摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
第一章 前言 | 第12-25页 |
1.1 β-葡聚糖酶简介 | 第12-16页 |
1.1.1 β-葡聚糖酶的类型 | 第12-13页 |
1.1.2 β-葡聚糖酶的来源及酶学活性 | 第13页 |
1.1.3 β-葡聚糖酶的结构 | 第13-14页 |
1.1.4 β-葡聚糖酶的应用 | 第14-16页 |
1.1.4.1 β-葡聚糖酶在制糖工业的应用 | 第14页 |
1.1.4.2 β-葡聚糖酶在植物防病害中的应用 | 第14页 |
1.1.4.3 β-葡聚糖酶在发酵工业中应用 | 第14-15页 |
1.1.4.3.1 β-葡聚糖酶在啤酒糖化工艺中的应用 | 第15页 |
1.1.4.3.2 β-葡聚糖酶在啤酒麦芽生产中的应用 | 第15页 |
1.1.4.4 β-葡聚糖酶在饲料工业中的应用 | 第15-16页 |
1.1.4.4.1 β-葡聚糖酶在猪饲料中的应用 | 第15页 |
1.1.4.4.2 β-葡聚糖酶在家禽饲料中的应用 | 第15页 |
1.1.4.4.3 β-葡聚糖酶在鱼类饲料中的应用 | 第15-16页 |
1.1.4.5 β-葡聚糖酶在其他方面的应用 | 第16页 |
1.2 饲用酶制剂简介 | 第16-18页 |
1.2.1 饲用酶制剂的类型 | 第16页 |
1.2.2 饲用酶制剂活力测定的影响因素 | 第16-17页 |
1.2.2.1 底物性质对饲用酶活力测定的影响 | 第16-17页 |
1.2.2.2 反应体系的离子强度对饲用酶制剂活力测定的影响 | 第17页 |
1.2.2.3 饲料样品中的提取对饲用酶制剂活力测定的影响 | 第17页 |
1.2.2.4 碳水化合物对饲用酶制剂活力测定的影响 | 第17页 |
1.2.3 开发应用饲用酶制剂的意义 | 第17-18页 |
1.3 β-葡聚糖酶活力测定方法的研究 | 第18-24页 |
1.3.1 粘度法 | 第18页 |
1.3.2 琼脂糖扩散法 | 第18-19页 |
1.3.3 生色底物法 | 第19页 |
1.3.4 酶联吸附分析法 | 第19页 |
1.3.5 还原端基法 | 第19-22页 |
1.3.5.1 方法概述 | 第20-22页 |
1.3.5.1.1 DNS法 | 第20页 |
1.3.5.1.2 Somogyi-Nelson5法(S-N5法) | 第20-21页 |
1.3.5.1.3 PAHBAH法 | 第21页 |
1.3.5.1.4 BCA去 | 第21页 |
1.3.5.1.5 MBTH法 | 第21-22页 |
1.3.5.2 测定手段 | 第22页 |
1.3.5.2.1 试管法 | 第22页 |
1.3.5.2.2 灌法 | 第22页 |
1.3.5.2.3 微孔板法 | 第22页 |
1.3.5.2.4 流动注射法(Flow-injection Analysis,FIA) | 第22页 |
1.3.6 其他可能用于β-葡聚糖酶活力测定的方法 | 第22-23页 |
1.3.6.1 安培法 | 第23页 |
1.3.6.2 等温滴定量热法(Isothermal Titration Calorimetry) | 第23页 |
1.3.7 结论 | 第23-24页 |
1.4 研究的目的和意义 | 第24-25页 |
第二章 MBTH法测定β-葡聚糖酶活力的研究 | 第25-39页 |
2.1 材料与方法 | 第25-27页 |
2.1.1 材料与试剂 | 第25页 |
2.1.2 仪器与设备 | 第25-26页 |
2.1.3 试验方法 | 第26-27页 |
2.2 结果与讨论 | 第27-38页 |
2.2.1 MBTH法测定参数的优化 | 第28-34页 |
2.2.1.1 测定还原糖条件优化 | 第28-30页 |
2.2.1.1.1 加热时间的确定 | 第28-29页 |
2.2.1.1.2 模拟酶解反应葡萄糖标准曲线的绘制 | 第29-30页 |
2.2.1.2 酶解液测定条件的优化 | 第30-34页 |
2.2.1.2.1 不同pH对酶活力的影响 | 第30-31页 |
2.2.1.2.2 不同反应温度对反应速率的影响 | 第31页 |
2.2.1.2.3 底物浓度的影响及Km值的计算 | 第31-34页 |
2.2.2 β-葡聚糖酶浓度曲线的建立及初步方法验证 | 第34-38页 |
2.2.2.1 β-葡聚糖酶浓度曲线的建立 | 第34-36页 |
2.2.2.2 加标回收率及精密度的测定 | 第36-37页 |
2.2.2.3 检测限的测定 | 第37-38页 |
2.3 小结 | 第38-39页 |
第三章 三种测定β-葡聚糖酶活力的方法比较 | 第39-55页 |
3.1 材料与方法 | 第40-42页 |
3.1.1 材料与试剂 | 第40页 |
3.1.2 仪器与设备 | 第40页 |
3.1.3 试验方法 | 第40-42页 |
3.2 结果与讨论 | 第42-54页 |
3.2.1 三种方法的模拟酶解反应的葡萄糖标准曲线 | 第43-47页 |
3.2.1.1 MBTH法与经典DNS法、S-N法的比较 | 第43-45页 |
3.2.1.2 测定木聚糖酶活力的国标DNS法测定葡萄糖与经典DNS法的比较 | 第45-47页 |
3.2.2 三种方法的酶浓度标准曲线 | 第47-53页 |
3.2.2.1 DNS法测定β-葡聚糖酶活力 | 第47-49页 |
3.2.2.1.1 加碱终止酶催化反应的DNS法 | 第47-48页 |
3.2.2.1.2 参照木聚糖酶活力测定的国标法测定β-葡聚糖酶浓度曲线 | 第48-49页 |
3.2.2.2 S-N法 | 第49-51页 |
3.2.2.3 MBTH法 | 第51-53页 |
3.2.3 回收率及精密度的比较 | 第53页 |
3.2.4 检测限的比较 | 第53-54页 |
3.3 小结 | 第54-55页 |
第四章 基质中β-葡聚糖酶活力测定 | 第55-64页 |
4.1 材料与方法 | 第56-58页 |
4.1.1 材料与试剂 | 第56页 |
4.1.2 仪器与设备 | 第56页 |
4.1.3 试验方法 | 第56-58页 |
4.2 结果与讨论 | 第58-63页 |
4.2.1 不同浸提方法对饲料本身稳定性的影响 | 第58-59页 |
4.2.2 磁力搅拌过程对酶活力测定的影响 | 第59页 |
4.2.3 样品预处理对酶活力测定的影响 | 第59-60页 |
4.2.4 饲料样品的酶活力测定 | 第60-61页 |
4.2.5 饲料中酶浓度曲线的建立 | 第61页 |
4.2.6 批间精密度的计算 | 第61-62页 |
4.2.7 回收率的计算 | 第62-63页 |
4.3 结论 | 第63-64页 |
第五章 高通量分析法测定β-葡聚糖酶活力 | 第64-77页 |
5.1 材料与方法 | 第64-67页 |
5.1.1 材料与试剂 | 第64页 |
5.1.2 仪器与设备 | 第64页 |
5.1.3 溶液配制 | 第64-65页 |
5.1.4 试验方法 | 第65-67页 |
5.2 结果与讨论 | 第67-75页 |
5.2.1 不同混匀方法的比较 | 第67-68页 |
5.2.2 葡萄糖标准曲线的测定 | 第68-69页 |
5.2.3 β-葡聚糖酶浓度曲线的建立 | 第69-70页 |
5.2.4 方法验证 | 第70-72页 |
5.2.4.1 检测限及定量限的计算 | 第70-71页 |
5.2.4.2 回收率的测定 | 第71-72页 |
5.2.5 高通量分析法在饲料样品测定中的应用 | 第72-75页 |
5.2.5.1 A样品酶活力测定 | 第72-73页 |
5.2.5.2 饲料中β-葡聚糖酶浓度曲线的建立 | 第73-74页 |
5.2.5.3 初步的方法验证的研究 | 第74-75页 |
5.2.5.3.1 检测限及定量限的计算 | 第74-75页 |
5.2.5.3.2 回收率的计算 | 第75页 |
5.3 小结 | 第75-77页 |
结论 | 第77-78页 |
本文创新点 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
攻读学位期间发表的学术论文和申请的专利 | 第88-89页 |