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重金属纳米镍致癌分子机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
引言第11-15页
1 材料第15-21页
    1.1 实验材料第15页
        1.1.1 重金属纳米镍第15页
        1.1.2 实验细胞株第15页
        1.1.3 抗氧化剂材料第15页
    1.2 实验试剂第15-19页
        1.2.1 细胞培养相关试剂及配置第15-16页
        1.2.2 实验及其他辅助试剂及配置第16-19页
    1.3 主要实验仪器第19-21页
2 研究方法第21-27页
    2.1 纳米材料的配置及物理特征检测第21页
    2.2 细胞培养及处理第21-22页
        2.2.1 细胞复苏第21页
        2.2.2 细胞换液第21页
        2.2.3 细胞传代第21页
        2.2.4 细胞冻存第21-22页
    2.3 MTT 实验第22页
    2.4 细胞周期实验第22-23页
        2.4.1 细胞接种及染毒第22页
        2.4.2 细胞收集第22-23页
        2.4.3 细胞固定及流式细胞仪检测第23页
    2.5 细胞凋亡实验第23页
        2.5.1 细胞接种及染毒第23页
        2.5.2 细胞收集第23页
        2.5.3 细胞处理及流式细胞仪检测第23页
    2.6 细胞微丝结构观察实验第23-24页
        2.6.1 准备爬片和接种染毒第23页
        2.6.2 微丝荧光染色第23-24页
    2.7 细胞自由基(ROS)生成状况观察实验第24页
        2.7.1 准备爬片和接种染毒第24页
        2.7.2 细胞自由基染色第24页
    2.8 萤光色素酶检测基因(Luciferase 法)表达实验第24页
    2.9 蛋白免疫印迹(West-blotting 法)实验第24-26页
        2.9.1 蛋白提取第24-25页
        2.9.2 BCA 法测定总蛋白质含量第25页
        2.9.3 蛋白印迹实验第25-26页
    2.10 统计数据分析第26-27页
3 实验结果第27-41页
    3.1 纳米镍的物理特征第27-28页
    3.2 单纯纳米镍染毒组和抗氧化剂组中 JB6 细胞生存率变化第28-29页
    3.3 单纯纳米镍染毒组和抗氧化剂组中 JB6 细胞形态学观察第29-31页
    3.4 单纯纳米镍染毒组和抗氧化剂组中 JB6 细胞周期变化第31-33页
    3.5 单纯纳米镍染毒组和抗氧化剂组中 JB6 细胞凋亡变化第33-35页
    3.6 单纯纳米镍染毒组和抗氧化剂组中 JB6 细胞微丝结构变化第35-37页
    3.7 单纯纳米镍染毒组和抗氧化剂组自由基变化情况第37页
    3.8 单纯纳米镍染毒组和抗氧化剂组萤光色素酶变化第37-38页
    3.9 单纯纳米镍染毒组和加抗氧化剂组 MAPK 通路蛋白变化第38-41页
4 讨论第41-45页
    4.1 单纯纳米镍和加抗氧化剂对 JB6 细胞的生存率、细胞周期、细胞凋亡等的影响第41-42页
    4.2 单纯纳米镍和加抗氧化剂对 JB6 细胞内氧化应激及细胞骨架的影响第42-43页
    4.3 单纯纳米镍和加抗氧化剂对 JB6 细胞中转录因子及 MAPK 通路蛋白的影响第43-44页
    4.4 研究的展望和本研究的局限性第44-45页
5 结论第45-46页
6 参考文献第46-52页
7 附录A:综述第52-62页
    参考文献第58-62页
8 附录 B:英文缩略词第62-64页
9 在学研究成果第64-66页
致谢第66页

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