早期胚胎发育过程中印记基因的表达研究
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-25页 |
| 1.1 印记基因 | 第11-16页 |
| 1.1.1 基因印记的概念及研究意义 | 第11-12页 |
| 1.1.2 印记基因的发现 | 第12页 |
| 1.1.3 印记基因的特点及识别 | 第12-13页 |
| 1.1.4 印记基因研究模型 | 第13-14页 |
| 1.1.5 各个基因的位置、来源以及功能 | 第14页 |
| 1.1.6 基因印记与动物克隆技术 | 第14-15页 |
| 1.1.7 基因印记与疾病 | 第15-16页 |
| 1.2 早期胚胎单细胞的获取 | 第16-18页 |
| 1.2.1 小鼠受精 | 第16-17页 |
| 1.2.2 小鼠的超数排卵 | 第17页 |
| 1.2.3 Whitten效应 | 第17-18页 |
| 1.3 单细胞基因表达 | 第18-25页 |
| 1.3.1 单细胞基因表达鉴定的发展历程 | 第18-19页 |
| 1.3.2 单细胞提取的原理 | 第19-20页 |
| 1.3.3 细胞异质性 | 第20-21页 |
| 1.3.4 单细胞RNA-Seq技术 | 第21-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-45页 |
| 2.1 实验动物品系 | 第25页 |
| 2.2 主要仪器 | 第25-27页 |
| 2.3 主要试剂 | 第27-33页 |
| 2.3.1 常规试剂 | 第27页 |
| 2.3.2 各类缓冲液和培养液的配制 | 第27-33页 |
| 2.4 引物设计及合成 | 第33-35页 |
| 2.5 胚胎转移针的制备过程 | 第35页 |
| 2.6 收集CD1小鼠胚胎并培养 | 第35-37页 |
| 2.7 单细胞cDNA提取的过程 | 第37-41页 |
| 2.8 磁珠纯化cDNA | 第41页 |
| 2.9 引物设计的步骤 | 第41页 |
| 2.10 实时荧光定量PCR的步骤 | 第41-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-57页 |
| 3.1 基因信息统计 | 第45-47页 |
| 3.2 实验样本量 | 第47-48页 |
| 3.3 胚胎的发育过程 | 第48-49页 |
| 3.4 单细胞的分离 | 第49-50页 |
| 3.5 单细胞cDNA提取后的验证 | 第50-52页 |
| 3.6 印记基因的验证 | 第52-53页 |
| 3.7 实时荧光定量分析 | 第53-57页 |
| 4 讨论 | 第57-59页 |
| 4.1 关于单细胞检测技术 | 第57-58页 |
| 4.2 关于小鼠超数排卵 | 第58页 |
| 4.3 关于检测结果 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
