| 符号说明 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-40页 |
| ·口蹄疫研究进展 | 第14-23页 |
| ·口蹄疫概述 | 第14页 |
| ·口蹄疫病毒的血清学 | 第14-15页 |
| ·口蹄疫的流行概况 | 第15页 |
| ·口蹄疫病毒的结构和功能 | 第15-16页 |
| ·口蹄疫病毒结构蛋白VP1 的病原特征 | 第16-17页 |
| ·O 型口蹄疫病毒抗原位点 | 第17页 |
| ·口蹄疫病毒VP1 的抗原位点 | 第17-18页 |
| ·口蹄疫病毒VP1 免疫机制 | 第18-19页 |
| ·口蹄疫病毒VP1 新型疫苗的研究进展 | 第19-23页 |
| ·IL-18 的研究发展 | 第23-31页 |
| ·IL-18 的发现 | 第23页 |
| ·IL-18 的分布与产生 | 第23-25页 |
| ·IL-18 的基因结构和基因表达调控 | 第25页 |
| ·IL-18 的的合成与表达 | 第25-26页 |
| ·IL-18 的生物学作用 | 第26-28页 |
| ·山羊IL-18 的研究进展 | 第28-29页 |
| ·IL-18 的免疫增强作用 | 第29页 |
| ·IL-18 的应用前景 | 第29-31页 |
| ·杆状病毒表达系统研究进展 | 第31-39页 |
| ·杆状病毒的分子生物学 | 第31-34页 |
| ·重组杆状病毒的构建 | 第34-37页 |
| ·杆状病毒表达载体系统的优越性 | 第37-38页 |
| ·杆状病毒表达载体系统在口蹄疫和反刍动物IL-18 中的应用 | 第38-39页 |
| ·研究的目的及意义 | 第39-40页 |
| 2 材料与方法 | 第40-59页 |
| ·材料 | 第40-47页 |
| ·菌株、质粒及细胞 | 第40-42页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·培养基及主要试剂的配制方法 | 第43-46页 |
| ·主要仪器及设备 | 第46-47页 |
| ·方法 | 第47-59页 |
| ·引物设计及合成 | 第47-48页 |
| ·gIL-18 基因重组转移载体的构建 | 第48-53页 |
| ·gIL-18 基因的克隆 | 第48-49页 |
| ·gIL-18 基因的PCR 产物的回收纯化 | 第49-50页 |
| ·gIL-18 基因片段和pFastBac~TM Dual 的酶切 | 第50页 |
| ·gIL-18 基因片段和pFastBac~TM Dual 的连接 | 第50页 |
| ·连接产物转化DH5α感受态细胞 | 第50-51页 |
| ·gIL-18 基因重组质粒的鉴定 | 第51-53页 |
| ·VP1 基因重组转移载体的构建 | 第53页 |
| ·gIL-18 和VP1 基因共表达重组转移载体的构建 | 第53-54页 |
| ·重组质粒的转座 | 第54-55页 |
| ·重组Bacmid DNA 的提取及鉴定 | 第55-56页 |
| ·重组Bacmid 转染sf9 昆虫细胞及收获重组杆状病毒 | 第56-57页 |
| ·重组Bacmid 转染sf9 昆虫细胞 | 第56-57页 |
| ·收获重组杆状病毒 | 第57页 |
| ·扩增重组杆状病毒液 | 第57页 |
| ·gIL-18 和VP1 在sf9 昆虫细胞中的表达与鉴定 | 第57-58页 |
| ·Western blot 鉴定 | 第58页 |
| ·IFA 鉴定 | 第58页 |
| ·共表达产物的生物学活性检测 | 第58-59页 |
| ·体外刺激山羊脾淋巴细胞的增殖 | 第58-59页 |
| ·共表达产物诱导IFN-γ生成及抑制VSV 病毒的活性 | 第59页 |
| 3 结果与分析 | 第59-70页 |
| ·gIL-18 和VP1 基因扩增 | 第59-60页 |
| ·重组转移载体的构建与鉴定 | 第60-61页 |
| ·gIL-18 基因重组杆状病毒转移载体的构建 | 第60页 |
| ·VP1 基因重组杆状病毒转移载体的构建 | 第60页 |
| ·gIL-18 和VP1 基因共表达重组杆状病毒转移载体的构建 | 第60-61页 |
| ·重组Bacmid 的筛选与鉴定 | 第61-63页 |
| ·gIL-18 和VP1 在sf9 昆虫细胞中的表达 | 第63-67页 |
| ·重组杆状病毒的细胞病变观察 | 第63-64页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 和Western blot 分析 | 第64-67页 |
| ·gIL-18 和VP1 在sf9 昆虫细胞中的共表达 | 第67页 |
| ·共表达产物的生物学活性检测 | 第67-70页 |
| ·体外刺激山羊脾淋巴细胞的增殖 | 第67-68页 |
| ·诱导淋巴细胞分泌IFN-γ和抑制VSV 病毒活性测定 | 第68-70页 |
| 4 讨论 | 第70-73页 |
| 5 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第85页 |
