| 摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 英文缩略语 | 第13-19页 |
| 第一部分 油酸诱导hADSCs的成脂 | 第19-33页 |
| 1 前言 | 第19-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-26页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 研究对象 | 第22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.3.1 hADSCs的分离和原代培养 | 第22页 |
| 2.3.2 细胞传代 | 第22-23页 |
| 2.3.3 细胞冻存与复苏 | 第23页 |
| 2.3.4 hADSCs的鉴定 | 第23-24页 |
| 2.3.5 油酸替代IBMX诱导hADSCs的脂肪分化 | 第24-25页 |
| 2.3.6 统计学方法 | 第25-26页 |
| 3 结果 | 第26-31页 |
| 3.1 hADSCs的形态观察 | 第26页 |
| 3.2 hADSCs的鉴定 | 第26-29页 |
| 3.2.1 免疫荧光染色检测细胞的表面抗原 | 第27页 |
| 3.2.2 hADSCs的成脂诱导 | 第27-28页 |
| 3.2.3 hADSCs向神经细胞诱导 | 第28-29页 |
| 3.3 三种浓度油酸诱导hADSCs成脂的检测 | 第29-31页 |
| 4 讨论 | 第31-32页 |
| 5 结论 | 第32-33页 |
| 第二部分 p62缺失可通过增强自噬促进hADSCs成脂 | 第33-51页 |
| 1 前言 | 第33-35页 |
| 2 材料和方法 | 第35-40页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第35-36页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第35页 |
| 2.1.2 针对p62的shRNA合成 | 第35页 |
| 2.1.3 RT-qPCR引物 | 第35-36页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-40页 |
| 2.2.1 慢病毒shp62的构建 | 第36页 |
| 2.2.2 慢病毒介导的shp62转染hADSCs并检测沉默效果 | 第36-38页 |
| 2.2.3 shp62对hADSCs自我复制能力的影响 | 第38-39页 |
| 2.2.4 shp62对hADSCs成脂的影响 | 第39页 |
| 2.2.5 hADSCs成脂过程中自噬的活性变化以及10mM3-MA抑制自噬对hADSCs成脂能力的影响 | 第39页 |
| 2.2.6 shp62对hADSCs成脂中自噬活性的影响 | 第39-40页 |
| 2.2.7 统计学分析 | 第40页 |
| 3 结果 | 第40-48页 |
| 3.1 重组shp62慢病毒转染hADSCs对p62的沉默效果 | 第40页 |
| 3.2 转染shp62可降低hADSCs的自我复制能力 | 第40-41页 |
| 3.3 转染shp62增加了hADSCs的成脂能力 | 第41-43页 |
| 3.4 3-MA在成脂不同阶段抑制自噬对hADSCs成脂的影响 | 第43-45页 |
| 3.5 shp62可通过促进自噬而增加hADSCs的成脂 | 第45-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 第三部分 p62缺失可通过增强线粒体自噬促进hADSCs成脂 | 第51-63页 |
| 1 前言 | 第51-53页 |
| 2 材料和方法 | 第53-56页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第53-54页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第53页 |
| 2.1.2 qPCR引物 | 第53页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第53-54页 |
| 2.2 实验方法 | 第54-56页 |
| 2.2.1 hADSCs成脂过程中线粒体数量的检测 | 第54-55页 |
| 2.2.2 hADSCs的成脂过程中线粒体分裂与融合状态的检测 | 第55页 |
| 2.2.3 线粒体自噬在shp62hADSCs成脂中的作用 | 第55-56页 |
| 2.2.4 抑制线粒体自噬后对shp62hADSCs成脂的影响 | 第56页 |
| 2.2.5 统计学方法 | 第56页 |
| 3 结果 | 第56-61页 |
| 3.1 hADSCs成脂后线粒体数量增加 | 第56-57页 |
| 3.2 hADSCs成脂早期线粒体分裂蛋白表达增加 | 第57-58页 |
| 3.3 线粒体自噬在p62缺失促进hADSCs成脂中的作用 | 第58-61页 |
| 3.3.1 p62缺失可增加hADSCs成脂中线粒体自噬 | 第58-60页 |
| 3.3.2 p62缺失可通过增加线粒体自噬而促进hADSCs成脂 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 综述 | 第72-84页 |
| 参考文献 | 第76-84页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 个人简历 | 第86页 |
