四种海参微卫星标记的开发及其特征分析
| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第1章 引言 | 第13-24页 |
| 1.1 微卫星分子标记概述 | 第13-17页 |
| 1.1.1 微卫星简介 | 第13-14页 |
| 1.1.2 微卫星分子标记技术 | 第14-17页 |
| 1.1.3 微卫星分子标记技术在水产动物中的应用 | 第17页 |
| 1.2 四种海参及其研究进展 | 第17-22页 |
| 1.2.1 四种海参生物学特性 | 第17-20页 |
| 1.2.2 四种海参国内外研究进展 | 第20-22页 |
| 1.3 本研究目的与意义 | 第22-24页 |
| 第2章 材料与方法 | 第24-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-30页 |
| 2.1.1 样品采集 | 第24页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.1.3 药品与试剂 | 第25页 |
| 2.1.4 自配溶液及培养基 | 第25-29页 |
| 2.1.5 接头、探针、引物 | 第29-30页 |
| 2.2 技术路线 | 第30-31页 |
| 2.3 实验方法 | 第31-38页 |
| 2.3.1 提取总基因组DNA | 第31-32页 |
| 2.3.2 构建微卫星富集文库 | 第32-35页 |
| 2.3.3 阳性单克隆筛选、测序 | 第35-36页 |
| 2.3.4 引物设计 | 第36页 |
| 2.3.5 多态性微卫星引物的筛选 | 第36-37页 |
| 2.3.6 数据统计与分析 | 第37-38页 |
| 第3章 结果与分析 | 第38-64页 |
| 3.1 基因组的抽提结果 | 第38-39页 |
| 3.2 基因组的酶切结果 | 第39-41页 |
| 3.3 目的片段PCR结果 | 第41页 |
| 3.4 阳性克隆检测结果 | 第41-43页 |
| 3.5 测序结果及引物设计 | 第43-54页 |
| 3.5.1 仿刺参测序结果及引物设计 | 第43-46页 |
| 3.5.2 糙刺参测序结果及引物设计 | 第46-48页 |
| 3.5.3 糙海参测序结果及引物设计 | 第48-51页 |
| 3.5.4 玉足海参测序结果及引物设计 | 第51-54页 |
| 3.6 多态性位点引物筛选 | 第54-58页 |
| 3.7 微卫星多态性位点的数据统计 | 第58-61页 |
| 3.8 四种海参的野生群体遗传多样性分析 | 第61-64页 |
| 第4章 讨论 | 第64-69页 |
| 4.1 海参基因组DNA提取方法的分析与探讨 | 第64-65页 |
| 4.1.1 样品的保存 | 第64页 |
| 4.1.2 海参取样组织 | 第64页 |
| 4.1.3 无损伤取样 | 第64-65页 |
| 4.2 微卫星富集文库的构建效率 | 第65-67页 |
| 4.2.1 限制性内切酶的酶切反应 | 第65-66页 |
| 4.2.2 接头连接 | 第66页 |
| 4.2.3 探针种类的选择 | 第66页 |
| 4.2.4 磁珠富集的控制条件及影响因素 | 第66-67页 |
| 4.3 微卫星精致产物的PCR扩增 | 第67页 |
| 4.4 微卫星位点的多态性 | 第67-68页 |
| 4.5 PAGE电泳 | 第68-69页 |
| 第5章 结论与展望 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第79页 |
