| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第9-22页 |
| 1.1 水稻研究概况 | 第9页 |
| 1.2 水稻矮生相关基因的研究进展 | 第9-15页 |
| 1.2.1 赤霉素合成与信号转导途径相关基因 | 第10-11页 |
| 1.2.2 油菜素内酯合成与信号转导途径相关基因 | 第11-13页 |
| 1.2.3 其他途径调控水稻株高的基因 | 第13-15页 |
| 1.3 CRISPR/Cas9基因编辑技术研究进展 | 第15-21页 |
| 1.3.1 基因编辑的类型 | 第15-16页 |
| 1.3.2 CRISPR/Cas系统的结构和原理 | 第16-18页 |
| 1.3.3 CRISPR/Cas9基因编辑系统的应用 | 第18-20页 |
| 1.3.4 影响CRISPR/Cas9系统效率的因素 | 第20-21页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 试验材料与方法 | 第22-29页 |
| 2.1 试验材料与试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.1 主要试验材料 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试验仪器设备 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试验试剂 | 第22页 |
| 2.1.4 主要试验溶液配制 | 第22-23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 候选基因SD1的序列克隆及分析 | 第23-24页 |
| 2.2.2 SD1基因在自然群体中的单倍型分析 | 第24页 |
| 2.2.3 SD1基因在不同材料中的表达谱分析 | 第24页 |
| 2.2.4 SD1基因靶位点的设计与合成 | 第24-25页 |
| 2.2.5 构建重组CRISPR/Cas9载体 | 第25-26页 |
| 2.2.6 重组质粒转化农杆菌 | 第26-27页 |
| 2.2.7 含重组质粒的农杆菌介导香稻丸愈伤的遗产转化 | 第27页 |
| 2.2.8 转基因植株DNA的抽提及阳性检测 | 第27页 |
| 2.2.9 T0代植株农艺性状考察 | 第27页 |
| 2.2.10 纯合体筛选 | 第27页 |
| 2.2.11 潜在脱靶位点分析 | 第27-29页 |
| 第三章 结果与分析 | 第29-45页 |
| 3.1 香稻丸SD1基因位点测序分析 | 第29-32页 |
| 3.2 SD1基因在自然群体中的单倍型分析 | 第32-33页 |
| 3.3 SD1基因在自然群体中的表达谱分析 | 第33-35页 |
| 3.4 SD1基因敲除靶位点的设计与合成 | 第35-36页 |
| 3.5 SD1基因的CRISPR/Cas9基因敲除载体的构建 | 第36页 |
| 3.6 pBWAH-Cas9i-sd重组载体的遗传转化 | 第36-37页 |
| 3.7 SD1基因的编辑位点检测 | 第37-38页 |
| 3.8 T0代基因编辑植株的农艺性状考察 | 第38-40页 |
| 3.9 获得无T-DNA插入的纯合编辑株系 | 第40-42页 |
| 3.10 sd1突变体脱靶效应评估 | 第42-45页 |
| 第四章 讨论 | 第45-50页 |
| 4.1 CRISPR/Cas9质粒的构建 | 第45页 |
| 4.2 CRISPR/Cas9系统构建突变植株 | 第45-46页 |
| 4.3 CRISPR/Cas9基因编辑突变类型的分析 | 第46-47页 |
| 4.4 CRISPR/Cas9基因编辑植株农艺性状考察 | 第47-48页 |
| 4.5 无T-DNA插入的水稻植株筛选 | 第48页 |
| 4.6 CRISPR/Cas9基因编辑系统脱靶效应分析 | 第48-50页 |
| 第五章 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-62页 |
| 附录 | 第62-78页 |
