符号及缩略词 | 第4-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 前言 | 第12-28页 |
1.1 布拉氏酵母菌 | 第12-17页 |
1.1.1 布拉氏酵母菌的生物学特性 | 第12-13页 |
1.1.2 益生性以及作用机制 | 第13-16页 |
1.1.3 应用 | 第16-17页 |
1.2 微生物表面展示 | 第17-27页 |
1.2.1 噬菌体表面展示技术 | 第17-19页 |
1.2.2 细菌表面展示系统 | 第19-21页 |
1.2.3 酵母表面展示系统 | 第21-26页 |
1.2.4 应用 | 第26-27页 |
1.3 研究目的与意义 | 第27-28页 |
2 材料与方法 | 第28-45页 |
2.1 材料 | 第28-29页 |
2.1.1 菌株以及质粒载体 | 第28页 |
2.1.2 试剂 | 第28-29页 |
2.1.3 主要设备 | 第29页 |
2.2 方法 | 第29-45页 |
2.2.1 试验所用溶液的配制 | 第29-31页 |
2.2.2 目的基因的获取 | 第31-33页 |
2.2.3 瞬时表达表面展示质粒构建 | 第33-38页 |
2.2.4 构建 EGFP 瞬时表达表面展示质粒 | 第38页 |
2.2.5 构建 EtMic2 瞬时表达表面展示质粒 | 第38-39页 |
2.2.6 稳定表达表面展示质粒 pLSDSb 和 pLSDSb2 的构建 | 第39页 |
2.2.7 构建 EGFP 稳定表达表面展示质粒 | 第39页 |
2.2.8 SbAGA1、SbAGA2 基因序列测序与分析 | 第39页 |
2.2.9 酵母转染 | 第39-41页 |
2.2.10 阳性重组子的筛选 | 第41-42页 |
2.2.11 阳性重组子的培养 | 第42页 |
2.2.12 间接免疫荧光 | 第42-43页 |
2.2.13 流式细胞仪分析 | 第43页 |
2.2.14 Western blot | 第43-45页 |
3 结果与分析 | 第45-67页 |
3.1 序列分析结果 | 第45-48页 |
3.1.1 SbAGA1 基因序列分析结果 | 第45-47页 |
3.1.2 SbAGA2 基因序列分析结果 | 第47-48页 |
3.2 瞬时表达表面展示系统展示 EGFP | 第48-56页 |
3.2.1 瞬时表达表面展示质粒构建结果 | 第48页 |
3.2.2 重组质粒的鉴定结果 | 第48-51页 |
3.2.3 EGFP 在酵母细胞表面展示结果 | 第51-55页 |
3.2.4 Western blot 结果 | 第55-56页 |
3.3 稳定表达表面展示系统展示 EGFP | 第56-62页 |
3.3.1 稳定表达表面展示质粒的构建结果 | 第56-57页 |
3.3.2 pLSDSb-GFP 和 pLSDSb2-GFP 质粒鉴定结果 | 第57-58页 |
3.3.3 EGFP 表面展示结果 | 第58-62页 |
3.4 布拉氏酵母菌表面展示系统的应用研究 | 第62-67页 |
3.4.1 pSDSb-MIC2 和 pSDSb2-MIC2 质粒鉴定结果 | 第62-63页 |
3.4.2 EtMic2 在酵母细胞表面展示结果 | 第63-65页 |
3.4.3 V5 标签的染色结果 | 第65-66页 |
3.4.4 Western blot 结果 | 第66-67页 |
4 讨论 | 第67-71页 |
5 结论 | 第71-72页 |
6 参考文献 | 第72-81页 |
7 致谢 | 第81-82页 |
8 硕士期间发表的论文 | 第82页 |