| 摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-29页 |
| 1. 淀粉的代谢机理 | 第17-25页 |
| 1.1 淀粉生物合成机理 | 第17-24页 |
| 1.1.1 腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸(ADPG)的形成 | 第17-18页 |
| 1.1.2 淀粉多糖链的延伸 | 第18-20页 |
| 1.1.3 淀粉多糖链分支与去分支 | 第20-24页 |
| 1.2 淀粉的生物降解机理 | 第24-25页 |
| 2. 植物细胞中的质体代谢 | 第25-27页 |
| 3. 本研究的目的和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 玉米AGPase的功能研究 | 第29-62页 |
| 1. 前言 | 第29-31页 |
| 2 实验材料和方法 | 第31-38页 |
| 2.1. 实验材料 | 第31页 |
| 2.2. 实验方法 | 第31-38页 |
| 2.2.1 玉米中AGPase基因的发掘 | 第31-32页 |
| 2.2.2 荧光定量PCR和半定量RT-PCR | 第32-34页 |
| 2.2.3 基因型的鉴定和基因转录水平分析 | 第34-35页 |
| 2.2.3.1 DNA的提取 | 第34-35页 |
| 2.2.3.2 基因型PCR鉴定和转录水平PCR分析 | 第35页 |
| 2.2.4 AGPase酶活性分析 | 第35页 |
| 2.2.5 淀粉的提取及淀粉的定性、定量测定 | 第35-37页 |
| 2.2.5.1 胚乳、胚和叶片淀粉的提取 | 第36页 |
| 2.2.5.2 淀粉的定性测定 | 第36页 |
| 2.2.5.3 淀粉的定量测定 | 第36-37页 |
| 2.2.6 AGPase酶的体外表达及活性检测 | 第37-38页 |
| 2.2.6.1 表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 2.2.6.2 AGPase活性检测 | 第38页 |
| 2.2.7 胚乱中的薦糖含量的测定 | 第38页 |
| 3. 结果与分析 | 第38-58页 |
| 3.1. AGPase基因的发掘与命名 | 第38-42页 |
| 3.2. AGPase基因转录水平分析：Qualitative-PCR和Quantitative-PCR | 第42-47页 |
| 3.3. AGPase的原核表达 | 第47-50页 |
| 3.4 Embryo S和leaf L突变体的筛选鉴定 | 第50-52页 |
| 3.5 embryoL和leafL突变体的淀粉含量分析 | 第52-56页 |
| 3.6 embryoLm leafL突变体的淀粉含量分析 | 第56-58页 |
| 4. 讨论 | 第58-62页 |
| 第三章 玉米AGPase的酶动力学特性研究 | 第62-76页 |
| 1. 前沿 | 第62-64页 |
| 2 材料和方法 | 第64-71页 |
| 2.1 实验材料 | 第64-68页 |
| 2.2 实验方法 | 第68-71页 |
| 2.2.1 菌的培养、碘染和酶的诱导表达 | 第68页 |
| 2.2.2 酶的纯化 | 第68-69页 |
| 2.2.2.1 粗蛋白的制备 | 第68页 |
| 2.2.2.2 粗蛋白的纯化 | 第68-69页 |
| 2.2.3. AGPase酶活性测定 | 第69-70页 |
| 2.2.3.1 正向测定AGPase活性 | 第69页 |
| 2.2.3.2 反向测定AGPase活性 | 第69-70页 |
| 2.2.4. AGPase的酶动力学特性及耐热性测定 | 第70-71页 |
| 2.2.4.1 米氏常数(Km)的测定 | 第70页 |
| 2.2.4.2 酶耐热性的检测 | 第70-71页 |
| 3 结果与分析 | 第71-74页 |
| 3.1. 酶的纯化 | 第71-72页 |
| 3.2. 酶的动力学和耐热特性 | 第72-74页 |
| 4. 讨论 | 第74-76页 |
| 第四章 玉米isoamylase-DBE的功能研究 | 第76-98页 |
| 1. 前沿 | 第76-77页 |
| 2 实验材料和方法 | 第77-80页 |
| 2.1 实验材料 | 第77-78页 |
| 2.2. 实验方法 | 第78-80页 |
| 2.2.1 淀粉提取、纯化和支链淀粉结构分析 | 第78-79页 |
| 2.2.1.1. 碳水化合物的分离纯化 | 第78页 |
| 2.2.1.2. 可溶性糖(WSP)和支链淀粉的结构分析 | 第78-79页 |
| 2.2.2 多克隆抗体的制备 | 第79页 |
| 2.2.3 蛋白免疫杂交(western-blot) | 第79页 |
| 2.2.4 Isoamylase的酶活性分析 | 第79-80页 |
| 3. 结果与分析 | 第80-95页 |
| 3.1 Isa2-339、dul1和dul1/isa2-239突变体的筛选和特性 | 第80-85页 |
| 3.2 ISA2、SSⅢ突变对多糖含量的影响 | 第85-86页 |
| 3.3 ISA2、SSⅢ突变对多糖结构的影响 | 第86-92页 |
| 3.4 ISA2、SSⅢ的突变对ISA1的影响 | 第92-95页 |
| 4. 讨论 | 第95-98页 |
| 参考文献 | 第98-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第109-110页 |
| 附表 | 第110-129页 |
