| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-19页 |
| 1.1 腺相关病毒衣壳组装研究现状 | 第9-15页 |
| 1.1.1 AAV 的衣壳结构 | 第9-11页 |
| 1.1.2 AAV 衣壳结构蛋白 VP1，VP2 和 VP3 | 第11-12页 |
| 1.1.3 组装激活蛋白 AAP | 第12-13页 |
| 1.1.4 组装辅助蛋白 Rep40，Rep52，Rep68 和 Rep78 | 第13-14页 |
| 1.1.5 AAV 胞内组装 | 第14-15页 |
| 1.1.6 AAV 胞外自组装进展 | 第15页 |
| 1.2 毕赤酵母表达系统 | 第15-17页 |
| 1.2.1 毕赤酵母表达菌株 | 第16页 |
| 1.2.2 毕赤酵母表达系统的前期以及不足 | 第16-17页 |
| 1.3 大肠杆菌表达系统 | 第17-19页 |
| 第2章 VP2 蛋白在毕赤酵母中的表达、鉴定及纯化 | 第19-47页 |
| 2.1 材料 | 第19-24页 |
| 2.1.1 试剂、药品和菌株 | 第19-20页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.3 溶液配制 | 第21-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-36页 |
| 2.2.1 重组质粒 pPIC9-VP2 的构建 | 第24-28页 |
| 2.2.2 高表达毕赤酵母工程菌株 GS115-VP2 的构建 | 第28-31页 |
| 2.2.3 发酵罐技术制备 VP2 蛋白 | 第31-32页 |
| 2.2.4 VP2 蛋白的纯化和鉴定 | 第32-36页 |
| 2.3 实验结果 | 第36-46页 |
| 2.3.1 pPIC9-VP2 质粒的构建与鉴定 | 第36-37页 |
| 2.3.2 表达菌 GS115-VP2 的构建与鉴定 | 第37页 |
| 2.3.3 VP2 的蛋白发酵 | 第37-38页 |
| 2.3.4 VP2 蛋白的纯化 | 第38-41页 |
| 2.3.5 VP2 蛋白的鉴定与纯化 | 第41-46页 |
| 2.4 本章小结 | 第46-47页 |
| 第3章 VP3 蛋白在毕赤酵母中的表达、鉴定及纯化 | 第47-57页 |
| 3.1 材料 | 第47页 |
| 3.2 实验方法 | 第47-50页 |
| 3.2.1 重组质粒 pPIC9-VP3 的构建 | 第47-49页 |
| 3.2.2 高表达毕赤酵母工程菌株 GS115-VP3 的构建 | 第49-50页 |
| 3.3 实验结果 | 第50-56页 |
| 3.3.1 pPIC9-VP3 质粒的构建与鉴定 | 第50-51页 |
| 3.3.2 表达菌 GS115-VP3 的构建与鉴定 | 第51-52页 |
| 3.3.3 VP3 蛋白的鉴定与纯化 | 第52-56页 |
| 3.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第4章 VP3 蛋白在大肠杆菌中的表达、鉴定及纯化 | 第57-65页 |
| 4.1 材料 | 第57-58页 |
| 4.2 实验方法 | 第58-62页 |
| 4.2.1 重组质粒 pET-22b（+）-VP3 的构建 | 第58-60页 |
| 4.2.2 BL21-VP3 表达工程菌的诱导表达 | 第60-61页 |
| 4.2.3 包涵体的洗涤及复性纯化 | 第61-62页 |
| 4.3 实验结果 | 第62-64页 |
| 4.3.1 pET-22b（+）-VP3 质粒的构建与鉴定 | 第62-63页 |
| 4.3.2 大肠杆菌表达 VP3 蛋白的鉴定与纯化 | 第63-64页 |
| 4.4 本章小结 | 第64-65页 |
| 第5章 AAP 蛋白在大肠杆菌中的表达、鉴定及纯化 | 第65-69页 |
| 5.1 材料 | 第65页 |
| 5.2 实验方法 | 第65-66页 |
| 5.2.1 重组质粒 pET-22b(+)-AAP 的构建 | 第65页 |
| 5.2.2 AAP 蛋白的表达纯化 | 第65-66页 |
| 5.3 实验结果 | 第66-68页 |
| 5.3.1 重组质粒 pET-22b(+)-AAP 的鉴定 | 第66-67页 |
| 5.3.2 AAP 蛋白的纯化 | 第67-68页 |
| 5.4 本章小结 | 第68-69页 |
| 第6章 总结与展望 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第79页 |
