中文摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
第一章 前言 | 第9-25页 |
1.1 ATP依赖性蛋白酶 | 第12-22页 |
1.1.1 Clp蛋白酶家族 | 第14-17页 |
1.1.2 Lon蛋白酶 | 第17页 |
1.1.3 FtsH蛋白酶 | 第17-22页 |
1.2 其它蛋白酶 | 第22-23页 |
1.3 研究目的与意义 | 第23-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-44页 |
2.1 实验材料 | 第25页 |
2.1.1 植物材料和生长环境 | 第25页 |
2.1.2 菌种 | 第25页 |
2.1.3 载体 | 第25页 |
2.1.4 酶和生化试剂 | 第25页 |
2.1.5 测序及引物合成 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-44页 |
2.2.1 拟南芥的栽培,侵染以及阳性苗筛选 | 第25-27页 |
2.2.2 拟南芥DNA提取 | 第27-28页 |
2.2.3 FtsH12表达模式分析 | 第28-30页 |
2.2.4 FtsH12多克隆抗体制备 | 第30-34页 |
2.2.4.1 FtsH12原核表达载体构建 | 第30-32页 |
2.2.4.2 重组载体pfer28a(+)/ftshl2 在E.coli DE3 .中的表达 | 第32页 |
2.2.4.3 靶蛋白的大量表达 | 第32-33页 |
2.2.4.4 靶蛋白的纯化 | 第33-34页 |
2.2.4.5 靶蛋白抗体制备 | 第34页 |
2.2.5 FtsH12类囊体膜定位 | 第34-39页 |
2.2.6 蔗糖密度梯度离心 | 第39页 |
2.2.7 RNAi沉默ftsh12表达 | 第39-42页 |
2.2.8 透射电镜观察 | 第42-44页 |
第三章 结果与分析 | 第44-54页 |
3.1 FTSH突变体的鉴定 | 第44-45页 |
3.2 FTSH12基因及蛋白结构 | 第45页 |
3.3 FTSH12的敲除对类囊体膜形成的影响 | 第45-46页 |
3.4 AT1G79560表达模式分析 | 第46-48页 |
3.5 FTSH12蛋白膜定位分析 | 第48页 |
3.6 FTSH12复合体定位 | 第48-50页 |
3.6.1 FtsH12蓝绿温和胶定位 | 第48-49页 |
3.6.2 蔗糖密度梯度离心 | 第49-50页 |
3.7 RNAI分析FTSH12功能 | 第50-54页 |
第四章 讨论 | 第54-57页 |
有待探讨的问题 | 第56-57页 |
结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
攻读硕士期间发表论文 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
附录 | 第68-74页 |