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布拉氏酵母菌表面展示系统的构建及应用研究

符号及缩略词第4-7页
中文摘要第7-9页
Abstract第9-11页
1 前言第12-28页
    1.1 布拉氏酵母菌第12-17页
        1.1.1 布拉氏酵母菌的生物学特性第12-13页
        1.1.2 益生性以及作用机制第13-16页
        1.1.3 应用第16-17页
    1.2 微生物表面展示第17-27页
        1.2.1 噬菌体表面展示技术第17-19页
        1.2.2 细菌表面展示系统第19-21页
        1.2.3 酵母表面展示系统第21-26页
        1.2.4 应用第26-27页
    1.3 研究目的与意义第27-28页
2 材料与方法第28-45页
    2.1 材料第28-29页
        2.1.1 菌株以及质粒载体第28页
        2.1.2 试剂第28-29页
        2.1.3 主要设备第29页
    2.2 方法第29-45页
        2.2.1 试验所用溶液的配制第29-31页
        2.2.2 目的基因的获取第31-33页
        2.2.3 瞬时表达表面展示质粒构建第33-38页
        2.2.4 构建 EGFP 瞬时表达表面展示质粒第38页
        2.2.5 构建 EtMic2 瞬时表达表面展示质粒第38-39页
        2.2.6 稳定表达表面展示质粒 pLSDSb 和 pLSDSb2 的构建第39页
        2.2.7 构建 EGFP 稳定表达表面展示质粒第39页
        2.2.8 SbAGA1、SbAGA2 基因序列测序与分析第39页
        2.2.9 酵母转染第39-41页
        2.2.10 阳性重组子的筛选第41-42页
        2.2.11 阳性重组子的培养第42页
        2.2.12 间接免疫荧光第42-43页
        2.2.13 流式细胞仪分析第43页
        2.2.14 Western blot第43-45页
3 结果与分析第45-67页
    3.1 序列分析结果第45-48页
        3.1.1 SbAGA1 基因序列分析结果第45-47页
        3.1.2 SbAGA2 基因序列分析结果第47-48页
    3.2 瞬时表达表面展示系统展示 EGFP第48-56页
        3.2.1 瞬时表达表面展示质粒构建结果第48页
        3.2.2 重组质粒的鉴定结果第48-51页
        3.2.3 EGFP 在酵母细胞表面展示结果第51-55页
        3.2.4 Western blot 结果第55-56页
    3.3 稳定表达表面展示系统展示 EGFP第56-62页
        3.3.1 稳定表达表面展示质粒的构建结果第56-57页
        3.3.2 pLSDSb-GFP 和 pLSDSb2-GFP 质粒鉴定结果第57-58页
        3.3.3 EGFP 表面展示结果第58-62页
    3.4 布拉氏酵母菌表面展示系统的应用研究第62-67页
        3.4.1 pSDSb-MIC2 和 pSDSb2-MIC2 质粒鉴定结果第62-63页
        3.4.2 EtMic2 在酵母细胞表面展示结果第63-65页
        3.4.3 V5 标签的染色结果第65-66页
        3.4.4 Western blot 结果第66-67页
4 讨论第67-71页
5 结论第71-72页
6 参考文献第72-81页
7 致谢第81-82页
8 硕士期间发表的论文第82页

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