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甘蓝SCR、THL与SRK交替作用的酵母双杂交检测

中文摘要第6-9页
Abstract第9-11页
第一章 文献综述第12-24页
    1.1 甘蓝的自交不交亲和性研究现状第12页
    1.2 甘蓝的自交不交亲和相关蛋白研究现状第12-14页
    1.3 S单倍型的进化机制研究第14-15页
    1.4 甘蓝S-位点单元型的演化第15-18页
    1.5 十字花科S位点的演变第18-19页
    1.6 S位点的重组第19页
    1.7 蛋白质的相互作用与S位点的进化第19-20页
    1.8 酵母双杂交技术和酵母细胞壁的演化第20-24页
        1.8.1 酵母双杂交技术实验原理第20-21页
        1.8.2 酵母细胞壁的进化起源第21页
        1.8.3 性黏附素功能和进化第21-22页
        1.8.4 酵母细胞壁基因和蛋白的适应进化第22-24页
第二章 引言第24-28页
    2.1. 意义第24-25页
    2.2. 技术路线第25-28页
第三章 材料与方法第28-36页
    3.1 植物材料和菌株第28页
    3.2 实验方法第28-29页
        3.2.1 总RNA提取和cDNA合成第28页
        3.2.2 引物设计第28-29页
    3.3 SCR2、ESRK2(SRK胞外域)、THL1的RT-PCR扩增第29-30页
        3.3.1 PCR扩增SCR2基因第29页
        3.3.2 eSRK2基因的扩增第29-30页
        3.3.3 THL1基因的扩增第30页
    3.4 酵母载体的构建第30-34页
        3.4.1 琼脂糖凝胶电泳检测第31页
        3.4.2 基因目的片段的回收第31页
        3.4.3 目的片段的转化与测序第31-32页
        3.4.4 生物信息学分析第32页
        3.4.5 提取质粒第32页
        3.4.6 酵母双杂交表达载体与目的基因片段的限制性内切酶消化第32-33页
        3.4.7 酵母双杂交表达载体与目的片段的链接第33页
        3.4.8 酵母双杂交重组载体的构建第33-34页
    3.5 酵母双杂交系统鉴定相互作用第34-36页
        3.5.1 重组酵母双杂交表达质粒的毒性检测第34-35页
        3.5.2 重组诱饵载体的自激活检测第35页
        3.5.3 SRKJ与THL1,SCR2与eSRK2,eSRK28与SCR2相互作用检测第35-36页
第四章 结果与分析第36-48页
    4.1 甘蓝核酸的提取第36页
        4.1.1 甘蓝总DNA的提取第36页
        4.1.2 甘蓝总RNA的提取第36页
    4.2 Ⅰ型和Ⅱ型的SCR2、ESRK2、THL1的基因克隆及序列分析第36-39页
    4.3 重组质粒PGADT7-ESRK2、PGBKT7-SCR2、PGADT7-SRKJ和PGBKT7-THL 第39-41页
    4.4 诱饵蛋白毒性及其自激活检测分析和PGBKT7-SRK毒性检测分析第41-42页
    4.5 融合表达分析第42-43页
    4.6 SCR2与ESRK2;ESRK28与SCR2;SRKJ与THL1;ESRK28与SCR28相互作用检测第43-48页
第五章 讨论第48-52页
第六章 结论第52-54页
参考文献第54-58页
致谢第58-60页
在读期间发表的学术论文第60-62页
在读期间参与的科研项目第62页

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