中文摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
1.1 甘蓝的自交不交亲和性研究现状 | 第12页 |
1.2 甘蓝的自交不交亲和相关蛋白研究现状 | 第12-14页 |
1.3 S单倍型的进化机制研究 | 第14-15页 |
1.4 甘蓝S-位点单元型的演化 | 第15-18页 |
1.5 十字花科S位点的演变 | 第18-19页 |
1.6 S位点的重组 | 第19页 |
1.7 蛋白质的相互作用与S位点的进化 | 第19-20页 |
1.8 酵母双杂交技术和酵母细胞壁的演化 | 第20-24页 |
1.8.1 酵母双杂交技术实验原理 | 第20-21页 |
1.8.2 酵母细胞壁的进化起源 | 第21页 |
1.8.3 性黏附素功能和进化 | 第21-22页 |
1.8.4 酵母细胞壁基因和蛋白的适应进化 | 第22-24页 |
第二章 引言 | 第24-28页 |
2.1. 意义 | 第24-25页 |
2.2. 技术路线 | 第25-28页 |
第三章 材料与方法 | 第28-36页 |
3.1 植物材料和菌株 | 第28页 |
3.2 实验方法 | 第28-29页 |
3.2.1 总RNA提取和cDNA合成 | 第28页 |
3.2.2 引物设计 | 第28-29页 |
3.3 SCR2、ESRK2(SRK胞外域)、THL1的RT-PCR扩增 | 第29-30页 |
3.3.1 PCR扩增SCR2基因 | 第29页 |
3.3.2 eSRK2基因的扩增 | 第29-30页 |
3.3.3 THL1基因的扩增 | 第30页 |
3.4 酵母载体的构建 | 第30-34页 |
3.4.1 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第31页 |
3.4.2 基因目的片段的回收 | 第31页 |
3.4.3 目的片段的转化与测序 | 第31-32页 |
3.4.4 生物信息学分析 | 第32页 |
3.4.5 提取质粒 | 第32页 |
3.4.6 酵母双杂交表达载体与目的基因片段的限制性内切酶消化 | 第32-33页 |
3.4.7 酵母双杂交表达载体与目的片段的链接 | 第33页 |
3.4.8 酵母双杂交重组载体的构建 | 第33-34页 |
3.5 酵母双杂交系统鉴定相互作用 | 第34-36页 |
3.5.1 重组酵母双杂交表达质粒的毒性检测 | 第34-35页 |
3.5.2 重组诱饵载体的自激活检测 | 第35页 |
3.5.3 SRKJ与THL1,SCR2与eSRK2,eSRK28与SCR2相互作用检测 | 第35-36页 |
第四章 结果与分析 | 第36-48页 |
4.1 甘蓝核酸的提取 | 第36页 |
4.1.1 甘蓝总DNA的提取 | 第36页 |
4.1.2 甘蓝总RNA的提取 | 第36页 |
4.2 Ⅰ型和Ⅱ型的SCR2、ESRK2、THL1的基因克隆及序列分析 | 第36-39页 |
4.3 重组质粒PGADT7-ESRK2、PGBKT7-SCR2、PGADT7-SRKJ和PGBKT7-THL | 第39-41页 |
4.4 诱饵蛋白毒性及其自激活检测分析和PGBKT7-SRK毒性检测分析 | 第41-42页 |
4.5 融合表达分析 | 第42-43页 |
4.6 SCR2与ESRK2;ESRK28与SCR2;SRKJ与THL1;ESRK28与SCR28相互作用检测 | 第43-48页 |
第五章 讨论 | 第48-52页 |
第六章 结论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
致谢 | 第58-60页 |
在读期间发表的学术论文 | 第60-62页 |
在读期间参与的科研项目 | 第62页 |