| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 缩略词表 | 第12-18页 |
| 一、前言 | 第18页 |
| 二、文献综述 | 第18-32页 |
| 1、KISS1/GPR54信号系统简介 | 第18-19页 |
| 2、KISS1/GPR54系统对初情启动的调控作用及机理 | 第19-29页 |
| 2.1 动物下丘脑垂体性腺轴系统 | 第19-20页 |
| 2.2 KISS1/GPR54系统对初情启动的关键性调控作用 | 第20-22页 |
| 2.3 KISS1/GPR54系统调控动物初情启动的机理 | 第22-25页 |
| 2.4 营养对代谢激素和动物初情启动的影响 | 第25-29页 |
| 3、KISS1/GPR54系统细胞信号转导途径 | 第29-31页 |
| 4、主要存在的问题 | 第31-32页 |
| 三、本研究的目的、意义和内容 | 第32-34页 |
| 3.1 研究目的 | 第32页 |
| 3.2 研究意义 | 第32页 |
| 3.3 研究内容 | 第32-33页 |
| 3.4 技术路线 | 第33-34页 |
| 四、试验研究 | 第34-93页 |
| 试验一、日粮能量来源对大鼠初情启动及HPG轴中KISS1/GPR54系统的影响 | 第34-54页 |
| 摘要 | 第34页 |
| 引言 | 第34-35页 |
| 1、材料与方法 | 第35-41页 |
| 1.1 试验设计 | 第35页 |
| 1.2 试验动物 | 第35页 |
| 1.3 大鼠饲养管理 | 第35页 |
| 1.4 试验日粮及组成 | 第35-37页 |
| 1.5 主要试剂和仪器 | 第37页 |
| 1.6 样品采集与处理 | 第37页 |
| 1.7 测定指标与方法 | 第37-41页 |
| 1.8 数据统计分析 | 第41页 |
| 2、结果与分析 | 第41-49页 |
| 2.1 日粮能量来源对大鼠生长性能的影响 | 第41-42页 |
| 2.2 日粮能量来源对大鼠血清代谢底物的影响 | 第42页 |
| 2.3 日粮能量来源对大鼠代谢激素的影响 | 第42-43页 |
| 2.4 日粮能量来源对大鼠生殖激素的影响 | 第43页 |
| 2.5 日粮能量来源对大鼠下丘脑ARC核初情启动相关基因表达的影响 | 第43-45页 |
| 2.6 日粮能量来源对大鼠AVPV初情启动相关基因表达的影响 | 第45-47页 |
| 2.7 日粮来源对大鼠垂体初情启动相关基因表达的影响 | 第47-48页 |
| 2.8 日粮能量来源对大鼠卵巢初情启动相关基因表达的影响 | 第48-49页 |
| 3、讨论 | 第49-52页 |
| 3.1 日粮能量来源对大鼠初情启动的影响 | 第49-50页 |
| 3.2 日粮能量来源对大鼠血清代谢底物、代谢激素的影响 | 第50页 |
| 3.3 日粮能量来源对大鼠生殖激素及初情启动的影响 | 第50-51页 |
| 3.4 日粮能量来源对KISS1在下丘脑的表达的影响 | 第51-52页 |
| 3.5 日粮能量来源对KISS1基因在卵巢和垂体表达的影响 | 第52页 |
| 4、小结 | 第52-54页 |
| 试验二、体外培养ARC神经元中INSULIN对KISS1/GPR54表达的影响研究 | 第54-71页 |
| 摘要 | 第54页 |
| 引言 | 第54-55页 |
| 1、材料与方法 | 第55-61页 |
| 1.1 试验动物 | 第55页 |
| 1.2 动物饲养管理 | 第55页 |
| 1.3 试验设计 | 第55-56页 |
| 1.4 主要试剂和仪器 | 第56页 |
| 1.5 神经细胞培养基配方 | 第56-58页 |
| 1.6 原代ARC分离和培养 | 第58-59页 |
| 1.7 检测指标及方法 | 第59-61页 |
| 1.8 数据统计分析 | 第61页 |
| 2、结果与分析 | 第61-68页 |
| 2.1 ARC神经元的元代培养 | 第61-63页 |
| 2.2 细胞形态观察 | 第63页 |
| 2.3 Insulin浓度处理对ARC神经元细胞KISS1基因表达的影响 | 第63-64页 |
| 2.4 Insulin浓度处理对ARC神经元初情启动相关基因表达的影响 | 第64-65页 |
| 2.5 Insulin浓度处理对ARC神经元细胞GnRH激素分泌的影响 | 第65页 |
| 2.6 Insulin时间处理对ARC神经元细胞初情启动相关基因表达和GnRH激素分泌的影响 | 第65-68页 |
| 3、讨论 | 第68-70页 |
| 3.1 ARC原代神经元细胞培养 | 第68-69页 |
| 3.2 ARC神经元细胞中Insulin对KISS1、GnRH表达的影响 | 第69-70页 |
| 4、小结 | 第70-71页 |
| 试验三、体外培养ARC神经元中LEPTIN对KISS1/GPR54表达的影响研究 | 第71-81页 |
| 摘要 | 第71页 |
| 引言 | 第71-72页 |
| 1、材料与方法 | 第72-73页 |
| 1.1 试验动物 | 第72页 |
| 1.2 动物饲养管理 | 第72页 |
| 1.3 试验设计 | 第72页 |
| 1.4 主要试剂和仪器 | 第72页 |
| 1.5 原代ARC分离和培养 | 第72-73页 |
| 1.6 检测指标及方法 | 第73页 |
| 1.7 数据统计分析 | 第73页 |
| 2、结果与分析 | 第73-79页 |
| 2.1 细胞形态观察 | 第73-74页 |
| 2.2 Leptin浓度处理对ARC神经元细胞KISS1基因表达的影响 | 第74页 |
| 2.3 Leptin浓度处理对ARC神经元细胞初情启动相关因表达的影响 | 第74-76页 |
| 2.4 Leptin浓度处理对ARC神经元细胞GnRH激素分泌的影响 | 第76页 |
| 2.5 Leptin时间处理对ARC神经元细胞初情启动相关因表达和GnRH激素分泌的影响 | 第76-79页 |
| 3、讨论 | 第79-80页 |
| 4、小结 | 第80-81页 |
| 试验四、LEPTIN调控KISSPEPTIN/GPR54的细胞内信号途径研究 | 第81-93页 |
| 摘要 | 第81页 |
| 引言 | 第81-82页 |
| 1、材料与方法 | 第82-86页 |
| 1.1 试验动物 | 第82页 |
| 1.2 试验设计 | 第82页 |
| 1.3 神经细胞培养基配方 | 第82页 |
| 1.4 原代下丘脑神经细胞培养 | 第82页 |
| 1.5 主要仪器设备和试剂 | 第82-83页 |
| 1.6 观测指标及测定方法 | 第83-86页 |
| 1.7 数据统计分析 | 第86页 |
| 2、结果与分析 | 第86-91页 |
| 2.1 细胞形态观察 | 第86页 |
| 2.2 不同AG490剂量处理对ARC神经元细胞JAK2蛋白表达的影响 | 第86-87页 |
| 2.3 Leptin和AG490处理对ARC神经元细胞pJAK2、pSTAT3、kisspeptin蛋白表达影响 | 第87-89页 |
| 2.4 Leptin和AG490处理对ARC神经元KISS1、OB-Rb基因表达的影响 | 第89-90页 |
| 2.5 Leptin和AG490处理对ARC神经元细胞GnRH激素分泌的影响 | 第90-91页 |
| 3、讨论 | 第91-92页 |
| 4、小结 | 第92-93页 |
| 五、总体讨论 | 第93-95页 |
| 六、全文总体结论、创新点 | 第95-96页 |
| 1、全文总体结论 | 第95页 |
| 2、创新点 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-108页 |
| 附录1：REAL-TIME PCR标准曲线及溶解曲线 | 第108-112页 |
| 附录2：激素放射免疫分析药盒标准曲线 | 第112-114页 |
| 附录3：LEPTIN PATHWAY分析图 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第116页 |
