| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第8-21页 |
| 1.1 课题背景及意义 | 第8-9页 |
| 1.2 基因编辑技术 | 第9-11页 |
| 1.3 CRISPR/Cas系统介绍 | 第11-12页 |
| 1.4 CRISPR/Cas9及Anti-CRISPR蛋白 | 第12-13页 |
| 1.5 CRISPR/Cpf1系统 | 第13-16页 |
| 1.6 CRISPR/Cpf1的结构生物学研究 | 第16-17页 |
| 1.7 CRISPR/Cas系统的应用 | 第17-19页 |
| 1.8 主要研究内容 | 第19-20页 |
| 1.8.1 LbCpf1蛋白的表达与纯化 | 第19页 |
| 1.8.2 LbCpf1蛋白小分子抑制剂的筛选 | 第19页 |
| 1.8.3 小分子抑制剂对LbCpf1与crRNA及DNA结合的影响 | 第19-20页 |
| 1.8.4 晶体的筛选与优化 | 第20页 |
| 1.9 技术路线 | 第20-21页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第21-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 LbCpf1蛋白表达纯化材料及试剂 | 第21页 |
| 2.1.2 T7RNA聚合酶纯化材料及试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 体外转录及酶切实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.4 实验所需仪器 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-35页 |
| 2.2.1 LbCpf1蛋白的表达与纯化 | 第22-29页 |
| 2.2.2 T7RNA聚合酶的纯化 | 第29-30页 |
| 2.2.3 crRNA的体外转录与底物DNA的获得 | 第30-32页 |
| 2.2.4 LbCpf1蛋白小分子抑制剂的筛选 | 第32-33页 |
| 2.2.5 小分子抑制剂对LbCpf1与crRNA及DNA结合的影响 | 第33-34页 |
| 2.2.6 晶体的筛选与优化 | 第34-35页 |
| 第3章 LbCpf1蛋白的纯化与crRNA体外转录 | 第35-42页 |
| 3.1 LbCpf1蛋白的表达与纯化 | 第35-39页 |
| 3.2 T7RNA聚合酶的纯化 | 第39-40页 |
| 3.3 crRNA的体外转录与底物DNA的获得 | 第40-41页 |
| 3.4 本章小结 | 第41-42页 |
| 第4章 小分子抑制剂的筛选与复合物的结晶 | 第42-48页 |
| 4.1 LbCpf1蛋白小分子抑制剂的筛选 | 第42-43页 |
| 4.2 小分子抑制剂对LbCpf1与crRNA及DNA结合的影响 | 第43-45页 |
| 4.3 晶体的筛选与优化 | 第45-47页 |
| 4.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
