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山东省猪圆环病毒病的血清学调查及PCV2分离株的遗传变异分析

符号及缩略词说明第4-9页
中文摘要第9-10页
Abstract第10-11页
前言第12-23页
    1 病原学研究进展第13-15页
        1.1 猪圆环病毒的发现及分类第13-14页
        1.2 猪圆环病毒的形态及理化性质第14-15页
    2 猪圆环病毒的分子生物学特性第15-16页
    3 猪圆环病毒的流行病学特性第16-17页
    4 PCV-2 的致病性第17-18页
        4.1 PCV-2 的致病机理第17-18页
        4.2 PCV-2 致宿主免疫抑制基本特征第18页
    5 猪圆环病毒 2 型相关疾病的临床表现及病变第18-21页
        5.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)第19页
        5.2 猪皮炎肾病综合征第19页
        5.3 猪呼吸道疾病综合征第19-20页
        5.4 母猪繁殖障碍综合征第20页
        5.5 仔猪先天性震颤第20页
        5.6 仔猪渗出性皮炎第20页
        5.7 混合感染第20-21页
    6 实验室诊断技术第21-23页
        6.1 病原学诊断技术第21-22页
            6.1.1 聚合酶链式反应(PCR)第21页
            6.1.2 免疫组织化学技术(IHC )第21页
            6.1.3 核酸原位杂交技术(ISH)第21页
            6.1.4 基因芯片技术第21-22页
        6.2 血清学诊断技术第22-23页
            6.2.1 间接免疫荧光技术(IFA )第22页
            6.2.2 酶联免疫吸附实验(ELISA)第22页
            6.2.3 免疫过氧化物酶单层细胞实验(IPMA)第22-23页
试验研究第23-47页
    试验一、 山东省猪圆环病毒病血清学调查第23-31页
        1 材料和方法第23-27页
            1.1 材料第23-24页
                1.1.1 猪血清样品第23-24页
                1.1.2 主要试剂第24页
                1.1.3 主要仪器第24页
            1.2 方法第24-27页
                1.2.1 猪血清中 PCV2 抗体血清学检测第24-25页
                1.2.2 DNA 的提取第25页
                1.2.3 检测引物第25-26页
                1.2.4 猪血清中 PCV2 的 PCR 抗原检测第26-27页
        2 结果与分析第27-30页
            2.1 结果第27-30页
                2.1.1 不同年龄阶段猪群 PCV2 血清学调查结果第27-28页
                2.1.2 不同年龄段猪群 PCV2 PCR 抗原检测结果第28-29页
                2.1.3 已免疫商品化猪圆环病毒 2 型疫苗猪群 PCV2 血清学调查结果及 PCR 抗原检测结果第29-30页
            2.2 分析第30页
        3 讨论第30-31页
    试验二、 山东省不同地区 PCV2 分离株全基因序列分析第31-47页
        1 材料与方法第32-37页
            1.1 病料第32页
            1.2 主要试剂第32页
            1.3 主要仪器第32页
            1.4 主要溶液的配制第32-33页
            1.5 引物设计第33页
            1.6 DNA 的提取第33页
            1.7 目的片段的克隆与扩增第33-36页
                1.7.1 PCV2 全基因组的扩增第33-34页
                1.7.2 PCR 扩增产物的回收第34-35页
                1.7.3 目的片段与克隆载体的连接第35页
                1.7.4 连接产物的转化第35页
                1.7.5 重组质粒的提取第35-36页
            1.8 重组质粒的 PCR 鉴定第36页
            1.9 目的片段的序列测定及分析第36-37页
        2 结果与分析第37-45页
            2.1 PCV2 全基因组的扩增结果第37页
            2.2 重组质粒的 PCR 鉴定结果第37-38页
            2.3 序列分析第38-42页
                2.3.1 7株 PCV2 全基因组序列分析第38-39页
                2.3.2 PCV2 ORF1 序列分析第39-41页
                2.3.3 PCV2 ORF2 序列分析第41-42页
            2.4 遗传进化树分析第42-45页
                2.4.1 7株 PCV2 系统发育进化树分析第42-43页
                2.4.2 ORF1 系统发育进化树分析第43-44页
                2.4.3 ORF2 系统发育进化树分析第44-45页
        3 讨论第45-47页
结论第47-48页
参考文献第48-56页
致谢第56页

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