| 缩略词对照表 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-28页 |
| 1.1 研究目的及意义 | 第12页 |
| 1.2 国内外研究进展 | 第12-25页 |
| 1.2.1 黄瓜黑刺的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2.2 黄酮类化合物的功能和对人体的影响 | 第13-14页 |
| 1.2.3 类黄酮的分类 | 第14-15页 |
| 1.2.3.1 黄酮、黄酮醇和异黄酮 | 第14-15页 |
| 1.2.3.2 黄烷酮和黄烷醇 | 第15页 |
| 1.2.3.3 花青素 | 第15页 |
| 1.2.4 植物类黄酮主要的生物合成途径 | 第15-18页 |
| 1.2.4.1 黄酮和异黄酮的合成 | 第16页 |
| 1.2.4.2 黄酮醇的合成 | 第16-18页 |
| 1.2.4.3 花色素和原花色素的合成 | 第18页 |
| 1.2.5 转录因子对类黄酮合成的调控 | 第18-20页 |
| 1.2.6 植物类黄酮代谢途径关键酶的研究进展 | 第20-25页 |
| 1.2.6.1 苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonialyas,PAL) | 第21页 |
| 1.2.6.2 4-香豆酸：辅酶A连接酶(4CL) | 第21-23页 |
| 1.2.6.3 查尔酮合酶(chalcone synthase,CHS) | 第23-24页 |
| 1.2.6.4 植物谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-transferases,GST) | 第24-25页 |
| 1.3 瞬时表达分析在基因功能研究上的应用 | 第25页 |
| 1.4 酵母单杂交技术的原理和应用 | 第25-26页 |
| 1.5 研究内容和技术路线 | 第26-28页 |
| 1.5.1 研究内容 | 第26页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第26-28页 |
| 2. 材料与方法 | 第28-42页 |
| 2.1 试验材料 | 第28-29页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第28页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第28页 |
| 2.1.3 酶及生化试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.4 PCR引物 | 第29页 |
| 2.1.5 组织培养培养基组分 | 第29页 |
| 2.2 试验方法 | 第29-41页 |
| 2.2.1 RNA提取 | 第29-30页 |
| 2.2.2 RNA质量检测 | 第30页 |
| 2.2.3 RNA反转录为cDNA | 第30-31页 |
| 2.2.4 基因克隆 | 第31页 |
| 2.2.5 PCR产物的回收 | 第31-32页 |
| 2.2.6 连接克隆载体及大肠杆菌感受态DH5α制备与转化 | 第32-33页 |
| 2.2.7 PCR验证正确连接后测序 | 第33页 |
| 2.2.8 质粒DNA的提取 | 第33-34页 |
| 2.2.9 DNA的提取 | 第34-35页 |
| 2.2.10 载体的构建 | 第35-37页 |
| 2.2.11 番茄的遗传转化及转基因植株的PCR验证 | 第37-39页 |
| 2.2.12 拟南芥的遗传转化及转基因植株的PCR验证 | 第39页 |
| 2.2.13 黄瓜黑白刺代谢物提取及液质连用方法 | 第39-40页 |
| 2.2.14 瞬时表达实验 | 第40页 |
| 2.2.15 总酚和类黄酮含量测定 | 第40页 |
| 2.2.16 木质素含量测定 | 第40-41页 |
| 2.2.17 发芽率实验 | 第41页 |
| 2.3 数据处理 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-53页 |
| 3.1 差异表达基因的获得 | 第42页 |
| 3.2 所选基因在黑刺黄瓜果皮中的表达量高于白刺黄瓜果皮中的表达量 | 第42-44页 |
| 3.3 瞬时表达试验表明Cs4CL过表达能使黄瓜白刺中合成黄酮醇 | 第44-45页 |
| 3.4 黑刺性状候选基因CsMYB60不能直接调控Cs4CL的表达 | 第45-47页 |
| 3.5 Cs4CL OE转基因番茄验证和表型鉴定 | 第47-50页 |
| 3.5.1 Cs4CL OE转基因番茄验证和Cs4CL表达量分析 | 第47-48页 |
| 3.5.2 Cs4CL OE转基因番茄植株叶片中木质素含量升高 | 第48页 |
| 3.5.3 Cs4CL OE转基因番茄植株叶片和果实中总酚、类黄酮含量升高 | 第48-50页 |
| 3.6 Cs4CL OE转基因拟南芥验证和表型鉴定 | 第50-53页 |
| 3.6.1 Cs4CL OE转基因拟南芥验证和Cs4CL表达量分析 | 第50-51页 |
| 3.6.2 Cs4CL OE转基因拟南芥植株叶片中总酚、类黄酮含量升高 | 第51-52页 |
| 3.6.3 Cs4CL OE转基因拟南芥植株花序茎中木质素的含量无明显变化 | 第52页 |
| 3.6.4 Cs4CL OE转基因拟南芥种子萌发速率快于野生型种子 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-56页 |
| 4.1 黄瓜遗传转化分析 | 第53页 |
| 4.2 Cs4CL过表达对拟南芥花序茎中木质素含量的影响 | 第53-54页 |
| 4.3 瞬时表达试验的可行性分析 | 第54页 |
| 4.4 Cs4CL调控机制的预测分析 | 第54-56页 |
| 5 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-69页 |
| 附录 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
