摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 引言 | 第11-20页 |
1.1 共轭亚油酸 | 第11-12页 |
1.1.1 共轭亚油酸概述 | 第11页 |
1.1.2 共轭亚油酸的生物学功能 | 第11-12页 |
1.2 亚油酸异构酶研究进展 | 第12-15页 |
1.2.1 亚油酸异构酶的来源 | 第12页 |
1.2.2 亚油酸异构酶的分离纯化 | 第12-13页 |
1.2.3 亚油酸异构酶分子生物学研究进展 | 第13-14页 |
1.2.4 植物乳杆菌P-8油酸异构酶的研究进展 | 第14-15页 |
1.3 基因功能的研究方法 | 第15-18页 |
1.3.1 基因转导 | 第15页 |
1.3.2 反义技术 | 第15-16页 |
1.3.3 RNA干涉 | 第16页 |
1.3.4 基因诱捕技术 | 第16页 |
1.3.5 染色体转导 | 第16-17页 |
1.3.6 基因敲除技术 | 第17-18页 |
1.4 乳酸菌的转化方法 | 第18页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
1.6 实验技术路线 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-34页 |
2.1 实验材料 | 第20-24页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第20-22页 |
2.1.2 主要药品与试剂 | 第22页 |
2.1.3 主要仪器 | 第22页 |
2.1.4 培养基 | 第22-23页 |
2.1.5 主要溶液 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-34页 |
2.2.1 同源重组敲除载体的构建 | 第24-32页 |
2.2.2 植物乳杆菌P-8外源质粒电转化条件的研究 | 第32-33页 |
2.2.3 植物乳杆菌P-8外源质粒电转化条件的优化 | 第33-34页 |
2.3 数据处理 | 第34页 |
3 结果与分析 | 第34-48页 |
3.1 同源重组基因敲除载体的构建 | 第34-42页 |
3.1.1 植物乳杆菌P-8基因组DNA的检测 | 第34-35页 |
3.1.2 PCR扩增lai上下游同源臂及kan抗性基因片段 | 第35-37页 |
3.1.3 重组质粒的菌落PCR鉴定 | 第37-38页 |
3.1.4 重组质粒的提取检测 | 第38-39页 |
3.1.5 重组质粒的酶切鉴定 | 第39-41页 |
3.1.6 敲除载体pUC18△lai的鉴定 | 第41-42页 |
3.2 植物乳杆菌P-8电转化条件的研究 | 第42-48页 |
3.2.1 植物乳杆菌P-8生长曲线的测定 | 第42-43页 |
3.2.2 影响植物乳杆菌P-8电转化的因素 | 第43-48页 |
4 讨论 | 第48-49页 |
4.1 同源重组敲除载体的构建 | 第48-49页 |
4.2 植物乳杆菌P-8的电转化条件 | 第49页 |
5 结论 | 第49页 |
6 创新点 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
作者简介 | 第55页 |