中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
1 引言 | 第14-31页 |
·病原学研究 | 第15-17页 |
·Ⅰ型DHV 的病原学特点 | 第15-16页 |
·Ⅱ型DHV 的病原学特点 | 第16页 |
·Ⅲ型DHV 的病原学特点 | 第16-17页 |
·新型DHV 的病原学特点 | 第17页 |
·分子生物学研究 | 第17-19页 |
·流行病学的研究 | 第19-21页 |
·临床症状及病理特征 | 第21-22页 |
·临床症状 | 第21页 |
·病理特征 | 第21-22页 |
·诊断 | 第22-27页 |
·病毒分离 | 第22页 |
·电镜检测 | 第22-23页 |
·实验室诊断方法 | 第23-27页 |
·血清中和试验(Virus-neutralization test, VN) | 第23-24页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第24-25页 |
·琼脂免疫扩散试验 | 第25页 |
·间接血凝(IHA) | 第25-26页 |
·直接荧光抗体检测(FA) | 第26页 |
·胶体金法(DIGFA) | 第26页 |
·分子生物学诊断技术 | 第26-27页 |
·预防与治疗 | 第27-30页 |
·预防 | 第27-28页 |
·治疗 | 第28-30页 |
·本研究的目的及意义 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-54页 |
·一株新型DHV 的分离及RT-PCR 鉴定 | 第31-39页 |
·载体与毒(菌)株 | 第31页 |
·阳性血清 | 第31页 |
·实验动物 | 第31页 |
·主要试剂 | 第31页 |
·溶液配制 | 第31-32页 |
·主要仪器 | 第32-33页 |
·病毒的分离 | 第33页 |
·细菌分离 | 第33页 |
·血凝试验 | 第33页 |
·ELD50 的测定 | 第33-34页 |
·血清交叉中和试验 | 第34页 |
·动物回归试验 | 第34页 |
·病毒的RT-PCR 鉴定 | 第34-39页 |
·新型鸭肝炎病毒基因组测定与分析 | 第39-45页 |
·载体与毒(菌)株 | 第39页 |
·主要试剂 | 第39页 |
·引物的设计与合成 | 第39页 |
·病毒RNA 的提取 | 第39页 |
·普通RT-PCR 扩增病毒基因组中间区域分段 | 第39-41页 |
·病毒基因组5'末端和3'末端序列的扩增 | 第41-45页 |
·PCR 扩增产物的回收纯化 | 第45页 |
·目的片段与pMD18-T Vector 的连接 | 第45页 |
·重组质粒的转化 | 第45页 |
·重组质粒DNA 的提取及双酶切鉴定测序 | 第45页 |
·新型鸭肝炎病毒VP1基因的克隆表达及其多克隆抗体 的制备 | 第45-54页 |
·载体与毒(菌)株和血清 | 第45-46页 |
·实验动物 | 第46页 |
·主要试剂及仪器 | 第46页 |
·溶液配制 | 第46-47页 |
·引物的设计与合成 | 第47-48页 |
·VP1 基因的扩增 | 第48-49页 |
·VP1 表达载体的构建 | 第49-51页 |
·重组表达质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第51页 |
·SDS-PAGE | 第51-52页 |
·Western-blot 分析 | 第52页 |
·重组蛋白的纯化 | 第52-53页 |
·重组菌表达产物多克隆抗血清的制备与鉴定 | 第53-54页 |
3 结果与分析 | 第54-68页 |
·一株新型DHV 的分离及RT-PCR 鉴定 | 第54-58页 |
·病毒的分离 | 第54页 |
·细菌分离 | 第54页 |
·血凝试验 | 第54页 |
·ELD50 的测定 | 第54-55页 |
·血清交叉中和试验 | 第55页 |
·动物回归试验 | 第55页 |
·RT-PCR 鉴定 | 第55页 |
·序列分析 | 第55-58页 |
·新型鸭肝炎病毒基因组测定与分析 | 第58-64页 |
·PCR 扩增 | 第58页 |
·基因组测序分析 | 第58-60页 |
·进化关系分析 | 第60-64页 |
·新型DHV VP1 基因的克隆表达及其多克隆抗体的制备 | 第64-68页 |
·VP1 基因的PCR 扩增结果 | 第64页 |
·重组质粒的筛选和酶切鉴定 | 第64-65页 |
·重组菌菌体裂解物的凝胶电泳结果 | 第65-66页 |
·重组表达蛋白的纯化与鉴定 | 第66-67页 |
·多克隆抗体的制备及鉴定 | 第67-68页 |
4 讨论 | 第68-71页 |
·一株新型DHV 的分离及RT-PCR 鉴定 | 第68页 |
·新型鸭肝炎病毒基因组测定与分析 | 第68-69页 |
·新型DHV VP1 基因的克隆表达及其多克隆抗体的制备 | 第69-71页 |
5 结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第81页 |