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细粒棘球绦虫丝裂原活化蛋白激酶信号通路基因的克隆、表达及鉴定

中文摘要第3-5页
ABSTRACT第5-7页
第一部分 引言第12-20页
    1 包虫病的流行及防治现状第12-14页
    2. MAPK 与寄生虫的关系第14-19页
        2.1 ERK MAPK 信号通路第15-16页
        2.2 Ras /Ral MAPK 信号通路第16-18页
        2.3 p38 MAPK 信号通路第18-19页
    3. 展望第19-20页
第二部分 实验第20-70页
    第一章 细粒棘球绦虫 Eg Ras 基因的克隆及序列分析第20-31页
        1 材料第20页
        2 方法第20-26页
            2.1 细粒棘球绦虫总RNA 的提取第20-21页
            2.2 RT-PCR第21-22页
            2.3 细粒棘球绦虫Ras 基因的克隆第22页
            2.4 T-Eg Ras 质粒的构建及酶切鉴定第22-26页
            2.5 细粒棘球绦虫Ras 基因序列测定、相似性分析及功能预测第26页
        3 结果第26-30页
            3.1 细粒棘球绦虫总RNA 提取第26-27页
            3.2 细粒棘球绦虫Ras 基因的克隆第27页
            3.3 细粒棘球绦虫Ras 基因重组质粒的鉴定第27-28页
            3.4 细粒棘球绦虫Ras 基因序列的测定及分析第28-30页
        4 讨论第30-31页
    第二章 细粒棘球绦虫 EgRal 基因的克隆、表达及免疫学特性第31-47页
        1 材料第31-32页
        2 方法第32-37页
            2.1 细粒棘球绦虫总RNA 的提取第32页
            2.2 RT-PCR第32页
            2.3 细粒棘球绦虫Ral 基因的克隆第32-33页
            2.4 T-Eg Ral 质粒的构建、相似性分析和功能预测第33页
            2.5 pET-28a- Eg Ral 重组质粒的构建第33-36页
            2.6 pET-28a- Eg Ral 重组质粒诱导表达及纯化第36页
            2.7 Western blot 免疫印迹检测第36-37页
        3. 结果第37-46页
            3.1 细粒棘球绦虫Ral 基因的克隆第37-38页
            3.2 细粒棘球绦虫Ral 基因的酶切鉴定第38-39页
            3.3 细粒棘球绦虫Ral 基因序列的测定及分析第39-42页
            3.4 pET-28a-Eg Ral 重组质粒的构建及鉴定第42页
            3.5 pET-28a-Eg Ral 重组蛋白的诱导表达及纯化第42-44页
            3.6 pET-28a-Eg Ral 重组蛋白的免疫活性鉴定第44-46页
        4 讨论第46-47页
    第三章 细粒棘球绦虫 Eg ERK 蛋白纯化及免疫学特性鉴定第47-52页
        1 材料第47页
        2 方法第47-49页
            2.1 重组质粒pET-28a- Eg ERK 的诱导表达第47-48页
            2.2 重组蛋白Eg ERK 纯化第48页
            2.3 Western blot 免疫印迹检测第48-49页
        3 结果第49-51页
            3.1 pET28a-Eg ERK 重组蛋白的诱导表达第49-50页
            3.2 pET28a-Eg ERK 重组蛋白超声及纯化第50-51页
            3.3 pET28a-Eg ERK 重组蛋白的免疫活性鉴定第51页
        4. 讨论第51-52页
    第四章 细粒棘球绦虫 Eg p38 基因克隆、表达及鉴定第52-70页
        1 材料第53页
        2 方法第53-60页
            2.1 细粒棘球绦虫总RNA 的提取第53页
            2.2 RT-PCR第53页
            2.3 细粒棘球绦虫p38 基因的克隆第53-54页
            2.4 T-Eg p38 质粒的构建及相似性分析和功能预测第54-55页
            2.5 pET-28a- Eg p38 重组质粒的构建第55-57页
            2.6 pET-28a- Eg p38 重组质粒的诱导表达及纯化第57页
            2.7 原头蚴、内囊壁、外囊壁及囊液天然总蛋白的提取第57-58页
            2.8 兔抗Eg p38 抗血清的制备第58-59页
            2.9 Western blot 免疫印迹检测第59-60页
        3 结果第60-70页
            3.1 细粒棘球绦虫p38 基因的克隆第60-61页
            3.2 细粒棘球绦虫p38 基因质粒酶切鉴定第61-62页
            3.3 细粒棘球绦虫p38 基因序列的测定及分析第62-64页
            3.4 pET-28a-Eg p38 表达载体的构建及鉴定第64-65页
            3.5 pET-28a-Eg p38 重组蛋白的诱导表达及纯化第65-67页
            3.6 原头蚴、内囊壁、外囊壁及囊液天然蛋白的提取第67-68页
            3.7 EL1SA 法测定该抗体效价第68-69页
            3.8 重组蛋白及天然蛋白的免疫活性鉴定第69-70页
        4 讨论第70页
第三部分 总结论第70-72页
参考文献第72-79页
附录第79-81页
个人简历第81-83页
致谢第83页

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