| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 图表索引 | 第11-12页 |
| 英文缩略词表 | 第12-13页 |
| 1 引言 | 第13-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-28页 |
| 2.1 材料 | 第15-18页 |
| 2.1.1 实验对象与受试物 | 第15页 |
| 2.1.2 主要实验试剂 | 第15-16页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第16-17页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第17-18页 |
| 2.1.4.1 BEAS-2B 细胞培养所需溶液的配制 | 第17页 |
| 2.1.4.2 基因组 DNA 甲基化所需试剂的配制 | 第17-18页 |
| 2.1.4.3 Real-time PCR 所需试剂配制 | 第18页 |
| 2.1.4.4 ELISA 所需试剂配制 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-28页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第18-19页 |
| 2.2.2 细胞染毒及恶性转化细胞株的建立 | 第19页 |
| 2.2.3 细胞基因组甲基化水平检测 | 第19-22页 |
| 2.2.3.1 细胞内总 DNA 的提取 | 第19-20页 |
| 2.2.3.2 基因组 DNA 水解预处理 | 第20-21页 |
| 2.2.3.3 标准溶液的配制 | 第21页 |
| 2.2.3.4 标准方程的建立 | 第21页 |
| 2.2.3.5 高效液相色谱法检测样品 | 第21-22页 |
| 2.2.4 Realtime-PCR 分析 | 第22-26页 |
| 2.2.4.1 细胞总 RNA（Small RNA）提取及纯度、完整性 | 第22-23页 |
| 2.2.4.2 细胞总 RNA（small RNA）逆转录 | 第23-25页 |
| 2.2.4.2.1 细胞总 RNA 逆转录 | 第23页 |
| 2.2.4.2.2 Small RNA 逆转录 | 第23-25页 |
| 2.2.4.3 Real-time PCR 引物的设计与合成 | 第25页 |
| 2.2.4.4 PCR 反应体系 | 第25-26页 |
| 2.2.4.5 PCR 反应条件 | 第26页 |
| 2.2.4.6 Real-time PCR 结果分析 | 第26页 |
| 2.2.5 ELISA 检测 DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、HDAC1 在细胞培养上清中的表达 | 第26-27页 |
| 2.2.6 统计分析 | 第27-28页 |
| 3 结果 | 第28-41页 |
| 3.1 各组细胞基因组 DNA 甲基化水平的检测 | 第28-30页 |
| 3.1.1 基因组提取 DNA 的完整性、纯度及浓度的检测 | 第28页 |
| 3.1.2 高效液相色谱法测定脱氧核苷标准品分析结果 | 第28-30页 |
| 3.2 DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、HDAC1 mRNA 水平的表达 | 第30-34页 |
| 3.2.1 细胞提取 RNA 的完整性、纯度及浓度的检测 | 第30-34页 |
| 3.3 DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、HDAC1 蛋白水平的表达 | 第34-37页 |
| 3.4 miRlet-7a 和 miR-21 水平的表达 | 第37-39页 |
| 3.5 CTPE 组第 10 代、20 代、30 代细胞 DNA 甲基化率、DNMT1、-3a、-3b、HDAC1 mRNA 、miRlet-7a、miR-21 基因相对表达量相关性分析 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-45页 |
| 4.1 CTPE 刺激对基因组 DNA 甲基化率的影响 | 第41-42页 |
| 4.2 CTPE 刺激对 DNMTs 表达的影响 | 第42-43页 |
| 4.3 CTPE 刺激对 HDAC1 表达的影响 | 第43页 |
| 4.4 CTPE 刺激对 miRlet-7a 和 mi-21 表达水平的影响 | 第43-44页 |
| 4.5 DNA 甲基化率、DNMT1、-3a、-3b、HDAC1、miRlet-7a、miR-21 基因相对表达量相关性分析 | 第44-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 6 参考文献 | 第46-49页 |
| 综述 | 第49-68页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
