| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1.前言 | 第12-24页 |
| 1.1 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1.1 鱼类免疫系统 | 第12-14页 |
| 1.1.2 免疫球蛋白 | 第14-20页 |
| 1.1.3 鱼类免疫球蛋白基因重组方式 | 第20-21页 |
| 1.1.4 鱼类免疫球蛋白分子的进化 | 第21-22页 |
| 1.2 本研究目的和意义 | 第22-24页 |
| 2.材料和方法 | 第24-39页 |
| 2.1 试验动物 | 第24页 |
| 2.2 技术路线 | 第24页 |
| 2.3 所用仪器及设备 | 第24-25页 |
| 2.4 药品与试剂 | 第25-26页 |
| 2.4.1 培养基和相关试剂配制 | 第25-26页 |
| 2.4.2 质粒和菌株 | 第26页 |
| 2.5 分子克隆 | 第26-36页 |
| 2.5.1 总RNA提取 | 第26页 |
| 2.5.2 第一链cDNA的合成 | 第26-27页 |
| 2.5.3 南方鲇IgM重链cDNA中间片段的获得 | 第27-29页 |
| 2.5.4 南方鲇IgM重链基因cDNA5’和3’端序列获得 | 第29-31页 |
| 2.5.5 南方鲇IgM全长cDNA扩增 | 第31页 |
| 2.5.6 PCR产物回收与纯化 | 第31-32页 |
| 2.5.7 回收得到的DNA浓度和纯度检测 | 第32页 |
| 2.5.8 T载体连接 | 第32页 |
| 2.5.9 转化感受态细胞 | 第32-33页 |
| 2.5.10 筛选和鉴定阳性菌 | 第33-34页 |
| 2.5.11 重组质粒的提取 | 第34-36页 |
| 2.6 测序 | 第36页 |
| 2.6.1 测序 | 第36页 |
| 2.6.2 阳性菌保种 | 第36页 |
| 2.7 IgM序列分析和系统进化分析 | 第36页 |
| 2.8 IgM组织分布 | 第36-37页 |
| 2.9 南方鲇胚胎IgM表达 | 第37页 |
| 2.10 小瓜虫处理南方鲇幼鱼(2-4cm)后对IgM表达的影响 | 第37页 |
| 2.11 小瓜虫处理南方鲇幼鱼(7-9cm)后对IgM表达的影响 | 第37-39页 |
| 3.试验结果 | 第39-81页 |
| 3.1 南方鲇IgM重链基因cDNA全长的克隆 | 第39-46页 |
| 3.1.1 IgM中间片段克隆与分析 | 第39页 |
| 3.1.2 IgM 3'RACE克隆与分析 | 第39页 |
| 3.1.3 IgM 5'RACE克隆与分析 | 第39-40页 |
| 3.1.4 南方鲇IgM全长克隆 | 第40-46页 |
| 3.2 南方鲇IgM重链生物信息学分析 | 第46-56页 |
| 3.2.1 IgM编码蛋白质理化性质 | 第46-47页 |
| 3.2.2 IgM编码蛋白二级结构 | 第47-51页 |
| 3.2.3 IgM编码蛋白三级结构 | 第51-56页 |
| 3.3 IgM核苷酸和对应氨基酸序列 | 第56页 |
| 3.4 IgM氨基酸序列特征序列和保守位点 | 第56-70页 |
| 3.5 IgM系统进化分析 | 第70-76页 |
| 3.6 南方鲇IgM的组织分布 | 第76页 |
| 3.7 IgM在南方鲇胚胎表达 | 第76页 |
| 3.8 小瓜虫处理对南方鲇幼鱼(2-4cm)IgM表达影响 | 第76页 |
| 3.9 小瓜虫处理对南方鲇幼鱼(7-9cm)IgM表达影响 | 第76-81页 |
| 4.讨论 | 第81-88页 |
| 4.1 南方鲇IgM类型及cDNA序列特点 | 第81-85页 |
| 4.1.1 南方鲇IgM重链cDNA序列划分和序列特征 | 第81-82页 |
| 4.1.2 南方鲇IgM重链编码蛋白半胱氨酸和色氨酸保守位点 | 第82-83页 |
| 4.1.3 南方鲇IgM重链编码蛋白特有的保守氨基酸基序 | 第83-84页 |
| 4.1.4 南方鲇IgM重链氨基酸序列系统进化树 | 第84页 |
| 4.1.5 南方鲇IgM重链氨基酸序列糖基化位点 | 第84-85页 |
| 4.2 南方鲇IgM编码蛋白结构 | 第85-86页 |
| 4.3 南方鲇IgM表达的组织表达特异性 | 第86-88页 |
| 5.总结 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-100页 |
| 致谢 | 第100-102页 |
| 在学期间发表的文章 | 第102页 |
