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拟南芥FtsH12蛋白酶调控叶绿体发育功能研究

中文摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
第一章 前言第9-25页
    1.1 ATP依赖性蛋白酶第12-22页
        1.1.1 Clp蛋白酶家族第14-17页
        1.1.2 Lon蛋白酶第17页
        1.1.3 FtsH蛋白酶第17-22页
    1.2 其它蛋白酶第22-23页
    1.3 研究目的与意义第23-25页
第二章 材料与方法第25-44页
    2.1 实验材料第25页
        2.1.1 植物材料和生长环境第25页
        2.1.2 菌种第25页
        2.1.3 载体第25页
        2.1.4 酶和生化试剂第25页
        2.1.5 测序及引物合成第25页
    2.2 实验方法第25-44页
        2.2.1 拟南芥的栽培,侵染以及阳性苗筛选第25-27页
        2.2.2 拟南芥DNA提取第27-28页
        2.2.3 FtsH12表达模式分析第28-30页
        2.2.4 FtsH12多克隆抗体制备第30-34页
            2.2.4.1 FtsH12原核表达载体构建第30-32页
            2.2.4.2 重组载体pfer28a(+)/ftshl2 在E.coli DE3 .中的表达第32页
            2.2.4.3 靶蛋白的大量表达第32-33页
            2.2.4.4 靶蛋白的纯化第33-34页
            2.2.4.5 靶蛋白抗体制备第34页
        2.2.5 FtsH12类囊体膜定位第34-39页
        2.2.6 蔗糖密度梯度离心第39页
        2.2.7 RNAi沉默ftsh12表达第39-42页
        2.2.8 透射电镜观察第42-44页
第三章 结果与分析第44-54页
    3.1 FTSH突变体的鉴定第44-45页
    3.2 FTSH12基因及蛋白结构第45页
    3.3 FTSH12的敲除对类囊体膜形成的影响第45-46页
    3.4 AT1G79560表达模式分析第46-48页
    3.5 FTSH12蛋白膜定位分析第48页
    3.6 FTSH12复合体定位第48-50页
        3.6.1 FtsH12蓝绿温和胶定位第48-49页
        3.6.2 蔗糖密度梯度离心第49-50页
    3.7 RNAI分析FTSH12功能第50-54页
第四章 讨论第54-57页
    有待探讨的问题第56-57页
结论第57-58页
参考文献第58-66页
攻读硕士期间发表论文第66-67页
致谢第67-68页
附录第68-74页

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