| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略语 | 第11-15页 |
| 第一部分 ：盐酸益母草碱治疗原发性骨质疏松症动物模型的体内研究 | 第15-32页 |
| 1 前言 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-22页 |
| 2.1 实验材料 | 第16页 |
| 2.2 伦理 | 第16页 |
| 2.3 主要实验试剂 | 第16页 |
| 2.4 主要仪器 | 第16-17页 |
| 2.5 主要实验步骤与方法 | 第17-21页 |
| 2.5.1 实验动物的饲养 | 第17页 |
| 2.5.2 原发性骨质疏松动物模型的建立与取材 | 第17页 |
| 2.5.3 HE染色 | 第17-18页 |
| 2.5.4 石蜡切片免疫组化染色及统计方法 | 第18-19页 |
| 2.5.5 酶联免疫吸附测定血清骨钙素含量 | 第19-20页 |
| 2.5.6 血清碱性磷酸酶浓度测定 | 第20-21页 |
| 2.5.7 骨密度测定 | 第21页 |
| 2.5.8 micro-CT的测定 | 第21页 |
| 2.6 统计学分析 | 第21-22页 |
| 3 结果 | 第22-29页 |
| 3.1 原发性骨质疏松小鼠模型建立 | 第22页 |
| 3.2 HE染色 | 第22-23页 |
| 3.3 免疫组化表达结果 | 第23-25页 |
| 3.3.1 β-catenin蛋白免疫组化免疫结果 | 第23-24页 |
| 3.3.2 Runx2蛋白免疫组化结果 | 第24-25页 |
| 3.4 血清骨钙素和碱性磷酸酶的浓度测定 | 第25页 |
| 3.5 骨密度的测定 | 第25-27页 |
| 3.6 Micro-CT检测骨微结构结果 | 第27-29页 |
| 讨论 | 第29-31页 |
| 结论 | 第31-32页 |
| 第二部分 ：盐酸益母草碱通过Wnt/β-catenin通路促进小鼠MC3T3-E1细胞分化相关机制研究 | 第32-52页 |
| 1 前言 | 第32-33页 |
| 2 实验材料与方法 | 第33-42页 |
| 2.1 主要实验材料 | 第33页 |
| 2.2 主要实验试剂 | 第33-34页 |
| 2.3 主要仪器 | 第34页 |
| 2.4 主要实验方法 | 第34-42页 |
| 2.4.1 细胞培养和条件 | 第34-35页 |
| 2.4.2 细胞冻存 | 第35页 |
| 2.4.3 CCK8检测盐酸益母草碱对MC3T3-E1细胞系增殖活动影响 | 第35-36页 |
| 2.4.4 碱性磷酸酶染色检测MC3T3-E1细胞系的分化活动 | 第36页 |
| 2.4.5 茜素红染色检测MC3T3-E1细胞系的钙化情况 | 第36页 |
| 2.4.6 MC3T3-E1细胞系碱性磷酸酶浓度的测定 | 第36-37页 |
| 2.4.7 WesternBlot法检测相关蛋白的表达 | 第37-40页 |
| 2.4.8 细胞总RNA的提取 | 第40-41页 |
| 2.4.9 实时荧光定量PCR法 | 第41-42页 |
| 3 结果 | 第42-49页 |
| 3.1 小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1体外培养 | 第42-43页 |
| 3.2 CCK8检测盐酸益母草碱对MC3T3-E1细胞系的增殖活动影响 | 第43页 |
| 3.3 碱性磷酸酶染色检测MC3T3-E1细胞系的分化活动 | 第43-45页 |
| 3.4 茜素红染色检测MC3T3-E1细胞系钙化程度 | 第45-46页 |
| 3.5 不同浓度盐酸益母草碱干预后MC3T3-E1碱性磷酸酶表达情况 | 第46页 |
| 3.6 Real-time PCR检测MC3T3-E1相关基因的mRNA表达 | 第46-48页 |
| 3.6.1 Real-time PCR检测MC3T3-E1相关Wnt/β-catenin基因表达 | 第46-47页 |
| 3.6.2 Real-time PCR检测MC3T3-E1相关成骨分化与成熟基因表达 | 第47-48页 |
| 3.7 检测相关Wnt/β-catenin通路与成骨分化蛋白的表达 | 第48-49页 |
| 讨论 | 第49-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 综述 | 第60-72页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 个人简历 | 第74页 |
