水稻黄绿叶突变体577ys的基因克隆
| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1. 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 叶色突变体的来源及分类 | 第10-11页 |
| 1.1.1 叶色突变体的来源 | 第10-11页 |
| 1.1.2 叶色突变体的分类 | 第11页 |
| 1.2 叶色突变体的遗传分析 | 第11-12页 |
| 1.3 植物叶色突变的分子机制 | 第12-16页 |
| 1.3.1 叶绿素合成与降解相关基因 | 第12-15页 |
| 1.3.2 叶绿体分化发育受阻 | 第15页 |
| 1.3.3 血红素合成与降解基因 | 第15-16页 |
| 1.3.4 质核信号受阻 | 第16页 |
| 1.3.5 其它代谢途径的基因突变 | 第16页 |
| 1.4 镁原卟啉Ⅸ单甲酯环化酶的研究进展 | 第16-18页 |
| 1.4.1 镁原卟啉Ⅸ单甲酯环化酶的基因克隆 | 第16-17页 |
| 1.4.2 镁原卟啉Ⅸ单甲酯环化酶的功能研究 | 第17-18页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-31页 |
| 2.1 供试材料及仪器设备 | 第20页 |
| 2.1.1 供试材料 | 第20页 |
| 2.1.2 主要仪器设备: | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-22页 |
| 2.2.1 主要农艺性状调查 | 第20-21页 |
| 2.2.2 光合色素含量测定 | 第21页 |
| 2.2.3 叶绿体超微结构观察 | 第21-22页 |
| 2.2.4 水稻DNA的提取 | 第22页 |
| 2.2.5 候选基因的遴选及生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.3 转基因载体的构建 | 第22-25页 |
| 2.3.1 水稻总RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.3.2 RNA的反转录 | 第23页 |
| 2.3.3 候选基因cDNA扩增 | 第23-24页 |
| 2.3.4 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
| 2.3.5 载体的构建 | 第25页 |
| 2.4 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第25-28页 |
| 2.4.1 农杆菌感受态的制备 | 第26页 |
| 2.4.2 农杆菌感受态的转化及菌液保存 | 第26页 |
| 2.4.3 所需培养基及抗生素浓度 | 第26-27页 |
| 2.4.4 操作步骤 | 第27-28页 |
| 2.5 组织表达模式分析 | 第28页 |
| 2.6 亚细胞定位 | 第28-30页 |
| 2.6.1 eGFP载体的构建 | 第28-29页 |
| 2.6.2 水稻原生质体诱导与转化 | 第29-30页 |
| 2.7 台盼蓝染色 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-41页 |
| 3.1 577ys的表型特征及农艺性状分析 | 第31-32页 |
| 3.2 577ys的光合色素含量测定 | 第32-33页 |
| 3.3 577ys的叶绿体超微结构 | 第33-34页 |
| 3.4 候选基因的遴选、测序验证及分析 | 第34-37页 |
| 3.5 577ys基因功能互补验证 | 第37-38页 |
| 3.5.1 基因克隆及表达载体构建 | 第37页 |
| 3.5.2 转基因转化及检测 | 第37-38页 |
| 3.6 组织表达分析 | 第38-39页 |
| 3.7 577ys蛋白的亚细胞定位 | 第39-40页 |
| 3.8 台盼蓝染色 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 5 小结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
