摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 绪论 | 第9-21页 |
1.1 棕榈酸与Sln和sAnk1的国内外研究现状 | 第9-12页 |
1.1.1 棕榈酸 | 第9-10页 |
1.1.2 Sln和sAnk1基因与SERCA的关系 | 第10-12页 |
1.1.3 棕榈酸与Sln和sAnk1的关系 | 第12页 |
1.2 UPR反应的国内外研究现状 | 第12-17页 |
1.2.1 PERK信号通路 | 第15页 |
1.2.2 IRE1信号通路 | 第15-16页 |
1.2.3 ATF6信号通路 | 第16-17页 |
1.3 CRISPR/Cas9基因编辑技术 | 第17-19页 |
1.3.1 CRISPR/Cas9技术简介 | 第17页 |
1.3.2 CRISPR/Cas9技术的应用 | 第17-19页 |
1.4 研究意义和主要研究内容 | 第19-21页 |
1.4.1 本论文研究意义 | 第19页 |
1.4.2 本论文的主要研究内容 | 第19-20页 |
1.4.3 技术路线 | 第20-21页 |
第2章 实验材料与方法 | 第21-35页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 实验材料 | 第21页 |
2.1.2 实验试剂与试剂盒 | 第21-22页 |
2.1.3 实验仪器 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-35页 |
2.2.1 细胞培养 | 第22-24页 |
2.2.2 质粒提取及纯化 | 第24-25页 |
2.2.3 细胞转染 | 第25-26页 |
2.2.4 核酸的提取 | 第26-27页 |
2.2.5 反转录实验 | 第27-28页 |
2.2.6 实时定量PCR | 第28-29页 |
2.2.7 Western Blotting | 第29-32页 |
2.2.8 Cas9敲除载体的构建、转化和阳性克隆筛选 | 第32-34页 |
2.2.9 相关试剂的配制方法 | 第34-35页 |
第3章 棕榈酸对Sln和sAnk1基因及UPR通路的影响 | 第35-41页 |
3.1 引言 | 第35页 |
3.2 PA调控Sln与sAnk1基因表达的研究 | 第35-37页 |
3.2.1 分化不同天数Sln和sAnk1基因的表达 | 第35-36页 |
3.2.2 PA对Sln和sAnk1基因的影响 | 第36-37页 |
3.3 PA对UPR通路的影响 | 第37-39页 |
3.4 讨论 | 第39页 |
3.5 本章小结 | 第39-41页 |
第4章 UPR通路对PA影响Sln和sAnk1基因表达的调控 | 第41-56页 |
4.1 引言 | 第41页 |
4.2 PERK通路对PA影响Sln和sAnk1基因表达的调控 | 第41-45页 |
4.2.1 抑制剂GSK对PERK通路的抑制 | 第41-43页 |
4.2.2 PERK通路被成功抑制后Sln和sAnk1基因的表达 | 第43-44页 |
4.2.3 sh-RNA干扰技术对PERK信号通路的阻断 | 第44-45页 |
4.2.4 PERK通路成功干扰后Sln和sAnk1基因的表达 | 第45页 |
4.3 IRE1通路对PA影响Sln和sAnk1基因表达的调控 | 第45-50页 |
4.3.1 抑制剂4μ8C对IRE1通路的抑制 | 第45-47页 |
4.3.2 IRE1通路被成功抑制后Sln和sAnk1基因的表达 | 第47-48页 |
4.3.3 sh-RNA干扰技术对IRE1信号通路的阻断 | 第48-49页 |
4.3.4 IRE1通路成功干扰后Sln和sAnk1基因的表达 | 第49-50页 |
4.4 ATF6通路对PA影响Sln和sAnk1基因表达的调控 | 第50-54页 |
4.4.1 ATF6单靶点敲除细胞系的建立 | 第50-52页 |
4.4.2 Sln和sAnk1在单靶点Cas9-ATF6敲除细胞系中的表达 | 第52页 |
4.4.3 ATF6双靶点敲除细胞系的建立 | 第52-53页 |
4.4.4 Sln和sAnk1在双靶点Cas9-ATF6敲除细胞系中的表达 | 第53-54页 |
4.5 讨论 | 第54-55页 |
4.6 本章小结 | 第55-56页 |
结论 | 第56-57页 |
展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果 | 第67-69页 |
致谢 | 第69页 |