA1和FaPDA2基因敲除突变体的获得第55-56页
            2.2.2 FaPDA1和FaPDA2基因敲出突变体对主流杀菌剂的敏感性第56页
            2.2.3 FaPDA1和FaPDA2缺失和回复突变体的线性生长及生长量第56-57页
            2.2.4 FaPDA1和FaPDA2基因的缺失对渗透压的敏感性第57页
            2.2.5 FaPDA1和FaPDA2基因突变体的致病力显著降低第57-58页
            2.2.6 FaPDA1和FaPDA2基因对亚洲镰孢菌产毒能力的调控作用第58-60页
            2.2.7 FaPDA1和FaPDA1突变体降低亚洲镰孢菌的穿透能力第60页
    3 讨论第60-63页
全文小结第63-65页
参考文献第65-73页
附录第73-81页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第81-83页
致谢第83页

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