中文摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
第一部分 引言 | 第12-20页 |
1 包虫病的流行及防治现状 | 第12-14页 |
2. MAPK 与寄生虫的关系 | 第14-19页 |
2.1 ERK MAPK 信号通路 | 第15-16页 |
2.2 Ras /Ral MAPK 信号通路 | 第16-18页 |
2.3 p38 MAPK 信号通路 | 第18-19页 |
3. 展望 | 第19-20页 |
第二部分 实验 | 第20-70页 |
第一章 细粒棘球绦虫 Eg Ras 基因的克隆及序列分析 | 第20-31页 |
1 材料 | 第20页 |
2 方法 | 第20-26页 |
2.1 细粒棘球绦虫总RNA 的提取 | 第20-21页 |
2.2 RT-PCR | 第21-22页 |
2.3 细粒棘球绦虫Ras 基因的克隆 | 第22页 |
2.4 T-Eg Ras 质粒的构建及酶切鉴定 | 第22-26页 |
2.5 细粒棘球绦虫Ras 基因序列测定、相似性分析及功能预测 | 第26页 |
3 结果 | 第26-30页 |
3.1 细粒棘球绦虫总RNA 提取 | 第26-27页 |
3.2 细粒棘球绦虫Ras 基因的克隆 | 第27页 |
3.3 细粒棘球绦虫Ras 基因重组质粒的鉴定 | 第27-28页 |
3.4 细粒棘球绦虫Ras 基因序列的测定及分析 | 第28-30页 |
4 讨论 | 第30-31页 |
第二章 细粒棘球绦虫 EgRal 基因的克隆、表达及免疫学特性 | 第31-47页 |
1 材料 | 第31-32页 |
2 方法 | 第32-37页 |
2.1 细粒棘球绦虫总RNA 的提取 | 第32页 |
2.2 RT-PCR | 第32页 |
2.3 细粒棘球绦虫Ral 基因的克隆 | 第32-33页 |
2.4 T-Eg Ral 质粒的构建、相似性分析和功能预测 | 第33页 |
2.5 pET-28a- Eg Ral 重组质粒的构建 | 第33-36页 |
2.6 pET-28a- Eg Ral 重组质粒诱导表达及纯化 | 第36页 |
2.7 Western blot 免疫印迹检测 | 第36-37页 |
3. 结果 | 第37-46页 |
3.1 细粒棘球绦虫Ral 基因的克隆 | 第37-38页 |
3.2 细粒棘球绦虫Ral 基因的酶切鉴定 | 第38-39页 |
3.3 细粒棘球绦虫Ral 基因序列的测定及分析 | 第39-42页 |
3.4 pET-28a-Eg Ral 重组质粒的构建及鉴定 | 第42页 |
3.5 pET-28a-Eg Ral 重组蛋白的诱导表达及纯化 | 第42-44页 |
3.6 pET-28a-Eg Ral 重组蛋白的免疫活性鉴定 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-47页 |
第三章 细粒棘球绦虫 Eg ERK 蛋白纯化及免疫学特性鉴定 | 第47-52页 |
1 材料 | 第47页 |
2 方法 | 第47-49页 |
2.1 重组质粒pET-28a- Eg ERK 的诱导表达 | 第47-48页 |
2.2 重组蛋白Eg ERK 纯化 | 第48页 |
2.3 Western blot 免疫印迹检测 | 第48-49页 |
3 结果 | 第49-51页 |
3.1 pET28a-Eg ERK 重组蛋白的诱导表达 | 第49-50页 |
3.2 pET28a-Eg ERK 重组蛋白超声及纯化 | 第50-51页 |
3.3 pET28a-Eg ERK 重组蛋白的免疫活性鉴定 | 第51页 |
4. 讨论 | 第51-52页 |
第四章 细粒棘球绦虫 Eg p38 基因克隆、表达及鉴定 | 第52-70页 |
1 材料 | 第53页 |
2 方法 | 第53-60页 |
2.1 细粒棘球绦虫总RNA 的提取 | 第53页 |
2.2 RT-PCR | 第53页 |
2.3 细粒棘球绦虫p38 基因的克隆 | 第53-54页 |
2.4 T-Eg p38 质粒的构建及相似性分析和功能预测 | 第54-55页 |
2.5 pET-28a- Eg p38 重组质粒的构建 | 第55-57页 |
2.6 pET-28a- Eg p38 重组质粒的诱导表达及纯化 | 第57页 |
2.7 原头蚴、内囊壁、外囊壁及囊液天然总蛋白的提取 | 第57-58页 |
2.8 兔抗Eg p38 抗血清的制备 | 第58-59页 |
2.9 Western blot 免疫印迹检测 | 第59-60页 |
3 结果 | 第60-70页 |
3.1 细粒棘球绦虫p38 基因的克隆 | 第60-61页 |
3.2 细粒棘球绦虫p38 基因质粒酶切鉴定 | 第61-62页 |
3.3 细粒棘球绦虫p38 基因序列的测定及分析 | 第62-64页 |
3.4 pET-28a-Eg p38 表达载体的构建及鉴定 | 第64-65页 |
3.5 pET-28a-Eg p38 重组蛋白的诱导表达及纯化 | 第65-67页 |
3.6 原头蚴、内囊壁、外囊壁及囊液天然蛋白的提取 | 第67-68页 |
3.7 EL1SA 法测定该抗体效价 | 第68-69页 |
3.8 重组蛋白及天然蛋白的免疫活性鉴定 | 第69-70页 |
4 讨论 | 第70页 |
第三部分 总结论 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-79页 |
附录 | 第79-81页 |
个人简历 | 第81-83页 |
致谢 | 第83页 |