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植物乳杆菌P-8 lai同源重组敲除载体的构建及电转化条件的研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
缩略词表第10-11页
1 引言第11-20页
    1.1 共轭亚油酸第11-12页
        1.1.1 共轭亚油酸概述第11页
        1.1.2 共轭亚油酸的生物学功能第11-12页
    1.2 亚油酸异构酶研究进展第12-15页
        1.2.1 亚油酸异构酶的来源第12页
        1.2.2 亚油酸异构酶的分离纯化第12-13页
        1.2.3 亚油酸异构酶分子生物学研究进展第13-14页
        1.2.4 植物乳杆菌P-8油酸异构酶的研究进展第14-15页
    1.3 基因功能的研究方法第15-18页
        1.3.1 基因转导第15页
        1.3.2 反义技术第15-16页
        1.3.3 RNA干涉第16页
        1.3.4 基因诱捕技术第16页
        1.3.5 染色体转导第16-17页
        1.3.6 基因敲除技术第17-18页
    1.4 乳酸菌的转化方法第18页
    1.5 本研究的目的和意义第18-19页
    1.6 实验技术路线第19-20页
2 材料与方法第20-34页
    2.1 实验材料第20-24页
        2.1.1 菌株与质粒第20-22页
        2.1.2 主要药品与试剂第22页
        2.1.3 主要仪器第22页
        2.1.4 培养基第22-23页
        2.1.5 主要溶液第23-24页
    2.2 实验方法第24-34页
        2.2.1 同源重组敲除载体的构建第24-32页
        2.2.2 植物乳杆菌P-8外源质粒电转化条件的研究第32-33页
        2.2.3 植物乳杆菌P-8外源质粒电转化条件的优化第33-34页
    2.3 数据处理第34页
3 结果与分析第34-48页
    3.1 同源重组基因敲除载体的构建第34-42页
        3.1.1 植物乳杆菌P-8基因组DNA的检测第34-35页
        3.1.2 PCR扩增lai上下游同源臂及kan抗性基因片段第35-37页
        3.1.3 重组质粒的菌落PCR鉴定第37-38页
        3.1.4 重组质粒的提取检测第38-39页
        3.1.5 重组质粒的酶切鉴定第39-41页
        3.1.6 敲除载体pUC18△lai的鉴定第41-42页
    3.2 植物乳杆菌P-8电转化条件的研究第42-48页
        3.2.1 植物乳杆菌P-8生长曲线的测定第42-43页
        3.2.2 影响植物乳杆菌P-8电转化的因素第43-48页
4 讨论第48-49页
    4.1 同源重组敲除载体的构建第48-49页
    4.2 植物乳杆菌P-8的电转化条件第49页
5 结论第49页
6 创新点第49-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-55页
作者简介第55页

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