摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第9-11页 |
文献综述 | 第11-20页 |
1 禽流感概况 | 第11-14页 |
1.1 禽流感的历史 | 第11页 |
1.2 禽流感在我国流行情况 | 第11-12页 |
1.3 N6亚型禽流感在我国流行情况 | 第12-14页 |
2 禽流感病毒概况 | 第14-16页 |
2.1 禽流感病毒的分类 | 第14页 |
2.2 禽流感病毒的形态和结构 | 第14-15页 |
2.3 禽流感病毒编码的蛋白及其功能 | 第15-16页 |
3 神经氨酸酶概况 | 第16-20页 |
3.1 神经氨酸酶的结构 | 第16页 |
3.2 神经氨酸酶的分子生物学功能 | 第16-18页 |
3.3 神经氨酸酶的研究进展 | 第18-20页 |
实验研究 | 第20-47页 |
1 材料 | 第20-22页 |
1.1 实验材料 | 第20页 |
1.2 实验菌株及实验动物 | 第20-21页 |
1.3 主要试剂 | 第21页 |
1.4 主要仪器 | 第21-22页 |
2 方法 | 第22-33页 |
2.1 禽流感N6亚型基因克隆及序列分析 | 第22-28页 |
2.1.1 引物设计 | 第22-23页 |
2.1.2 目的基因的扩增 | 第23-24页 |
2.1.3 目的基因克隆和测序 | 第24-26页 |
2.1.4 目的基因序列分析 | 第26-28页 |
2.2 禽流感N6亚型基因的原核表达与多克隆抗体制备 | 第28-32页 |
2.2.1 原核表达重组质粒的构建 | 第28-29页 |
2.2.2 NA基因的原核表达、纯化及鉴定 | 第29-31页 |
2.2.3 抗N6多克隆抗体的制备 | 第31-32页 |
2.3 禽流感N6亚型抗体检测 | 第32-33页 |
2.3.1 禽流感N6亚型抗体检测方法建立 | 第32-33页 |
2.3.2 血清样本检测 | 第33页 |
3 结果 | 第33-41页 |
3.1 目的基因PCR扩增结果 | 第33页 |
3.2 目的基因克隆和鉴定结果 | 第33-35页 |
3.3 目的基因生物信息学分析结果 | 第35-37页 |
3.3.1 AIV贵州株N6基因同源性分析 | 第35页 |
3.3.2 AIV贵州株N6基因遗传进化分析 | 第35页 |
3.3.3 AIV贵州株N6基因编码蛋白变异分析结果 | 第35-37页 |
3.4 原核表达质粒PCR鉴定及酶切鉴定结果 | 第37-38页 |
3.5 重组蛋白质表达、纯化与鉴定结果 | 第38页 |
3.6 抗N6多克隆抗体的制备结果 | 第38-39页 |
3.6.1 兔源多克隆抗体的制备结果 | 第38页 |
3.6.2 抗N6多克隆抗体Westernblotting鉴定结果 | 第38-39页 |
3.7 禽流感N6亚型抗体检测结果 | 第39-41页 |
3.7.1 禽流感N6亚型抗体检测方法建立结果 | 第39-41页 |
4 讨论 | 第41-47页 |
4.1 关于禽流感N6亚型基因克隆及序列分析 | 第41-42页 |
4.2 关于禽流感N6亚型基因的原核表达 | 第42-44页 |
4.3 关于重组NA蛋白的应用研究 | 第44-45页 |
4.4 关于多克隆抗体的制备 | 第45-46页 |
4.5 关于N6亚型禽流感抗体检测 | 第46-47页 |
全文结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
附录一 发表文章 | 第52-53页 |
附录二 溶液及试剂的配制 | 第53-55页 |
致谢 | 第55-56页 |